临床微生物检验规范总体要求课件

1、临床微生物检验规范总体要求南昌大学第二附属医院 桂炳东1临床微生物检验规范总体要求第1页，共34页。随着现代信息技术和医学生物学的发展，临床微生物学检验技术近年来也获得了长足的进步，并逐渐成为指导临床感染诊断和治疗的重要依据。但与发达国家相比，仍有很大差距，远未达到令人满意的程度，还有许多问题需要临床微生物专业人员和临床医师的共同努力，进一步提高我国临床微生物感染的诊治水平。2临床微生物检验规范总体要求第2页，共34页。一、我国临床微生物检验的发展现状二、临床微生物检验存在的问题 三、临床微生物检验规范总体要求3临床微生物检验规范总体要求第3页，共34页。一、我国临床微生物检验的发展现状随着国

2、民经济的飞速发展，检验医学和其他医学学科一样，发生了深刻的变化，从仪器设备上讲，在全自动生化分析仪，血液分析仪，尿液分析仪和免疫分析仪进入检验科的同时，全自动微生物培养鉴定和药敏分析仪也进入很多医院，相当多的医院使用了质量较好的商品培养基，药敏纸片等。4临床微生物检验规范总体要求第4页，共34页。一、我国临床微生物检验的发展现状从检验人员结构上看，多年来以中等毕业生为主体的检验队伍正逐步为大专生、本科生和研究生所代替，一些受过专业训练的临床微生物高级检验人员也陆续培养出来。十多年来临床微生物学室内质量控制、室间质量评价工作的开展，临床微生物检验水平有了很大的提高。5临床微生物检验规范总体要求第

3、5页，共34页。二、临床微生物检验存在的问题尽管临床微生物检验的技术水平和实验室管理水平取得了长足的进步，但仍有许多亟待解决的问题，主要表现在以下几个方面：6临床微生物检验规范总体要求第6页，共34页。二、临床微生物检验存在的问题1标本采集、保存、运送不规范：标本采集主要由医护人员操作，由于实验室与临床的交流沟通不够，医护人员对于临床微生物标本的采集要求和注意事项不甚了解，标本采集前要求病人应该做些什么准备，采集标本应选择什么时机、什么部位、采多少量以及采样部位应该如何消毒等一系列问题，多数医院没有明确文字规定。其结果可能导致标本采集不合格，使致病病原菌检出率降低或者即使分离出某种细菌，但未必

4、是致病菌，如此非但不能提供病原信息，反而造成误导。如下呼吸道感染留痰标本，如标本不合要求即不能反映病变部位的信息等等。7临床微生物检验规范总体要求第7页，共34页。二、临床微生物检验存在的问题微生物标本保存和运送的原则是维持病原菌的活力，防止非病原菌的污染或过量繁殖，对于不同的目的病原菌，有不同的保存、运送要求。如夏天病人留取尿液或粪便细菌培养、送检不及时，可造成非致病菌过度生长，其结果可能把正常中段尿误诊为菌尿或导致沙门菌和志贺菌等致病菌死亡，造成漏诊等等。有关这方面的一些要求，尚未做到人人皆知，特别是工人运送标本的单位，问题可能更大。8临床微生物检验规范总体要求第8页，共34页。二、临床微

5、生物检验存在的问题2检验报告方式不规范：检验报告是重要医疗凭据，如何对检验过程中的所见和检验的最终结果进行全面描述和分析，是一个值得进一步斟酌和规范的问题。如痰标本的检查结果，如果不报告涂片所见，而仅报告培养结果，则很难判断分离菌与肺部感染的关系；而且在这种情况下，分离菌的药敏结果是否应该报告？值得商榷。因此，微生物检验报告的形式和内容都需要进行规范。9临床微生物检验规范总体要求第9页，共34页。二、临床微生物检验存在的问题细菌检验结果分级报告问题：细菌检验过程历时较长，报告发出较晚，常不能满足临床需要，尽管有些医院已实行了细菌检验分级报告，但尚未形成制度。10临床微生物检验规范总体要求第10

