广东省茂名高州市校际联盟2021-2022学年高二下学期5月联考生物试题（Word版含解析）

1、 茂名高州市校际联盟2021-2022学年高二下学期5月联考生物试卷本卷共8页，满分100分，考试时间75分钟注意事项：1答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。2选择题的作答：每小题选出答案后，把答案写在答题卡上对应题目的对应位置，写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。3非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。4考试结束后，请将答题卡上交。一、单选题共：本题共16小题，1至12小题每题2分，13至16小题每题4分，共40分。每小题只有一个选项符合题目要求。一、单选题

2、1传统发酵技术是人类在生活过程中，对微生物的有意或无意运用。下列有关发酵技术主要原理的叙述中，错误的是（ ）A面包制作：酵母菌无氧呼吸产生CO2，CO2遇热膨胀B果醋制作：醋酸菌在有氧条件下将糖或酒精转化为醋酸C腐乳制作：毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶等促进豆腐中相关物质水解D泡菜制作：乳酸菌厌氧发酵产生乳酸，后者使蔬菜具有特别风味2有关平板划线操作的叙述，错误的是（ ）A平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面B每次划线前，灼烧接种环待其冷却后再划线C在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自菌液D每次划线将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行

3、线，注意不要划破培养基3下列有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（ ）A是碳源的物质不可能同时是氮源B微生物培养所需的培养基都需要提供碳源、氮源、水、无机盐，缺一不可C牛肉膏蛋白胨培养基属于合成培养基，营养全面D微生物在固体培养基表面生长，可形成肉眼可见的菌落4下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（ ）成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4琼脂蒸馏水含量10g10g2g适量定容至1000mLA从物理性质看该培养基属于液体培养基B该培养基中属于碳源的物质有葡萄糖、牛肉膏，属于氮源的物质是牛肉膏C能在此培养基上生长的只有大肠杆菌D该培养基调节合适的pH后就可以接种使用5下列关于分解纤维素的微生物分离实验的

4、叙述，正确的是（ ）A纤维素酶是一种复合酶，其中纤维素分解为纤维二糖仅由C1酶催化B鉴别纤维素分解菌的培养基中，羧甲基纤维素钠（CMC-Na）主要为细菌提供碳源C在筛选分解纤维素的细菌实验中，用于选择培养的培养基属于固体培养基D倒平板时加入刚果红染色，优点是显示的颜色反应基本上就是纤维素分解菌的作用6与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列说法错误的是（ ）A发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵B发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身C在发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径

5、D通过发酵工程获得的单细胞蛋白可作为食品添加剂，也可制成微生物饲料7植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。在植物组织培养过程中，如何使用这两种激素更有利于胚状体的形成？（ ）A先使用生长素，后使用细胞分裂素B同时使用C先使用细胞分裂素，后使用生长素D都不使用8植物组织培养的过程可以归纳为：下列相关叙述有错误的是（ ）A的再分化过程中，需要经过激素的诱导B包裹上人造种皮可获得人工种子C过程指植物的营养生长和生殖生长阶段D植物组织培养所依据的原理是细胞的全能性9下列关于果酒和果醋制作的叙述，错误的是（ ）A制作果酒时瓶口需密闭，而制作果醋时要打开瓶盖或通气B温度对

6、酵母菌酒精发酵的影响很大，而对醋酸菌的发酵影响不大C在变酸的果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的D制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒并注意无菌操作10植物体细胞杂交的过程是（ ）A用酶解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体B以人工诱导法使两个不同植物的原生质体融合C用植物组织培养技术培养融合的杂种细胞得到杂种植株D通过以上三者来完成11下列属于生物的微型繁殖技术的是A兰花的芽尖组织培育成兰花幼苗B水稻种子萌发并长成新个体C扦插的葡萄枝长成新个体D柳树芽发育成枝条12与传统育种相比，植物体细胞杂交在培育作物新品种方面的重大突破表现在（ ）A证明杂种细胞具有

