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文档简介

1、第39讲 细胞工程考点二 动物细胞工程固必备知识提关键能力固必备知识一、动物细胞工程的技术手段主要有动物细胞培养、_、_、单克隆抗体的制备等。_是动物细胞工程的基础。动物体细胞核移植动物细胞融合动物细胞培养二、动物细胞培养1.过程2.培养条件(1) 培养液和所有培养用具进行无菌处理培养液中添加一定量的_定期更换_,清除代谢产物一定量的抗生素培养液(2) 营养:除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外,通常还需加入_等一些天然成分。血清、血浆无菌、无毒 的环境(4) 细胞代谢气体环境三、动物体细胞克隆技术(核移植技术)1.原理:_。动物细胞核具有全能性2.哺乳动物核移植分类:_移植和体细胞

2、核移植。胚胎细胞核3.体细胞核移植过程(以高产奶牛克隆为例)4.选用去核卵母细胞的原因:卵母细胞比较大,易操作;卵母细胞细胞质多,_,含有_的物质。5.体细胞核移植技术存在的问题: _ 。营养物质丰富促进核全能性表达克隆动物普遍存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等四、动物细胞融合1.动物细胞融合原理:_。细胞膜具有流动性2.动物细胞融合方法:物理法(离心、振动、电激)、化学法(聚乙二醇)和_。生物法(灭活的病毒)3.结果:形成杂交细胞。4.意义:突破了远缘杂交不亲和的障碍。5.应用:制备单克隆抗体。五、单克隆抗体的制备1.单克隆抗体的制备过程杂交瘤细胞所需抗体(2)用于疾病的诊断、治疗、预防

3、。如单抗诊断试剂盒,具有准确、高效、简易、快速的优点;“生物导弹”定向消灭癌细胞,不损伤健康细胞。2.单克隆抗体的特点:_,并可大量制备。特异性强、灵敏度高3.应用(1)在理论研究中具有重要意义。 5.核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本性状可能不同,其原因主要包括以下几个方面: (1)克隆动物的细胞质基因来源于另一个亲本,与植物组织培养不同(来自一个亲本),即克隆动物遗传物质来自两个亲本。 (2)在发育过程中可能发生基因突变、染色体变异,从而导致性状改变。 (3)外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。下图可表示细胞融合技术的一些过程,请据图回答下列问题:灭活的病毒杂交瘤细胞选择培养基专一抗

4、体体外培养小鼠腹腔甲提关键能力考向1 动物细胞培养和核移植技术灭活的病毒B淋巴(浆)骨髓瘤(2) 若图示为植物体细胞杂交过程,则在甲、乙融合之前,需要用_(填工具酶)制备_。这项工程的意义是_。纤维素酶和果胶酶原生质体克服了远缘杂交不亲和的障碍,扩大了亲本组合的范围解析 在植物体细胞杂交过程中,需要对甲、乙细胞先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,然后再诱导甲、乙的原生质体融合。该技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍,扩大亲本组合的范围。(3) 由甲、乙融合得到丙细胞的基本原理是_。细胞膜具有流动性解析 甲、乙细胞融合形成丙细胞,利用了细胞膜的流动性。(1) 获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎

5、细胞核移植技术,原因是_,恢复其全能性较难。体细胞分化程度高解析 由于体细胞分化程度高,全能性难以恢复,因此获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植技术。(2) 进行过程时,培养成纤维细胞所需的条件有营养、气体环境以及_、_。无菌、无毒的环境(3) 过程中通过_,将成纤维细胞注入去核的_期的卵母细胞中。显微操作翻译(5) 若获得的体细胞核移植的食蟹猴与供体食蟹猴性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是_。卵母细胞细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响解析 从遗传物质的角度来说,体细胞核移植的食蟹猴与供体食蟹猴性状不完全相同,是因为卵母细胞细胞质中的遗传物质会对克隆动物的

6、性状产生影响。考向2 动物细胞融合与单克隆抗体既能大量增殖,又能产生专一的抗体解析 杂交瘤细胞具有两种细胞的遗传物质,既能大量增殖,又能产生专一的抗体。(3) 由图可看出,单克隆抗体制备过程运用了_和_的动物细胞工程技术手段。动物细胞融合动物细胞培养解析 从图中可看出,单克隆抗体的制备运用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术。(4) 动物细胞培养的培养基中含有糖、氨基酸、无机盐、维生素等,与植物组织培养的培养基有所不同的是,通常动物细胞培养基中还含有_。血清、血浆解析 动物细胞培养的培养基与植物组织培养的培养基相比,最大的不同是动物细胞培养的培养基中含有血清、血浆。(5) 在动物细胞融合过程中

7、,需要将所选取的组织细胞离散开,以利于细胞融合,可用_处理离体组织。胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)解析 细胞融合是指两个或多个细胞结合形成一个细胞的过程,为使动物细胞离散开来,可用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理离体组织。(6) 图中有两次筛选过程,其中步骤的目的是筛选出_,步骤的目的是筛选出_。杂交瘤细胞能产生专一抗体的杂交瘤细胞解析 由于细胞融合的方式有多种,会产生多种融合细胞,因此需进行多次筛选。从图中可看出,步骤是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,步骤是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。解析 培养杂交瘤细胞的方法有体内培养和体外培养。前者的优点是培养条件简单,无须配制培养液;后者的优点是在短期内可获

8、得大量单克隆抗体。单克隆抗体制备过程中两次筛选分析项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后会得到多种融合细胞,另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,因此经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选:未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“ ”细胞、 “瘤瘤”细胞)都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞(“ 瘤”细胞)才能生长用多孔培养板培养,在每个孔中只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到能产生专一抗体的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 .(2021吉林测试)胃癌是我国发生率很高的一种恶性疾病,制备抑制胃癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体制备过程如下图。(1) 抗胃癌单克隆抗体制备过程中要用到_技术。解析 单克隆抗体制备过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。动物细胞培养和动物细胞融合(2) 甲代表_细胞。(3) 诱导骨髓瘤细胞与甲融合,可用的诱导因素有_等(写出两种)。聚乙二醇、灭活的病毒、电激解析 诱导动物细胞融合,常用的诱导方法有物理法(电激)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)等。人的胃癌细胞(5) 在甲、丙及骨髓

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