2022-2023学年新教材高中生物第1章发酵工程章末总结课件新人教版选择性必修3

1、第1章发酵工程章末总结构建知识网络归纳专题小结泡菜、果酒、果醋制作中所用菌种及发酵条件控制的比较比较项目泡菜制作果酒制作果醋制作条件控制氧气无氧前期有氧，后期无氧有氧温度室温1830 3035 时间腌制15天左右1012天78天操作提示泡菜坛的选择；腌制的条件材料的选择与处理；防止发酵液被污染；控制好发酵条件；正确使用发酵装置下列关于泡菜、果酒、果醋制作相关的叙述，正确的是()A三者制作过程中的最适温度相同B在泡菜、果酒、果醋制作过程中都需要严格灭菌C发酵所用的菌种不同，但代谢类型相同D制作泡菜时泡菜坛一般要密封，主要目的是创造无氧条件【答案】D【解析】泡菜制作所需要的适宜温度是室温，果酒制作

2、所需要的适宜温度是1830 ，果醋制作所需要的适宜温度是3035 ，A错误；传统制作泡菜、果酒、果醋过程中不需要严格灭菌，B错误；泡菜制作使用的菌种是乳酸菌，代谢类型为异养厌氧型，果酒制作使用的菌种为酵母菌，代谢类型为异养兼性厌氧型，果醋制作使用的菌种为醋酸菌，代谢类型为异养需氧型，C错误；制作泡菜时泡菜坛一般要密封，主要目的是创造无氧条件，D正确。微生物的营养及功能、培养基类型及配制原则、无菌操作技术等是进行微生物培养与分离必不可少的知识。1培养基的制备配制培养基溶化定容调pH灭菌倒平板微生物的纯培养2无菌技术无菌技术主要包括消毒和灭菌。实验室中常用紫外线或化学药物进行消毒，如接种室、超净工

3、作台的紫外线消毒及用酒精擦拭双手消毒；灭菌的方法主要有灼烧灭菌、湿热灭菌、干热灭菌。另外还需注意操作过程中无菌环境的营造，如在酒精灯火焰附近进行操作。3倒平板严格按照教材操作步骤进行，倒平板时培养基需冷却至50 左右，在酒精灯火焰附近无菌区域进行倒平板操作，注意皿盖和皿底之间的部分不能溅有培养基，平板冷凝后，将平板倒过来放置。4接种常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，两者的比较如下：项目平板划线法稀释涂布平板法接种工具接种环涂布器关键操作连续划线梯度稀释；涂布平板操作注意事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度的范围结果可以获得单个菌落可以获得单个菌落

4、项目平板划线法稀释涂布平板法获取菌落从具有显著菌落特征的区域的菌落中挑取菌落从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌落优点操作简单，可以观察菌落特征，可以对混合菌进行分离可以观察菌落特征，可以进行菌落计数缺点不能进行计数操作复杂，吸收量较少，平板湿度大，容易造成菌落蔓延做“微生物的纯化培养与数量测定”实验时，下列相关叙述正确的是()A任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐B倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C进行接种时，采用平板划线法和稀释涂布平板法都可获得单个菌落，都可进行计数D进行微生物的数量测定，应在菌落数目稳定时，选择平板数在30300的菌落进行计数【答案】D【解析】

5、不同的微生物需要的营养不同，如自生固氮菌能利用空气中的N2为氮源，因而培养基中无需添加氮源，A错误；倒平板过程中为了防止杂菌污染，应该打开一条稍大于瓶口的缝隙，B错误；进行接种时，平板划线法和稀释涂布平板法都可获得单个菌落，但平板划线法不能进行计数，C错误；进行微生物的数量测定，为了使计数结果更准确，应在菌落数目稳定时，选择平板数在30300的菌落进行计数，D正确。下列关于平板划线法和稀释涂布平板法的描述，正确的是()A都要将菌液进行一系列的梯度稀释B平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面C稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基上进行培养D都会在培养基表面形成

