维生素类药物分析

1、关于维生素类药物的分析第一张，PPT共九十八页，创作于2022年6月维生素： 是维持人体正常代谢机能所必需的微量营养物质。人体不能合成维生素。第二张，PPT共九十八页，创作于2022年6月 VitA、D2、D3、 E、K1 等 脂溶性水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、泛酸分类：第三张，PPT共九十八页，创作于2022年6月-H 维生素A醇-COCH3 维生素A醋酸酯-COC15H31 维生素A棕榈酸酯R :第一节 维生素A的分析全反式第四张，PPT共九十八页，创作于2022年6月维生素A 325.5 100% 全反式新维生素Aa 328 75% 2顺新维生素

2、Ab 320.5 24% 4顺新维生素Ac 310.5 15% 2，4顺异维生素Aa 323 21% 6顺异维生素Ab 324 24% 2，6顺 相对生物效价顺反异构（一）结构：具有共轭多烯侧链的环己烯一、结构与性质第五张，PPT共九十八页，创作于2022年6月VitA2VitA3共轭多烯侧链易发生脱氢、脱水、聚合反应鲸醇第六张，PPT共九十八页，创作于2022年6月环氧化物VitA醛VitA酸第七张，PPT共九十八页，创作于2022年6月CHCl3（二）性质1.溶解性：易溶于有机溶剂和植物油等，不溶于水2.不稳定性3.紫外吸收特性4.与三氯化锑呈色第八张，PPT共九十八页，创作于2022年6

3、月（一）三氯化锑反应条件： 无水、无醇CHCl3二、鉴别试验SbCl3水SbOCl乙醇可使碳正离子的正电荷消失第九张，PPT共九十八页，创作于2022年6月蓝色紫红第十张，PPT共九十八页，创作于2022年6月BP（2008）max为326nm一个吸收峰UV法（二）max为350390nm三个吸收峰第十一张，PPT共九十八页，创作于2022年6月去水VitA（VitA3）VitA第十二张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第十三张，PPT共九十八页，创作于2022年6月USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值BP 对照品法 显色剂 三氯化锑TLC法（三）第十四张，PPT共九十八页，创作

4、于2022年6月立体异构体氧化产物及光照产物合成中间体去氢维生素A（ VitA2）去水维生素A（ VitA3）UV法（三点校正法）（一）含量测定三、第十五张，PPT共九十八页，创作于2022年6月三点校正法1. 前提条件：（1）杂质的吸收在310340nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；（2）物质对光的吸收具有加和性。第十六张，PPT共九十八页，创作于2022年6月测定对象：VitA醋酸酯第一法 等波长差法第二法 等吸收比法(皂化法)测定对象：VitA醇2. 波长的选择：（1） 1 VitA的max（如VitA酯 328nm）（2） 2 3 分别在1的两侧各选一点第十七张，PP

5、T共九十八页，创作于2022年6月第十八张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第二步：求3、测定法（1）基本步骤: 第一步：A选择，A328测定或A328校正第三步 求效价第十九张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第四步：求标示量A*D*换算因数*WW*100*标示量100第二十张，PPT共九十八页，创作于2022年6月换算因数：单位E 数值所相当的效价数（由纯品计算而得）第二十一张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第二十二张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第二十三张，PPT共九十八页，创作于2022年6月 判断 是否在326329nm之间改用第二法是否 求算 并与规定

6、值比较1、 维生素A醋酸酯-第一法（等波长差法）A值的选择：第二十四张，PPT共九十八页，创作于2022年6月 规定值 差值 判断差值是否超过第二十五张，PPT共九十八页，创作于2022年6月03%15%3%第二法第二法 计算 A328（校正） 用A328计算有超过0.02无超过f第二十六张，PPT共九十八页，创作于2022年6月 VitAD胶丸中VitA的含量测定 精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量差异项下（平均装量0.08262g/丸）的内容物 0.2399g 至250ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2.0ml，置另一20 ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀

7、。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得吸收度为A300 ：0.354A316 ：0.561A328 ：0.628A340 ：0.523A360 ：0.216A300 /A328 ：0.555A316/A328 ：0.907A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.811A360/A328 ：0.299 求本品中维生素A的含量？第二十七张，PPT共九十八页，创作于2022年6月A300 /A328 ：0.564A316/A328 ：0.893A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.833A360/A328 ：0.344 0.555 0

8、.907 1.000 0.811 0.299 + 0.010.01 0 + 0.02 + 0.04 =第二十八张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第二十九张，PPT共九十八页，创作于2022年6月水溶性脂溶性2、维生素A醇-等吸收比法（皂化法、6/7A法 第三十张，PPT共九十八页，创作于2022年6月 判断max是否在323327nm之间取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定 计算是否0.730.73第三十一张，PPT共九十八页，创作于2022年6月03%3%f第三十二张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（二）高效液相色谱法色谱柱：硅胶；流动相：正己烷-异丙醇（997：3）检测波长：

