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文档简介
1、题型培优4PCR的相关问题分析(单选题每题2分,多选题每题3分)题型一PCR技术及其操作过程(2018常熟中学)下面关于多聚酶链式反应(PCR)的叙述,正确的是()PCR过程中需要引物,是为了使DNA双链分开PCR技术利用DNA双链复制的原理,可在短时间内大量扩增目的基因延伸过程中需要Taq酶、ATP、4种核糖核苷酸PCR过程中边解旋边复制下列有关PCR技术的叙述,错误的是()变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNAPCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高3.(2018盐城中
2、学)下图表示PCR扩增某个目的基因的基本过程,有关叙述正确的是()PCR技术的主要原理是DNA复制,解旋酶和DNA聚合酶分别在图中两步中起作用据图分析PCR操作过程中使用的DNA聚合酶至少要能忍受72C的高温PCR技术使用的前提是能够利用目的基因的部分序列合成至少1种弓I物D.因为引物不能重复使用,所以在第n轮扩增过程中至少消耗2个引物(2018如皋调研)用PCR技术将DNA分子中的A片段进行扩增,设计了引物I、II,其连接部位如右图所示X为某限制酶识别序列。扩增后得到的绝大部分DNA片段是下图中的()(2017江苏卷(9分)金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多
3、聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程如右栏上图所示,请回答下列问题:729t步订二配“gm72”步黑3J第二轮循环h二“OE_承贮出彈I(1)从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA,通过获得用于PCR扩增。设计一对与MT基因两端序列互补配对的弓|物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在弓|物中需要增加适当的位点。设计引物时需要避免引物之间形成,而造成引物自连。图中步骤1代表,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基
4、组成有关,长度相同但的引物需要设定更高的退火温度。如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有(填标号:升高退火温度;降低退火温度;重新设计引物)。题型二PCR与DNA复制的比较及相关数量等问题(2018响水中学)下图表示利用PCR技术扩增目的基因的部分过程,其原理与细胞内DNA复制类似。下列叙述错误的是()A.从理论上推测,第二轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/4在第二轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因耐热的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3端PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如
5、下图所示)。下列有关叙述正确的是()錘5Y0“丁一CH5H引物I)h庭r4:CA;5*-f引轴D、95fj55%:卄GC)HG(T-C33*:”*”+A-GV72弋引物II为H0CC5,温度降至55C时与a链结合从理论上推测,第四轮循环产物中引物I、弓I物II均含有的DNA片段所占的比例为15/16PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应用PCR方法扩增目的基因时不需要知道基因的全部序列属VGGTC3rh傩-C-CA-G5172r(2018镇江一模节选)(6分)在遗传病监测及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制上百万份的DN
6、A拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。请据图回答相关问题:CiCiClI)(引物II)护一CCAG5PJUHyC-CA-J5r在PCR中先用95C高温处理的目的是;而这一过程中在细胞内DNA复制时是通过实现的。在PCR技术中所需要的引物实质上是一种若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入个弓I物。在对样品DNA进行分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是。(8分)PCR技术是把DNA片段在体外酶的作用下,合成许许多多相同片段的一种方法利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段,它的基本过程如下图
7、所示。请回答:(图中表示每次扩增过程中需要的引物,每个引物约含20个核苷酸,并分别与DNA片段两端碱基互补,其作用是引导合成DNA子链。)性3肚fl运忡径卜巧1(45-55K.)化PCR技术的原理是模拟生物体内的过程。PCR扩增过程中需要对DNA片段进行高温处理,其目的是,此过程在生物体内称为,需酶的参与。假如引物都用3H标记,从理论上计算,所得DNA分子中含有3H标记的占。(4)假定DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,从理论上计算需要个游离脱氧核苷酸。10.(2018苏锡常镇二模节选)(7分)某植物蛋白酶抑制剂II基因是重要的抗虫基因该基因转录的mRNA下游序列已知,但其上游序列未知。现利用PCR等技术扩增该基因,具体原理如下图所示,其中表示有关过程,IIII表示有关物质。请回答下列问题:未知序婀mRNA已知序列PCRTTTgIaaa(.a)li_r卅过程反应体系中,需要加入种引物,还需加入酶,生成杂合链物质I。利用DNA末端转移酶催化过程,使cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列AAA(A),其目的进而利于过程扩
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