6、单个菌落【答案】D【解析】平板划线法不需要进行梯度稀释，用接种环蘸取菌液直接在固体培养基上进行连续划线，当划线次数足够多时，可以获得单个菌落，A、B错误；稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面，当稀释度足够高时，可以获得单个菌落，C错误；平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基表面形成单个菌落，D正确。1利用选择培养基分离纯化某种微生物(1)在基本培养基中加入青霉素可分离纯化酵母菌、霉菌；在基本培养基中加入高浓度的食盐可分离纯化金黄色葡萄球菌。(2)普通培养基在无氧条件下可分离出厌氧型、兼性厌氧型微生物。(3)无氮培养基：分离纯化固氮菌，如圆褐固氮菌。(4)不含有机碳源的

7、培养基：分离纯化自养型细菌，如硝化细菌。(5)将石油作为唯一碳源的培养基可分离出能分解石油的细菌。鉴别和分离微生物的实验设计2利用鉴别培养基检验某种微生物是否存在鉴别培养基时根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同种类的微生物。例如利用刚果红染色法可以鉴别纤维素分解菌，纤维素分解菌的菌落会出现以该菌为中心的透明圈。甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是()组别粉状硫10 gK2HPO44 gFeSO40.5 g蔗

8、糖10 g(NH4)2SO40.4 gH2O100 mLMgSO49.25 gCaCl20.5 gA甲、乙、丙都是异养微生物B甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物C甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物D甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物【答案】D【解析】利用不同的选择培养基可分离出所需的微生物，从表格中可以看出，培养基中无氮源，培养基中无碳源，为完全培养基。由此可知，能在中生存的甲是固氮微生物，能在中生存的乙是自养微生物，丙只在中存活，为异养微生物，故D正确。典练素养提升素养解读：本章是发酵工程，通过学习传统发酵技术的应用、微生物的培养技术及应用，发酵工程及其应用，认识从

9、传统发酵技术到发酵工程发展的过程。本章涉及的核心素养有生命观念(结合生活或生产实例，举例说出培养基、灭菌等有关微生物培养的基本概念，掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌、平板划线法和稀释涂布平板法等技术的基本原理)、科学思维(了解传统发酵技术和发酵工程技术在日常生活、医药、食品、环保及其他农业生产上的重要应用)、科学探究(运用相关技术解决生产生活中有关微生物计数、微生物分离与培养等实际问题，针对人类生产或生活的某一需求，选取合适的技术和方法，尝试提出初步的构想，进行简单的设计)、社会责任(运用生物学的基本概念和原理，阐述发酵工程对人类生产和生活的影响)。1(生命观念)下表是某公司研发的一种培养大肠杆

10、菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4显色剂(伊红美蓝)琼脂含量/g10.05.05.02.00.212.0将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL(1)大肠杆菌的同化类型为_，从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于_。(2)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是_ _，因此需对培养基和培养皿进行_(填“消毒”或“灭菌”)，操作者的双手需要进行清洗和_。(3)根据用途划分，该培养基属于_(填“选择”或“鉴别”)培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中_换成_，若要鉴定能分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成_ _。(4)培养大肠杆菌时

11、，常用的接种方法是_和_。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为_。(5)使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是_(多选)。A制作果酒B由果酒制作果醋C制作泡菜D制作腐乳【答案】(1)异养型分解者(2)防止杂菌污染灭菌消毒(3)鉴别蛋白胨尿素酚红指示剂(4)平板划线法稀释涂布平板法单菌落(5)BC【解析】(1)大肠杆菌需要从培养基中获得碳源，因此其同化作用类型是异养型；大肠杆菌在生态系统的成分中充当分解者。(2)微生物培养时，关键是防止杂菌污染；对于培养基和培养皿需要进行灭菌处理，操作者的双手需要消毒处理。(3)培养基配方

12、中的伊红美蓝是鉴定大肠杆菌的试剂，因此，从用途上划分，该培养基属于鉴别培养基；若要分离能分解尿素的细菌，则需要保证培养基中以尿素为唯一氮源，即将蛋白胨换成尿素；鉴定能分解尿素的细菌，需要使用酚红指示剂。(4)微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法；由一个细菌繁殖产生的子细胞群体，称为单菌落。(5)制备果酒使用的微生物是酵母菌；制作果醋使用的微生物是醋酸菌；制作泡菜使用的微生物是乳酸菌；制作腐乳的微生物主要是毛霉。酵母菌和毛霉属于真核生物，醋酸菌、乳酸菌和大肠杆菌都属于原核生物。2(科学思维)下列有关传统发酵技术和发酵工程的应用的叙述，不正确的是()A制作果酒时瓶口要密闭，而制作果醋时中断

