美容杜鹃叶挥发油化学成分的气相色谱质谱联用分析

1、美容杜鹃叶挥发油化学成分的气相色谱-质谱联用分析 作者：付先龙， 林颖，庄平，白洁，陈放【摘要】 目的研究美容杜鹃叶挥发油化学成分。 方法采用水蒸气蒸馏的方法提取挥发油，以气相色谱-质谱联用（GC-MC）技术结合计算机检索对其化学成分进行分离和鉴定，用色谱峰面积归一化法计算各组分的相对含量。结果从美容杜鹃叶挥发油中共鉴定出64种化合物，其含量占挥发油总量的90.00%。其中主要成分是3,7,11,15四甲基2十六烯1醇 （5.68%）、1,3,5三甲基苯（5.53%）、2,3,6三甲基萘(4.75%)、对映16贝壳杉烯(3.66%)、十九烯(2.88%)、3二十烷炔(2.63%)、连三甲苯(2

2、.46%)、天然4乙基愈创木酚(2.39%)、邻苯二甲酸二丁酯(2.39%)、2,6二甲基萘(2.20%)。结论 研究结果为进一步开发和利用美容杜鹃奠定基础。 【关键词】 美容杜鹃 挥发油 气相色谱 质谱联用Abstract：ObjectiveTo analyze the chemical constituents of volatile oils from leaves of Rhoodendron calophytum Franch.MethodsThe volatile oils were extracted by steam distillation.The chemical comp

3、ounds were separated and identified by capillary GC-MS method. The relative content of each component was calculated by area normalization. ResultsSixty four compounds were identified from leaves of Rhododendron calophytum Franch.The ratio of identification of total compounds was 90.00%.The main com

4、ponents are 3,7,11,15-tetramethyl-2-hexadecen-1-ol(5.68%);1,3,5-Trimethylbenzene(5.53%);naphthalene,2,3,6-trimethy(4.75%);kaur-16-ene(3.66%);1-Nonadecene(2.88%);3-eicosyne(2.63%);Hemimellitene(2.46%); p-ethylguaiacol(2.39%);dibutyl phthalate(2.39%);naphthalene,2,6-dimethyl(2.20%).ConclusionThe resul

5、t of research provides a scientific method for the reasonable exploitation and utilization of Rhododendron calophytum Franch.Key words：Rhododendron calophytum Franch.; Volatile oil; GC/MS美容杜鹃Rhododendron calophytum Franch.为杜鹃花科杜鹃属植物，常绿小乔木或呈灌木状，中国特有种。产秦岭北坡陕西的西太白山（黄柏塬)，南坡仅见于陕西的凤县和甘肃的文县；生于海拔1 7002 600

6、m的山坡林中。主要分布于陕西(大巴山)和四川1。杜鹃属植物含有黄酮类、萜类、苷类、酚类、鞣质、挥发油等多种化学物质，其中许多成分有药用价值，具有止咳、祛痰、平喘、降压、降胆固醇、利尿、抗菌等多方面的用途2，还可治心血管病、风湿等。紫花杜鹃、满山红、烈香杜鹃等已制成多种剂型的药品，用于治疗支气管炎。有些杜鹃枝、叶或花含挥发油，具有浓烈香气，用于香料工业。国内外关于杜鹃或杜鹃挥发油化学成分的研究结果表明,不同地区不同品种的杜鹃化学成分差异较大。目前，从美容杜鹃分离得到的化学成分主要有黄酮及其苷类等3，本实验运用气相色谱-质谱联用（GC-MS）方法首次分析了美容杜鹃挥发油中的化学成分，为合理开发这一

7、植物资源提供参考。1 器材挥发油提取器，LABOROTA 4000标准型旋转蒸发仪，DWK型加热器，ZK-82A型真空干燥箱（上海市实验仪器总厂），QP2010型气相色谱-质谱-计算机联用仪（日本岛津公司）。植物材料采自中国科学院植物研究所华西亚高山植物园，经四川大学生命科学学院白洁博士鉴定为杜鹃花科杜鹃属美容杜鹃Rhododendron calophytum Franch.。 无水硫酸钠、石油醚（3060）、醋酸乙酯均为分析纯。2 方法2.1 材料处理将美容杜鹃叶子放在阴凉通风处，自然阴干，用粉碎机粉碎，过40目筛。2.2 挥发油的提取取粉碎后的美容杜鹃叶子173 g，放在挥发油提取器中，采

8、用水蒸气蒸馏法蒸馏68 h，至挥发油的体积不再增加。将上层液体取出，用石油醚（3060）萃取45次，合并萃取液。加入活化过的无水硫酸钠，放置冰箱（4）过夜。过滤除去无水硫酸钠，用旋转蒸发仪浓缩，最后经真空干燥得到挥发油。得油率为0.05%，挥发油为黄色，比水轻的油状液体，具有浓郁的特殊臭味。将样品溶于醋酸乙酯中，置于棕色磨口玻璃瓶中，存放于4冰箱中备用。2.3 条件2.3.1 气相色谱条件OV-1弹性石英毛细管色谱柱(0.25 mm30 m,0.25 m)；柱温：程序升温起始温度为70，以3/min升温至230，保持2 min。进样口温度为250,进样量0.4 l,载气为高纯度氦气（99.99

