药物血浆半衰期测定

1、药物血浆半衰期测定【实验目的】1.以磺胺嘧啶钠为例学习测定药物半衰期（t1/2）等药动学参数的基本方法。2.理解常用药动学参数的临床意义7/31/20222【实验原理】磺胺类药物为对氨基苯磺酰胺类化合物，在酸性溶液中，可与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐。在碱性溶液中，重氮盐可与酚类化合物（麝香草酚）起偶氮反应，形成橙红色的偶氮化合物。可在525nm波长下进行比色测定。根据Beer-Lamber定律，浓度与光密度成正比关系。其化学反应式如下：橙红色7/31/20223【材料与方法】 一、实验动物：家兔1只。 二、器材与药品：试管24只，移液吸管10ml，1只；1ml，2只；2ml 7只；移液器1

2、支，吸头若干，试管夹，试管架，离心机，722型分光光度计，手术剪，眼科剪，止血钳，动脉夹，眼科镊，缝线，药棉，纱布，捆扎绳，注射器10ml 1支，5ml 1支。5%磺胺嘧啶钠溶液，7.5%三氯醋酸溶液，0.5%亚硝酸钠溶液，0.5% 麝香草酚溶液（溶于20氢氧化钠内），草酸钾结晶，25%氨基甲酸乙酯溶液，肝素注射液。 7/31/20224 三、方法与步骤1.取试管5只，依次用A1、A2、A3A5标记，各加入7.5%三氯醋酸2ml备用。 2.取试管5只，依次用B1，B2，B3B5标记，各加入草酸钾结晶几粒(抗凝)。3.取家兔，称重，取血方法1： 以乌拉坦(4ml/kg)耳缘静脉注射麻醉，麻醉后将

3、兔背位固定于手术台上，正中切开颈部皮肤，分离一侧颈总动脉，结扎其远心端，并在近心端夹上动脉夹，以阻断血流，再将放血导管向心脏方向插入颈总动脉内，用线打活结固定。取血方法2：耳缘静脉近心端开始向远心端方向抽血1ml 4. 耳缘静脉注入3%磺胺嘧啶钠4ml/kg，记录注完时间（准确到分钟）。5.给药前、给药后5min、10min、20min、30min，松开动脉夹，放血约1ml，分别置于B1 、 B2、B3、B4、B5管，迅速摇匀抗凝，记录取血标本的准确时间。 注意在取血前先要放掉动脉插管内的残血。7/31/20225动脉取血约1ml准确移液100l7.5%三氯醋酸2ml混匀1500转/分离心5m

4、in准确移上清液1.加亚硝酸钠2.加0.5%麝香草酚1ml525nm测光密度ABC偶氮反应橙红色7/31/202266.然后准确吸取100l加入相应的各A管, 各管以1500转/分离心5min，分别取离心后的上清液，加0.5%亚硝酸钠溶液0.5 ml，摇匀，再加0.5%麝香草酚1ml，可见橙红色反应。以给药前血样作空白对照，用722型分光光度计于525nm波长下进行比色，测定各时间点的光密度，在标准曲线上查得磺胺钠浓度。 C=582D-537/31/20227根据吸光度,线性方程 y=582x-53, 计算浓度,求对数值. (Excel 常用函数 log10 计算对数值. )将给药时间t 与已

5、求得的磺胺药血浆浓度对数值做直线回归, 根据一级消除动力学公式: lgCt=lgCo+ (-K/2.303)t回归方程的斜率(-K/2.303), Excel 常用函数 slope斜率 计算得(-K/2.303)= -19.6, 计算K, t1/2=0.693/K, Vd=D/Co, Cl=K*Vd; 已知 t , lgCt, 计算Co, 从而计算Vd, Cl给药后不同时间点的磺胺钠钠浓度管号12345给药时间光密度值磺胺钠浓度磺胺钠对数浓度7/31/202297.计算根据一级动力学消除公式 t 将给药时间t与已求得的磺胺血浆浓度对数值lg Ct作直线回归，即可得回归方程的斜率（- K）和截距

6、（lgCo）7/31/202210应用公式t1/2K，Vd=D/Co，CL=KVd，便可求得t1/2、Vd和CL。7/31/2022111.计算器（Casio fx180或fx3600p）的操作步骤MODE 2 屏幕显示LR，进入线性回归计算状态；INV AC消除储存器内的全部数据；XoDo自变量输入； DATA因变量数据输入；INV A（截距），INV B（斜率） INV r（相关系数）；INV X得期望值。7/31/2022122.计算机的操作步骤（以Excel2002为例） 将数据输入Excel中，调用其自带的函数，根据对话框要求操作即可完成运算。INTERCEPT（known-ys，known-xs）求线性回归拟合线方程的截距。CORREL（arrayl，array2）返回两组数值的相关系数。SLOPE（Known-ys known- xs）返回经过给定数据点的线性回归拟合线方程的斜率。FORECAST（X，Known-ys known- xs）通过一线性回归拟合线返回一个预测值。7/31/202213【注意事项】麻醉药静脉推注速度不宜过快，颈总动脉分离及插管给药时间及各取血点均要准确记录，加样精确，减少误差。在取血