13、通氧可能会引起醋酸菌死亡B在变酸的果酒表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的C泡菜腌制的整个过程中，乳酸菌的数量呈先增加后稳定的趋势D发酵工程在农牧业上可以生产微生物肥料、微生物农药、微生物饲料等【答案】C【解析】酵母菌发酵产生酒精时需要缺氧的环境，所以制作果酒时瓶口应该密闭，而醋酸菌是好氧细菌，所以制作果醋时要一直通氧，若中断通氧可能会引起醋酸菌死亡，A正确；在变酸的果酒表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，B正确；泡菜腌制的整个过程中，乳酸菌的数量呈先增加后下降的趋势，C错误；发酵工程在农牧业上可以用来生产微生物肥料、微生物农药、微生物饲料，D正确。3(科学探究)为了调查

14、某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。下图是实验室内接种培养后得到的结果，下列相关叙述正确的是()A图B表示的是用平板划线法接种培养后得到的结果B可利用稀释涂布平板法测定该水样中的细菌数量C若该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时应注意对接种环进行干热灭菌D若该小组将得到的好氧型菌株接种到液体培养中并混匀，一部分静置培养，另一部分振荡培养，结果会发现：静置培养的细菌比振荡培养的细菌生长速度快【答案】B【解析】图B表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果，A错误；稀释涂布平板法可以用来进行微生物的分离和计数，故可利用稀释涂布平板法测定该水样中

15、的细菌数量，B正确；若该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时应注意对接种环进行灼烧灭菌，C错误；若该小组将得到的好氧型菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分静置培养，另一部分振荡培养，结果会发现：静置培养的细菌由于缺氧而比振荡培养的细菌生长速度慢，D错误。4(科学探究、社会责任)莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。据图回答问题。(1)由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为_，目的是_。(2)在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行_，将菌种接种到固体培养基的方

16、法有平板划线法和_法，从图中看本实验采用的是_(填“前者”或“后者”)。一段时间后，培养基出现无透明带菌落和有透明带菌落两种菌落，我们筛选的目的菌是_菌落中的细菌，该菌落生长所需的氮元素主要来源_ _。(3)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基，要如何设置对照组？_。(4)此实验中，甲同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而乙同学却选择出大约150个菌落。乙同学的实验结果产生的原因可能是_ _。(5)目的菌株液可以通过发酵工程大量获得，在发酵过程中，要随时检测培养液中_、产物浓度等，以了解发酵进程，及时添加必需的_，严格控制_、pH和溶解氧等发酵条件。【答案】(1)选择培养初步选

17、择能降解莠去津的细菌(目的菌)并提高其密度(2)梯度稀释稀释涂布平板后者有透明带莠去津(3)配制的培养基灭菌后不接种菌种，与实验组放在相同条件下培养(4)所取土样不同；操作失误，有杂菌混入(5)微生物数量营养组分温度【解析】(1)通过图解可以看出，从A瓶到C瓶的培养液中除莠去津外，没有其他氮源，而本实验的目的是选育能降解莠去津的细菌(目的菌)，同时通过更换培养液，提高目的菌的浓度。(2)如果直接取培养液进行接种，固体培养基中的菌落将会很密，无法进行纯化通过梯度稀释后再接种，培养基中菌落将会分开，这时就可以进行分离和纯化了，通过图中所示培养基上的菌落分布特征可以判断接种方法为稀释涂布平板法。培养

18、基中有透明带的菌落能够降解莠去津。(3)为了弄清非目的菌的来源，可以通过设置空白对照的方法来判断。如果不接种的培养基上依然有非目的菌，则说明非目的菌可能来自培养基；如果不接种的培养基上没有非目的菌，则说明非目的菌可能来自C瓶菌种。(4)甲、乙两同学的实验结果产生差别的原因可能有土壤取样不同，也可能是操作失误，乙同学操作时有杂菌混入。(5)发酵过程中，要随时检测培养液中微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，及时添加必需的营养组分，严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。对话命题专家典例(2020全国卷)某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究