7、全能性B克服远源杂交不亲和的障碍C缩短育种周期，减少盲目性D快速培育无病毒植株，保留杂种优势13以二倍体兰花花药为外植体，经植物组织培养过程获得兰花植株。下列相关叙述不正确的是（ ）A为防止杂菌污染，过程要进行严格的无菌操作B过程需在培养基中添加多种植物激素以利于再分化C该育种过程体现了植物细胞的全能性D经过程形成的植株中可筛选获得纯合的二倍体14为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）A应使用经过灼烧灭菌的涂布器进行接种B该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的C图中、区的细菌数量均太多，应从区挑选单菌落D菌落周围的纤维素被降解后，可被

8、刚果红染成红色15下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中正确的是（ ）A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，倒平板后要进行高温、高压灭菌B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各1mL，分别涂布于各组平板上C统计的菌落数目往往比活菌的实际数目多D确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数16泡菜起源于中国，是我国的传统食品之一。贾思勰齐民要术中已有制作泡菜的专述：“作盐水，令极咸，于盐水中洗菜。若先用淡水洗者，菹烂。洗菜盐水，澄取清者，泻者瓮中，令没菜把即止，不复调和。”该表述说明食盐的用量非常关键。研究小组探究泡菜制作过程中不同浓度的食盐对亚硝酸盐产

9、生的影响，结果如图。下列相关叙述正确的是（ ）A腌制过程中，坛中出现溶液量增多现象的主要原因是细胞呼吸产生水B在泡菜发酵过程中，微生物无氧环境的创设主要依靠盐水的浸没C食盐的浓度越低，亚硝酸盐含量的峰值越高，这与杂菌繁殖数量有关D达到峰值后，亚硝酸盐含量下降的原因是亚硝酸盐被微生物转变成亚硝胺二、非选择题：共60分。17（12分）某学匀小组同学为调查湖水中细菌的污染情况进行相关的实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。（1）该小组同学所用培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_等营养物质。（2）配制培养基时在进行称量、溶解、定容后，还需进行的操作是_，对培养基进行

10、灭菌，一般采用的方法是_。（3）图甲和图乙是两种接种方法培养后得到的菌落分布，图甲的接种方法是_，图乙的接种方法是_。（4）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于恒温箱中培养、培养的温度设定在_。要使该实验所得结果可靠，还应该实施的操作是_。18（10分）中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA（聚羟基脂肪酸酯）等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图。回答下列问题：（1）为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为_，并不断提高其浓度，经多次

11、传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。此外，选育优良菌株的方法还有_、_等。（2）研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中_可能是高密度培养的限制因素。发酵工程的中心环节是_。（3）菌株H还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等）来生产PHA，说明其能分泌_。19（14分）常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌，操作如

12、下：（1）制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是_。（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是_。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是_。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是_。（3）将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以_为唯一碳源的固体培养基上，在适宜的条件下培养一段时间，获得多个所需的酵母菌菌落。实验中所用的培养基按功能属于_培养基。（4）若要

13、检测土样中的酵母菌含量，应采用_法。将1mL土壤溶液分别稀释10倍和100倍，每种稀释度各在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，6个平板上的菌落数分别为548、472、450、48、47和58。据此可得出每升土壤溶液中的活菌数约为_个。20白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。白菜甘蓝是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强、易储存等优点，如图为“白菜甘蓝”的培育过程，请回答问题：（1）为了得到原生质体，需先用_处理白菜和甘蓝的细胞。（2）诱导原生质体融合的方法有多种，常用的化学方法是_（填写中文名称），融合完成的标志是_。由杂种细胞得到