6、页，共34页。二、临床微生物检验存在的问题3药敏试验不规范：我国检测细菌耐药性原则上采用CLSI/NCCLS推荐的纸片扩散方法和判断标准，但应注意的是，不是所有细菌都适合用该方法检测耐药性，即使不能用纸片法检测耐药性的细菌，仍然向临床报告药敏结果或进行耐药性分析，如纸片法药敏法，对假单胞菌只有铜绿假单胞菌、近年嗜麦芽窄食单胞菌可用但只有三种药可用(左旋沙星、复方新诺明、米诺环素)。ESBLs筛选和确证试验仅适用于大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌，其他菌不能用现行方法检测。11临床微生物检验规范总体要求第11页，共34页。二、临床微生物检验存在的问题药敏试验中药物品种选择不妥：同一群类药多个重复选择，该

7、选择的未选用，临床无效的品种却选用。如三代头孢类全选上，葡萄球菌的药敏未包括甲氧西林的测定，沙门菌对氨基甙类一、二代头孢类，即使体外有效，临床却无效，不要去测试。12临床微生物检验规范总体要求第12页，共34页。二、临床微生物检验存在的问题临床往往有反映细菌药敏与临床疗效不符的现象，虽然原因很多，但与实验室的以上原因造成不无关系。13临床微生物检验规范总体要求第13页，共34页。二、临床微生物检验存在的问题4细菌检验质控工作还要加强：尽管多年来在细菌质控方面做了大量工作，但在按要求规范和认识程度上还很不够，美国CLIA88把细菌培养和药敏试验归属于高度复杂的试验范畴。对于这一高度复杂的检验工作

8、，必须严格做好质控。14临床微生物检验规范总体要求第14页，共34页。二、临床微生物检验存在的问题5实验室与临床沟通不够：目前国内临床微生物人员与临床医师间的沟通交流很不够，增加交流对感染病的正确诊断，提高感染病诊治水平有重要作用。比如1份痰标本中同时生长了肺炎克雷伯菌及白假丝酵母菌，这时白假丝酵母菌的重要性如何？是否要报告，这种情况下如能结合患者临床情况，即可得到 客观的结论。再如近年来细菌室在细菌耐药机制的检测方面做了大量工作，如果细菌室只是报告耐药酶或耐药基因而不告诉医生该酶或基因的耐药含义，则可能被一些医生忽视。 15临床微生物检验规范总体要求第15页，共34页。三、临床微生物检验规范

9、总体要求(一)建立符合要求的临床微生物实验室(二)配备相应的仪器设备(三)具备相应的专业技术人员(四)建立正确的病原微生物培养、分离、鉴定技术和规范的细菌药物敏感试验条件与方法(五)建立微生物检验分级报告制度(六)建立室内质量控制，接受室间质量评价(七)加强与临床的沟通交流16临床微生物检验规范总体要求第16页，共34页。(一)建立符合要求的临床微生物实验室1临床微生物实验室的设置有其专业性的特定要求，通常应包括如下一些功能区(室)：标本接收及接种室、细菌分离及鉴定室、培养基配制室、无菌室、消毒灭菌室等。2临床微生物室安全管理：在标本接种和细菌分离鉴定室应配置生物安全柜和超净工作台。做好生物安

10、全管理，一是防止工作人员感染，二是防止毒株散发出来污染社会环境。17临床微生物检验规范总体要求第17页，共34页。(二)配备相应的仪器设备1微生物鉴定和药敏分析系统2血培养系统3微生物数码分类鉴定系统18临床微生物检验规范总体要求第18页，共34页。1微生物鉴定和药敏分析系统本系统结合了自动化、电脑化及先进的鉴定和药敏系统，快速、准确。常见使用的有Vitek系列、MicroScan系列、BD PHOENIXTM等自动微生物分析系统和半自动微生物鉴定/药敏系统。19临床微生物检验规范总体要求第19页，共34页。2血培养系统能快速检测血液、脑脊液、胸水及其他无菌体液中的细菌。常见使用的有BACTE

11、C 9000系列、VITAC系列、 Bact/Alert系统等。20临床微生物检验规范总体要求第20页，共34页。3微生物数码分类鉴定系统是集数学、信息及自动分析技术于一体，采用标准化、商品化和配套的生化反应试剂条(板)，可将细菌鉴定到属、群、种。如辅以读数仪和电脑分析软件，便可形成半自动化。21临床微生物检验规范总体要求第21页，共34页。(三)具备相应的专业技术人员一是要有良好职业道德和高度责任心；二是扎实的基础训练教育；三是专业化的技能培训；四是不断的继续教育，及时获得新知识，新技术。 22临床微生物检验规范总体要求第22页，共34页。(四)建立正确的病原微生物培养、分离、鉴定技术和规范