19、人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题。(1)实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_。甲、乙培养基均属于_培养基。(2)实验中，初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2107 个/mL，若要在每个平板上涂布100 L稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_倍。(3)在步骤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是_(答出1点即可)。(4)若要测定淤泥中能

20、降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤_。(5)上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即_。考查角度从“选择培养基的营养组成和灭菌” “微生物的选择培养” “微生物的数量测定”“实验结果分析”等多个角度综合考查。考查目的通过考查考生的理解能力、获取信息能力和实验与探究能力，体现对学生生命观念、科学思维、科学探究等生物学科核心素养的培养。考查难度考查的知识点系统性强，注重记忆和理解，难度中等偏易。解题思路：(1)解题角度：结合微生物培养和计数有关的“选择培养基的营养组成和灭菌”“微生物的选择培养”“微生物的数量测定”“实验结果分析”等知识，进行综合

21、分析和解题。(2)解题步骤：找出题目中相关信息，结合教材相关知识点，进行作答。常用高压蒸汽灭菌法处理盛有水或培养基的摇瓶，乙为固体培养基，故需要加入Y琼脂；甲和乙培养基可以用于筛选能降解S的菌株，故均属于选择培养基。若要在每个平板上涂布100 L稀释液后的菌液，且每个平板上长出的菌落数不超过200个，则摇瓶M中的菌液稀释的倍数至少为21071 0001002001104倍。(3)当培养基中的S超过某一浓度后，可能会抑制菌株的生长，从而造成其对S的降解量下降。(4)要测定淤泥中能降解S的细菌的细胞数，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，稀释涂布到乙培养基上，培养后进行计数。(5)甲和乙培养基均含有水、

22、无机盐、碳源、氮源。答案：(1)高压蒸汽灭菌琼脂选择(2)104(3)S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长(4)取淤泥加入无菌水，涂布(或稀释涂布)到乙培养基上，培养后计数(5)水、碳源、氮源和无机盐高考试练1(2020山东卷)我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。齐民要术记载：将蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲发，如鱼眼汤，净淘米八斗，炊作饭，舒令极冷”。意思是将酒曲浸到活化，冒出鱼眼大小的气泡，把八斗米淘净，蒸熟，摊开冷透。下列说法错误的是()A“浸曲发” 过程中酒曲中的微生物代谢加快B“鱼眼汤” 现象是微生物呼吸作用产生的CO2释放形成的C“净淘米” 是为消除杂菌对酿酒过程

23、的影响而采取的主要措施D“舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物死亡【答案】C【解析】“浸曲发”是将酵母菌活化，可以使微生物代谢加快，A正确；“鱼眼汤”是指酵母菌在呼吸过程中产生CO2，使溶液中出现气泡，B正确；在做酒过程中，为消除杂菌的影响主要靠“炊作饭”，即蒸熟，C错误；“舒令极冷”是将米饭摊开冷透，防止温度过高导致微生物(酵母菌死亡)，D正确。2(2020江苏卷)某同学在线提交了在家用带盖玻璃瓶制作果酒和果醋的实验报告，他的做法错误的是()A选择新鲜的葡萄略加冲洗，除去枝梗后榨汁B将玻璃瓶用酒精消毒后，装满葡萄汁C酒精发酵期间，根据发酵进程适时拧松瓶盖放气D酒精发酵后去

24、除瓶盖，盖一层纱布，再进行醋酸发酵【答案】B【解析】选择新鲜的葡萄洗1到2次，除去枝梗后榨汁，A正确；葡萄汁不能装满，需装至玻璃瓶2/3的空间，B错误；酒精发酵期间会产生二氧化碳，故需适时拧松瓶盖，防止发酵瓶爆裂，C正确；醋酸菌是好氧菌，故醋酸发酵时应去除瓶盖，加一层纱布，D正确。3(2020山东卷)野生型大肠杆菌可以在基本培养基上生长，发生基因突变产生的氨基酸依赖型菌株需要在基本培养基上补充相应氨基酸才能生长。将甲硫氨酸依赖型菌株M和苏氨酸依赖型菌株N单独接种在基本培养基上时，均不会产生菌落。某同学实验过程中发现，将M、N菌株混合培养一段时间，充分稀释后再涂布到基本培养基上，培养后出现许多由