14、白菜甘蓝植株还需经过植物组织培养，其中不需要光照的培养过程为_。（3）经花粉直接培育的白菜甘蓝植株，体细胞的染色体数为_。这种植株通常不育，为使其可育，需进行人工诱导，通过对幼苗使用_进行处理。21图甲装置既可用于生产果酒，又可用于生产果醋；图乙为腐乳的制作流程图；图丙为某兴趣小组为了制作泡菜而查阅的资料。（1）如果用图甲所示的装置制备果醋，则开关1和开关2的控制方法是_，原因是_。制备果醋时，原料可以是葡萄糖也可以是乙醇，写出以乙醇为原料制作果醋的原理（反应简式）：_。（2）图乙中的过程长出_，经过该微生物的发酵，将豆腐中的蛋白质分解成_，所以腐乳味道鲜美并易于消化和吸收。（3）据图丙可知，

15、在制作泡菜的过程中，亚硝酸盐含量的变化规律是_，pH下降的主要原因是_。茂名高州市校际联盟2021-2022学年高二下学期5月联考生物试卷详细答案一、单选题共 ：本题共 16小题，1 至12小题每题2分，13至16小题每题4分，共40分。每小题只有一个选项符合题目要求。一、单选题1A【解析】【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在1825，pH最好是弱酸性。2、醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是

16、在3035。3、泡菜的制作原理：起作用的乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型。4、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。【详解】A、面包制作中主要利用酵母菌有氧呼吸产生CO2，后者遇热膨胀的原理，A错误；B、制作果醋需要醋酸菌，它是一种好氧微生物，醋酸菌在有氧条件下将糖或酒精转化为醋酸，B正确；C、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶等促进豆腐中相关物质水解，C正确；D、制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸

17、产生乳酸，使蔬菜具有特别风味，D正确。故选A。2C【解析】【分析】平板划线法是分离细菌常用的方式，通过不断的划线使得原本聚集的细菌分散开，形成独立的菌株。【详解】A、平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，最终得到单细胞菌落，A正确；B、灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液在划线，以免温度太高杀死菌种划线，B正确；C、平板划线在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自第一区域的菌种，C错误；D、每次划线将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，注意不要划破培养基，D正确。故选C。3D【解析】【分析】微生物的营养需求及培养基的组

18、成及功能：培养基的组成成分包括碳源、氮源、水和无机盐，此外还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质及氧气的要求。【详解】A、是碳源的物质同时也可以是氮源，如牛肉膏和蛋白胨均可作为碳源和氮源，同时还提供维生素，A错误；B、并非所有微生物的培养基中都必须含有碳源、氮源，如自养的微生物不需要碳源、固氮微生物不需要氮源，B错误；C、牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的培养基，属于天然培养基，C错误；D、固体培养基可用于微生物的分离鉴定，微生物在固体培养基表面生长，可形成肉眼可见的菌落，D正确。故选D。4B【解析】【分析】微生物的培养基的营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐，有的还会有生长因子等。

19、该培养基含有琼脂，属于固体培养基。很多微生物都能利用葡萄糖，因此该培养基能培养多种微生物。【详解】A、从物理性质看该培养基含有琼脂，属于固体培养基，A错误；B、培养基中属于碳源（为微生物提供碳元素）的物质有葡萄糖、牛肉膏，属于氮源（为微生物提供氮元素）的物质是牛肉膏，B正确；C、很多微生物都能利用葡萄糖，此培养基中能生长多种微生物，不仅仅只有大肠杆菌，C错误；D、该培养基调节合适的pH后要进行高压蒸汽灭菌操作，D错误。故选B。5B【解析】【分析】在纤维素分解菌的分离实验中，刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，这样可以

20、通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。刚果红染色法有两种：第一种，先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应；优点：显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用；缺点：操作繁琐，加入的刚果红会使菌落之间发生混杂。第二种，在倒平板时就加入刚果红。优点：不存在菌落的混杂问题；缺点：在纤维素粉和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物产生假阳性反应，有些微生物有降解色素的功能。【详解】A、纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，其中C1酶和Cx酶能使纤维素分解成纤维二糖，葡萄糖苷酶能将纤维二糖分解成葡萄糖，A错误；B、鉴别纤维素分解菌的培养基中，羧甲基纤维素钠（CMC-Na