12、的细菌药物敏感试验条件与方法根据卫生部指示，中华医学会检验医学分会成立了临床检验操作规范编写组，临床微生物学检验操作规范是该规范的一部分，该规范特别强调：标本的正确采集、保存和运送，操作的标准化，严格的全面质量管理，科学的报告方式和内容，报告的正确解读和临床应用。23临床微生物检验规范总体要求第23页，共34页。1检验标本的采集、保存、运送和验收微生物人员和临床医护人员一道，根据临床微生物检验规范的规定，研讨和制定本院微生物标本采集、保存和运送的具体要求。要广泛宣传，认真实施，建立健全标本验收制度，对于不合格的标本要坚决退回，说明原因，要求重送。24临床微生物检验规范总体要求第24页，共34页

13、。(1)患者的准备：主要包括两个方面，一是做好采集部位的清洁和消毒工作，防止正常菌群的污染，二是耐心细致地交待患者，使其配合以便采集到有价值的标本。(2)标本采集：要千方百计捕捉病原菌并保持其活性，以提高检出率，同时又要尽可能避免非病原菌的污染。25临床微生物检验规范总体要求第25页，共34页。(3)标本保存与运送：标本的容器应无菌、不漏和便于密封，正确选择使用保菌液，运送液或增菌液，尽可能立即送检。(4)验收和登记：标本验收包括采样时间，送检条件，容器是否污染渗漏，标本标识与申请单是否清楚一致等，不合格标本要拒收，并说明拒收原因，告知正确送检要求，嘱其重送。26临床微生物检验规范总体要求第2

14、6页，共34页。2标本的接种和细菌的分离鉴定应严格按照操作规程进行，27临床微生物检验规范总体要求第27页，共34页。3.细菌药敏试验 自动化仪器检测，可自动报出敏感、耐药和MIC，并可报出特殊耐 药菌检测(MRS、ESBLs等)，快速、准确。纸片琼脂扩散法(K-B法)由于其操作简单、价格便宜、是普通临床微生物实验室的常规方法，但应注意，不是所有细菌都适合用纸片琼脂扩散法、CLSI/NCCLS已有明确规定。E试验是一种结合稀释法和扩散法原理对细菌药敏试验直接定量试验。 28临床微生物检验规范总体要求第28页，共34页。4细菌耐药性检测直接-内酰胺酶试验(肠球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌、金黄色

15、葡萄球菌和淋病奈瑟菌等)，超广谱-内酰胺酶试验(ESBLs)、耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)，耐万古霉素肠球菌(VRE)、肠球菌氨基糖甙类高水平耐药株(HLR)检测，头孢菌素酶(AmpC酶)、金属酶和碳青霉烯酶的检测等。29临床微生物检验规范总体要求第29页，共34页。(五)建立微生物检验分级报告制度由于细菌检验是一个耗时较长的过程，临床在送检标本后多急切希望知道检验结果，为此，应建立微生物检验分级报告制度，一旦分离到细菌，例如血培养阳性检出，可先报告细菌为阳性，并涂片染色报告检出菌的革兰染色形态。这样医生就可先行经验治疗，待报告最后发出后再修正治疗方案。在此，并应特别强调原始标本直接涂片镜检，

16、以选择适宜培养基、排除不合格标本、直接发现病原体及早治疗、确定主要病原菌和解释培养结果等。30临床微生物检验规范总体要求第30页，共34页。(六)建立室内质量控制，接受室间质量评价质量控制是临床微生物实验室为了保证检验结果实事求是地反映客观存在而建立的操作程序体系，质量控制包括室内质量控制和室间质量控制评价，室内质量控制是由实验室内部制定并实施的，是质量保证的核心和基础。室内质量控制的内容包括人员与组织管理，标准的操作手册，培养基、试剂、染色液和抗血清的质量控制，药敏试验质量控制，常用仪器设备的监控等。31临床微生物检验规范总体要求第31页，共34页。(六)建立室内质量控制，接受室间质量评价标本的采集与转送是否正确，直接关系到检验结果的价值，它要求临床医护人员应熟悉细菌学标本的采集与转送的正确方法，细菌学应与临床共同制定标本采集与转送的操作规范，编印成册发到临床科室。严格执行标本验收制度，对不合格标本说明不合格原因，并要求重送。32临床微生物检验规范总体要求第32页，共34页。(七)加强与临床的沟通交流加强与临床医生联系，解说报告形式、内容和临床意义，使