25、单个细菌形成的菌落，将这些菌落分别接种到基本培养基上，培养后均有菌落出现。该同学对这些菌落出现原因的分析，不合理的是()A操作过程中出现杂菌污染BM、N菌株互为对方提供所缺失的氨基酸C混合培养过程中，菌株获得了对方的遗传物质D混合培养过程中，菌株中已突变的基因再次发生突变【答案】B【解析】操作过程当中出现杂菌污染，基本培养基上生长的为杂菌，A合理；若M、N菌株互为对方提供所缺失的氨基酸，则M、N菌株只是获取相应的氨基酸，并没有自己合成相应氨基酸的能力，将这些菌株接种到基本培养基上不能存活，B不合理；M、N菌株混合培养后在基本培养基上可以生存，推测可能是混合培养过程当中，菌株间发生了基因交流，获

26、得了对方的遗传物质，C合理；基因突变是不定向的，在混合培养过程中，菌株当中已突变的基因也可能再次发生突变得到可在基本培养基上生存的野生型大肠杆菌，D合理。4(2020江苏卷)为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是 ()A倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整B图中、区的细菌数量均太多，应从区挑取单菌落C该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的D菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色【答案】B【解析】倒平板后无需晃动，A错误；区、区没有出现单菌落，说明细菌数量太多，故应从区挑取单菌落，B正确；出现单菌落即达到了菌种纯化的目的，C错误；刚果红是

27、一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，D错误。5(2020浙江卷)下列关于微生物培养及利用的叙述，错误的是()A利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物B配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pHC酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒D适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化【答案】A【解析】在尿素固体培养基中，由于不能利用尿素做氮源的微生物不能生长繁殖，而保留下利用尿素的微生物，A错误；不同的微生物所需的pH不同，所以配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pH，B正确；酵母菌不能直接利用淀粉，应用酒曲中

28、的根霉和米曲霉等微生物把淀粉糖化，再用酵母菌发酵得到糯米酒，C正确；醋化醋杆菌在有氧条件下利用酒精产生醋酸，D正确。6(2019全国卷)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5 g/L)。号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(15 g/L)。号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X (45 g/L)。回答下列问题。(1)在号培养基中，为微生物提供氮源的是_。、号培养基中为微生物提供碳源的有机物是

29、_。(2)若将土壤悬浮液接种在号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_，其原因是_。(3)号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是_。(4)假设从号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供_和_。【答案】(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖(3)稀释涂布平板法(4)能量合成其他物质的原料【解析】(1)氮源是微生物生长需要的一类营养物质，是含氮化合物，可为微生物的生长提供氮元素，牛肉膏、蛋白胨来源于动

30、物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，因此在号培养基中，可为微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生长所需要的一类营养物质，可为微生物的生长提供碳元素，而有机物均含碳元素，、号培养基均含有有机物X，因此，、号培养基为微生物的生长提供碳源的均为有机物X。(2)由于号培养基含有的碳源只有有机物X，因此若将土壤悬浮液接种在号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌由于无法获得碳源而无法增殖导致其比例减少。(3)微生物的接种方法很多，最常用的有平板划线法与稀释涂布平板法，由于稀释涂布平板法中，稀释度足够高的菌液经涂布培养后，在培养基表面形成的一个菌落是由菌液中的一个活菌繁殖而来，所

31、以常用来进行微生物的计数。(4)丙酮酸参与有氧呼吸的第二阶段，能被分解产生能量，且丙酮酸可作为许多物质合成的中间产物，因此其可为微生物的生长提供能量和合成其他物质的原料。7(2019全国卷)物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。(1)要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_。(2)在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌，应该选择_菌落进一步纯化，选择的依据是_。(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮

32、源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_。(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_，三处滴加量相同。一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明_；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明_。【答案】(1)W(2)乙乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W(3)将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源(4)缓冲液缓冲液不能降解W酶E与天然酶降解