21、）主要为细菌提供碳源，B正确；C、筛选分解纤维素的细菌的实验中，用于选择培养的培养基属于液体培养基，C错误；D、在倒平板时就加入刚果红。优点：不存在菌落的混杂问题；缺点：在纤维素粉和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物产生假阳性反应，有些微生物有降解色素的功能。D错误。故选B。6A【解析】【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通

22、气量与转速等发酵条件。4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。【详解】A、发酵工程与传统发酵技术都需要利用微生物来进行发酵，A错误；B、由分析可知，发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，B正确；C、在发酵工程的发酵环节中，发酵条件不仅影响微生物的生长繁殖，也会通过影响酶的活性影响微生物的代谢途径，C正确；D、单细胞蛋白是指利用发酵工程获得的大量的微生物菌体，可作为食品添加剂，例如用酵母菌生产的单细胞蛋白可作为食品添加剂，甚至制成“人造肉”工人们直接使用；也可制成微生物饲料，例如在青贮饲料中添加乳酸菌

23、，可以提高饲料的品质，动物食用后能提高免疫力，D正确。故选A。7B【解析】【分析】生长素与细胞分裂素的作用和使用顺序：生长素类：用于诱导细胞的分裂和根的分化细胞分裂素类：促进组织细胞的分裂或从愈伤组织和器官上分化出不定芽使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高【详解】胚状体的胚芽、胚根、胚轴等结构完整，就像一颗种子，已经出现了细胞分化，在植物组织培养过程中，同时使用生长素和细胞分裂素可以使分化频率提高，因此更有利于胚状体的形成。故选B。8B【解析】【分析】植物组织培养技术依据的原理是植物细胞的全

24、能性，图中代表离体的植物细胞、组织或器官，即外植体，代表愈伤组织，指试管苗或胚状体，指新个体。【详解】A、的再分化过程中，需要经过生长素和细胞分裂素的诱导，A正确；B、获得人工种子要用胚状体包裹上营养物质和人工种皮，B错误；C、指试管苗或胚状体，试管苗经植物的营养生长和生殖生长阶段可产生下一代，即过程指植物的营养生长和生殖生长阶段，C正确；D、离体的植物细胞可培养为新个体，体现了植物细胞的全能性，D正确。故选B。9B【解析】【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2

25、O+能量。（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详解】A、果酒制作需要缺氧的环境，因此制作果酒时瓶口需密闭；参与果醋制作的醋酸菌是嗜氧菌，因此制作果醋时要打开瓶盖或通气，A正确；B、温度对酵母菌和醋酸菌的发酵都有影响，在制作果酒时温度要控制在1830，而在制作果醋时则要将温度控制在3035，B错误；C、在变酸的果酒表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的，C

26、正确；D、制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒，并注意无菌操作，D正确。故选B。10D【解析】【分析】植物体细胞杂交技术就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。【详解】植物体细胞杂交的第一步就是用酶解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体；第二步用人工诱导法使两个不同植物的原生质体融合，得到杂种植株，第三步把杂种细胞培育成植株，据此可知题中A、B、C三项都是植物体细胞杂交的过程，D符合题意。故选D。11A【解析】【分析】生物的微型繁殖技术是指通过植物组织培养，将离体的植物组织或细胞培养成新个体，从而达到快速繁殖具有优良性

27、状新个体的技术。【详解】A、将兰花的芽尖组织经植物组织培养培育成兰花幼苗，可以达到快速繁殖的目的，属于微型繁殖，A正确；BC、水稻种子萌发并长成新个体、扦插的葡萄枝长成新个体均没有通过植物组织培养技术，B、C错误；D、柳树芽发育成枝条，没有发育为新个体，不属于微型繁殖，D错误。故选A。12B【解析】【分析】【详解】A、植物体细胞杂交能证明杂种细胞具有全能性，但不是其优点，A错误；B、传统杂交育种只限于进行有性生殖的同种生物之间，而植物体细胞杂交克服远缘杂交不亲和的障碍培育出作物新品种，B正确；C、植物体细胞杂交能缩短育种周期，但这不是其突出特点，C错误；D、植物体细胞杂交不能快速培育无病毒植株

