生活中的DNA科学

1、西南大学网络与继续教育学院课程考试试题卷类别：网教专业:公共课2017年6月课程名称【编号】：生活中的DNA科学【1194】 A卷大作业满分：100分请从下面的题目中任选4题作答，每题25分。一、什么是cDNA文库？如何构建？二、简述中心法则的主要内容。三、列举三种基于基因工程研发的产品，并对其进行简要描述。四、常用的基因载体有哪些？载体必须满足哪些条件？五、怎么证明遗传物质是DNA而不是蛋白质？六、试论DNA科学在法医检验中的作用。一、什么是cDNA文库？如何构建？cDNA文库是指某生物某发育时期所转录的全部mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。经典cDNA文库

2、构建的基本原 理是用Oligo(dT)作逆转录引物，或者用随机引物，给所合成的cDNA加上适当 的连接接头，连接到适当的载体中获得文库。其基本步骤包括：RNA的提取(例 如异硫氤酸胍法，盐酸胍一有机溶剂法，热酚法等等，提取方法的选择主要根据 不同的样品而定)，要构建一个高质量的cDNA文库，获得高质量的mRNA是 至关重要的，所以处理mRNA样品时必须仔细小心。由于RNA酶存在所有的 生物中，并且能抵抗诸如煮沸这样的物理环境，因此建立一个无RNA酶的环境 对于制备优质RNA很重要。在获得高质量的mRNA后，用反转录酶Oligo（dT） 引导下合成cDNA第1链，cDNA第2链的合成（用RNA酶

3、H和大肠杆菌 DNA聚合酶I，同时包括使用T4噬菌体多核苷酸酶和大肠杆菌DNA连接酶进 行的修复反应），合成接头的加入、将双链DNA克隆到载体中去、分析cDNA插 入片断，扩增cDNA文库、对建立的cDNA文库进行鉴定。这里强调的是对载 体的选择，常规用的是入噬菌体，这是因为入DNA两端具有由12个核苷酸的 粘性末端，可用来构建柯斯质粒，这种质粒能容纳大片段的外源DNA。二、简述中心法则的主要内容。答：是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信 息的转录和翻译的过程。也可以从DNA传递给DNA，即完成DNA的复制过程。 这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。在某些病

4、毒中的RNA自我复制（如 烟草花叶病毒等）和在某些病毒中能以RNA为模板逆转录成DNA的过程（某些 致癌病毒）是对中心法则的补充。中心法则经常遭到误解，尤其与遗传信息由DNA到RNA到蛋白质的标准流程 相混淆。有些与标准流程不同的信息流被误以为是中心法则的例外，其实朊病毒 是中心法则现时已知的唯一例外。遗传信息的标准流程大致可以这样描述：“DNA 制造RNA，RNA制造蛋白质，蛋白质反过来协助前两项流程，并协助DNA自我 复制”.四、常用的基因载体有哪些？载体必须满足哪些条件？答：常用的基因载体有：质粒、噬菌粒、人工染色体载体。必须满足以下条件：1）具有一个或多个限制酶切点，以供外源基因插入其

5、中；2）具有标记基因，以鉴定重组是否进入受体细胞；3）能自我复制，否则可能导致重组丢失；4）对受体细胞无害；5）大小应适合，以便提取和在体外进行操作，太大不便操作。六、试论DNA科学在法医检验中的作用。答:虽然我国应用dna鉴定技术的时间较短，但是dna鉴定技术却凭借自身高效 快速的特点，广泛的应用到刑事侦查学、司法鉴定学等领域，在一定程度上促 进了这些学科的进一步发展，特别是在刑事侦查活动中，dna鉴定技术不仅为 侦查活动提供了有效的线索，还能够直接指明犯罪嫌疑人，成为了打击犯罪的有 利武器。尤其是在侦破凶杀以及强奸等重大疑难案件中，侦查人员可以从案发现 场遗留的各种生物材料比如血迹、唾液等

6、，从中提取dna，然后将dna和嫌疑 人相比对，为案件提供有利的证据。dna鉴定技术在刑事侦查中可以应用到很多 的案件的侦查，主要有凶杀案、强奸和强奸杀人案、以及拐卖儿童案等方面，下 面我们将对这些案件中dna鉴定技术的应用进行分析。第一，凶杀案件中dna鉴定技术的应用。在凶杀现场最有价值的物证一般都 是嫌疑人或者被害人遗留下的血迹，公安机关人员在对现场的物证进行采样后， 递交司法鉴定中心进行dna鉴定，通过嫌疑人或被害人遗留下的血迹的dna检 验结构进行比较，由此得到一定的侦查线索或者是直接锁定犯罪嫌疑人。利用 dna鉴定技术能够给凶杀案件提供一定的证据，帮助公安机关人员早日破案，将 凶犯绳

7、之于法。第二，强奸和强奸杀人案件中dna鉴定技术的应用。dna鉴定技术能根据被 害人阴道分泌物和男性精子结构上的差异将两者进行分离，提取纯精子的dna， 并且不受到阴道分泌物的影响，将案发现场中遗留下的混合版中精子的dna进 行分析，并且跟被害人体内遗留的精子的dna进行对比，就可以得出相关的结 论，利用这一鉴定技术，即使是轮奸案也能够得出正确的结论。第三，拐卖儿童案件中dna鉴定技术的应用。近些年来我国的儿童拐卖案频 繁发生，为了提高解救被拐卖儿童的工作水平，公安机关利用dna鉴定技术， 建立了被拐卖儿童以及其父母的dna数据库，在成功解救被拐卖儿童之后，通 过dna鉴定可以准确的帮助儿童找到自己的亲生父母，给儿童拐卖案件有了一 定的保障。第四，交通肇事案件中dna鉴定技术的应用。在肇事司机驾车逃逸后，为了 确定肇事的车辆，公安机关部门可以根据车辆上遗留的血迹或者是相关组织的 dna检验结果，将其和被害人的dna检验结果进行对比分析，那么就可以分析 出这辆车