9、9%），柱内载气流量为0.9 ml/min。2.3.2 质谱检测条件EI电离源，电子能量70 ev,离子源温度200;扫描质量范围：30500 AMU;倍增器电压2 kV;质谱检索标准库：NIST05s.LIB和NIST05.LIB库。3 结果采用GC-MS法对美容杜鹃挥发性化学成分进行了分析，共分离出76个组分。通过质谱分析和进行计算机标准谱库检索， 并参考相应化合物在类似色谱分析条件下的保留时间4，5鉴定出64个化合物， 已鉴定的成分含量占挥发油总量的90.00%，并通过总离子流色谱图的面积归一化法计算出各成分的相对含量。美容杜鹃挥发油的化学成分分析结果见表1。表1 美容杜鹃挥发油的化学成

10、分分析结果（略）根据气质联用分析结果可以看出，美容杜鹃叶挥发油中的化学成分涵盖了烷、烯、芳香环、酮、酚、醇、醛和酯类，主要是单萜、倍半萜以及它们的含氧衍生物。醇类成分6种，相对含量为5.48%；醛类成分2种，相对含量为1.66%；酯类成分4种，相对含量为5.36%；烯烃类成分9种，相对含量为11.91%；烷烃类成分9种，相对含量为10.66%；酮类成分7种，相对含量为6.75%；酸类成分2种，相对含量为2.31%;酚类成分7种，相对含量为8.94%;含氧化合物33种，占40.07%。其中含量在2%以上的有3,7,11,15-四甲基-2-十六烯-1-醇 （5.68%）、1,3,5-三甲基苯（5.

11、53%）、2,3,6-三甲基萘(4.75%)、对映-16-贝壳杉-烯(3.66%)、十九烯(2.88%)、3-二十烷炔(2.63%)、连三甲苯(2.46%)、天然4-乙基愈创木酚(2.39%)、邻苯二甲酸二丁酯(2.39%)、2,6-二甲基萘(2.20%)。4 讨论本实验所鉴定的组分与文献报道的杜鹃属的其他种类挥发油化学成分及其含量有明显的不同，说明同属不同种的植物其化学成分、含量存在较大的差异，提示生长环境、提取方法、提取部位的不同均可能会造成其化学成分的种类、含量及药效发生变化，为以后美容杜鹃的研究利用提供了实验依据。 在美容杜鹃已鉴定的物质中，法呢烯(farnesene) 6、邻苯二甲酸

12、二丁酯（dibutyl phthalate）7、植醇(3,7,11,15-tetramethyl-2-hexadecen-1-ol) 7，8、月桂醇(1-tetradecanol)9、亚油酸10、反式-氧化芳樟醇(linalool oxide trans)11在其他杜鹃中亦有发现。而对映-16-贝壳杉-烯(Ent-kaur-16-ene)、d-马鞭草烯醇(d-verbenol)、天然4-乙基愈创木酚(p-ethylguaiacol)、丙酮香叶酯(Nerylacetone)、奥菊环烯（chamazulene）、5-乙基香茅烯（5-ethyl-1-nonene）、水杨酸甲酯(salicylic a

13、cid,methyl ester) 、芴(fluorene) 、六氢合金欢丙酮(hexahydrofarnesyl acetone)等大多数物质都是首次在杜鹃花属植物中被发现。美容杜鹃的挥发油成分中邻苯二甲酸二丁酯有驱虫避蚊及抗氧化、抗癌、抗菌活性12；芴是一种重要的药品、化学原料药和中间体，用于医药、农药（消毒剂、杀虫剂等）；奥菊环烯对于风湿、关节炎具有很好的理疗效果，同时也是一种很好的止痛剂；乙位紫罗兰酮具有幽雅的紫罗兰花香，可以用于日化，食用香精，也可以做维生素E的原料。虽然实验结果得出一些挥发油化学成分含量并不是很高，但实际往往一些低含量物质生物活性比较高13，因此，有必要结合实验做进

14、一步分析研究，尽可能最大限度地开发利用美容杜鹃的药用价值和经济价值。【参考文献】 1中国科学院西北植物研究所.秦岭植物志，第1卷，第4册M.北京：科学出版社,1983：58.2四川医学院.中草药学M.北京：人民卫生出版社,1983：293.3陈封政,李仲芳,李书华，等.西部特有植物美容杜鹃花开放过程中化学成分的变化J.安徽农业科学，2006，34(9)：1866.4丛浦珠,苏克曼.分析化学手册，第9分册，第2版M.北京：化学工业出版社，2000：1091.5Heller SR,Milne GWA,EPA-NZH Mass Spectrol DataM.Base Vol.l-2.Washingt

15、on:US Government Printing Office,1978：2.6李维卫，胡凤祖，师治贤.藏药材烈香杜鹃挥发油化学成分的研究J.云南大学学报（自然科学版），2004，26（6A）：48.7李红霞，董晓楠，丁明玉.四川凉山杜鹃挥发油成分的同时蒸馏萃取与GC/MS分析J.药物分析杂志,2000，20(2)：78.8赵晨曦，梁逸曾，李晓宁,等.杜鹃嫩枝叶挥发油化学成分研究J.药学学报，2005，40(9)：854.9蒲自连.高山杜鹃植物挥发油的化学成分J.山地研究，1993,11(4)：267.10胡浩斌，郑尚珍，黄彬弟，等. 烈香杜鹃挥发油的化学成分J.兰州医学院学报，2004，30（3）：31.11张雯洁，李忠琼，余 珍，等.樱草杜鹃的挥发油成分J.药物分析杂志,1997,17(6)：386.12Iatropoulos MJ,Jeffrey AM,Enzmann HG,et al. Asessment of chronic and carcinogenicity in an acclerated cancer bioassay in rats of moxifloxacin,aquinolone antibiot