28、，快速培育无病毒植株应该采用植物组织培养技术，D错误。故选B。13B【解析】【分析】分析题图：图示表示将二倍体兰花的花药通过植物组织培养形成植株的过程，其中表示取出花药过程，阶段表示脱分化，该阶段能形成愈伤组织，其细胞分化程度低，全能性高；阶段表示再分化过程，该阶段能形成胚状体发育成幼苗，表示移栽进一步发育形成植株。【详解】A、植物组织培养的过程要求无菌、无毒的环境，其中外植体要进行消毒处理，而培养基需灭菌处理，过程要进行严格的无菌操作，A正确；B、过程需在培养基中添加多种植物激素以利于脱分化，B错误；C、高度分化的细胞首先经过脱分化后形成愈伤组织，然后再分化形成植株，整个育种过程体现了植物细

29、胞的全能性，C正确；D、该过程使用了秋水仙素，能将花药（配子）中的染色体恢复正常，过程形成的植株中可筛选获得纯合的二倍体兰花植株，D正确。故选B。14C【解析】【分析】微生物常见的接种的方法：平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、根据图示的结果可知，该平板所用的接种方法是平板划线法，应使用经过灼烧灭菌的接种环进行接种，A错误；B、该实验结果中获得了的单菌落，能达

30、到菌种纯化的目的，B错误；C、图中、区没有出现单菌落，说明细菌数量太多，所以应该从区挑取单菌落，C正确；D、刚果红染液可以与纤维素反应呈红色，纤维素分解菌能够将纤维素分解而出现无色的透明圈，所以菌落周围的纤维素被降解后，不会被刚果红染成红色，D错误。故选C。15D【解析】【分析】稀释涂布平板法：（1）该法是将已熔化并冷却至约50（减少冷凝水）的琼脂培养基，先倒入无菌培养皿中，制成无菌平板。待充分冷却凝固后，将一定量（约0.1ml）的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面，再用三角形无菌玻璃涂棒涂布，使菌液均匀分散在整个平板表面，倒置温箱培养后挑取单个菌落。（2）计数：原理：当样品的稀释度足够高时，

31、培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30300的平板进行计数。计算公式：每克样品中的菌株数=（cV）M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。【详解】A、首先要进行培养基的制备，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，A错误；B、采用稀释涂布平板法时，应取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，B错误；C、当

32、两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低，C错误；D、确定对照组无菌后，选择菌落数在30300之间的平板进行计数，求取平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数，D正确。故选D。16C【解析】【分析】泡菜制作的原理是乳酸菌发酵。由于在泡菜制作过程中，微生物会将原料中的硝酸盐还原形成亚硝酸盐，因此在发酵初期亚硝酸盐含量会逐渐升高，发酵后期亚硝酸盐又会被某些微生物氧化成硝酸盐，亚硝酸盐含量又会逐渐下降，因此在泡菜制作过程中要检测亚硝酸盐的含量，确定合适的取食时间。【详解】A、腌制过程中，坛中出现溶液量增多现象的主要原因是蔬菜在盐水中失水，A错误；B、为了

33、保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境：选择的泡菜坛要闭封性好；加入蔬菜后要注入煮沸冷却的盐水，使盐水没过全部蔬菜；盖上坛盖后要在坛边沿的水槽中注满清水，主要依赖，B错误；C、由于食盐用量过低，造成微生物大量繁殖，将蔬菜中的硝酸盐还原成亚硝酸盐，所以制作泡菜时食盐的浓度越低，亚硝酸盐含量的峰值出现得越早，且峰值较高，C正确；D、据图分析可知，食盐用量和腌制时间都会影响亚硝酸盐含量；亚硝酸盐含量达到峰值后下降，是因为缺氧和酸性环境抑制杂菌生长，使亚硝酸盐的产生量降低；同时产生的亚硝酸盐会被分解，最终导致亚硝酸盐含量下降，D错误。故选C。二、非选择题：共60分。17氮源 碳源 pH调整 高压蒸汽灭菌 稀

34、释涂布平板法 平板划线法 37 同时在另一平板上接种无菌水作为对照【解析】【详解】试题分析：本题考查微生物的分离和培养、培养基对微生物的选择作用等知识，要求学生识记培养基的成分、无菌技术中的灭菌方法和微生物培养的条件，掌握培养基的种类及功能和实验设计的原则，再规范答题，属于考纲识记层次的考查。微生物的培养基一般都要含有水、碳源、氮源、无机盐，如蛋白胨在培养基中主要作为氮源，淀粉在培养基中主要作为碳源。实验室的灭菌方法一般有灼烧灭菌（适合于接种工具的灭菌）、干热灭菌（适合于耐高温的、需要保持干燥的物品的灭菌）、高压蒸汽灭菌（适合于培养基等物体的灭菌）。（1）蛋白胨来源于动物原料，含有维生素、糖和

35、有机氮等营养物质，在培养基中主要作为氮源；淀粉是糖类，在培养基中主要作为碳源。（2）配制培养基时在进行称量、溶解、定容后，还需进行的操作是pH调整，对培养基的灭菌常采用高压蒸汽灭菌法，因为此方法既能杀死培养基中的芽孢和孢子，又不破坏培养基的营养成分。（3）接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法，据图分析，图甲的接种方法是稀释涂布平板法，图乙的接种方法是平板划线法。（4）细菌的培养的最适温度是37，该实验还需要设置对照试验，即同时在另一平板上接种无菌水作为对照。18（1）唯一碳源 诱变育种 基因工程育种（2）氧气（O2或溶解氧） 发酵罐内发酵（3）蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等【解析】【分析】1、微

36、生物培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子。培养基按物理性质分为固体、半固体、液体培养基；按用途分为选择培养基和鉴别培养基。2、选择培养基是在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。（1）根据题意分析，该实验的目的是提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，结合微生物的代谢需求，其液体培养基应该以蔗糖作为唯一碳源。经多次传代培养，此外，选育优良菌株的方法还有诱变育种、基因工程育种。（2）分析题意，扩大培养时，营养物浓度、温度、pH等条件下适宜，而发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件

37、中氧气不足，使菌种进行无氧呼吸产生乙醇，即氧气（O2或溶解氧）是限制高密度培养的重要因素。发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵。（3）根据酶的专一性可知，菌株H之所以能通过分解主要含蛋白质、淀粉、油脂等的餐厨垃圾来生产PHA，说明其能分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等。【点睛】本题的知识点是微生物的选择培养、培养基的成分，主要考查运用所学知识解决实际问题的能力。19（1）防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染（2）接种环 将聚集的菌落逐步减少以获得单个菌落 接种环灼烧后未冷却（或划线未从第一区域末端开始）（3）木糖 选择（4）稀释涂布平板 5.1107【解析】【分析】1、选择培养基是指通过培养混合的微生

38、物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。利用选择培养基和转基因技术能够筛选利用木糖产生酒精，且对酒精的耐受能力强的酵母菌。2、培养基配制时的注意事项：全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染；培养基灭菌后，需要冷却到50左右时，才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板。操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基；平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面

39、的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染；在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。（1）为了防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染，制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置。（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做可以将聚集的菌落逐步减少以获得单个菌落。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却或者划线未从第一区域末端开始。（3）自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌，则培养基应以木糖为唯一碳源。由于该培