9、325nm流 速: 1.2ml/min内 标：VA醋酸酯第三十三张，PPT共九十八页，创作于2022年6月三氯化锑比色法（三）优点： 简便 快速max 618nm620nm缺点：呈色不稳定 （5 10s内）水分干扰与标准曲线温差1专属性差三氯化锑有腐蚀性标准曲线法第三十四张，PPT共九十八页，创作于2022年6月氨基嘧啶环CH2噻唑环(季铵盐)第二节 维生素B1的分析HClCl-一、结构与性质（一）结构第三十五张，PPT共九十八页，创作于2022年6月1. 溶解性：易溶于水，水溶液呈酸性。3. UV共轭双键max = 246nm二、性质2. 硫色素反应4. 与生物碱沉淀试剂反应5.氯化物的特性

10、第三十六张，PPT共九十八页，创作于2022年6月专属性反应二、鉴别试验（一）硫色素荧光反应第三十七张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第三十八张，PPT共九十八页，创作于2022年6月硫色素，蓝色荧光2H第三十九张，PPT共九十八页，创作于2022年6月VitB1H+H+H+H+（二）沉淀反应第四十张，PPT共九十八页，创作于2022年6月S元素反应（三）其他反应H+Cl-第四十一张，PPT共九十八页，创作于2022年6月三、含量测定冰醋酸+醋酐，电位法指示终点（一）非水溶液滴定法第四十二张，PPT共九十八页，创作于2022年6月UV法（二）= 421A = ECL片剂、注射剂第四十三

11、张，PPT共九十八页，创作于2022年6月NaOH（三）硫色素荧光法原理1.第四十四张，PPT共九十八页，创作于2022年6月+ NaOH + 铁氰化钾 + 异丁醇+ NaOH + 异丁醇+ NaOH + 铁氰化钾 + 异丁醇+ NaOH + 异丁醇SdAb对照液供试液dSbAC样-=C标特点3、（1）灵敏度高，线性范围宽（2）专属性强，氧化产物及代谢产物不干扰，可用于制剂分析，体液分析等。第四十五张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第三节 维生素C的分析L抗坏血酸结构与性质一、（一）结构二烯醇内酯两个手性碳（C4,C5）第四十六张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（二）性质1.

12、溶解性：易溶于水水溶液呈酸性2. 酸性：一元酸，C3OH的pKa = 4.17，C2OH的pKa = 11.573. 旋光性：手性C（C4、C5）4. 还原性5. 水解反应：6. 具糖的性质：具糖类的性质与反应7. UV特征*第四十七张，PPT共九十八页，创作于2022年6月有活性有活性无活性二烯醇结构-还原反应第四十八张，PPT共九十八页，创作于2022年6月利用还原性：与氧化剂的反应鉴别试验二、第四十九张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（一）与AgNO3反应（二）与2，6 - 二氯靛酚反应氧化型还原型第五十张，PPT共九十八页，创作于2022年6月与碱性酒石酸铜反应USP与KMnO

13、4反应（三）与其他氧化剂反应四、薄层色谱法: Rf值第五十一张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（蓝色）50(吡咯)（五）糖类的反应第五十二张，PPT共九十八页，创作于2022年6月BP0.01mol/L HCl（六）UV第五十三张，PPT共九十八页，创作于2022年6月三、杂质检查（一）溶液的澄清度与颜色检查（二）铁、铜离子的检查维生素C原料药 片 剂 注射剂维生素C原料药糠醛缩合呈色原子吸收法（三）草酸的检查：氯化钙第五十四张，PPT共九十八页，创作于2022年6月指示剂 淀粉（一）碘量法四、含量测定原理：利用Vc强的还原性H+第五十五张，PPT共九十八页，创作于2022年6月 取本

14、品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.05mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6。2、方法原料药第五十六张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（2）酸性环境 稀醋酸 （1）新沸冷H2O减慢VitC被O2氧化速度（3）立即滴定 赶走水中O2减少O2的干扰3、讨论第五十七张，PPT共九十八页，创作于2022年6月4. 附加剂干扰的排除片剂 过滤注射剂 抗氧剂 丙酮甲醛Na2SO3 NaHSO3 Na2S2O3 Na2S2O5 第五十八张，P

15、PT共九十八页，创作于2022年6月CHHOOaS3aSO+H2NHON2252HONHCOS3a第五十九张，PPT共九十八页，创作于2022年6月(二) 2，6 - 二氯靛酚滴定法1、原理2、方法自身指示终点法第六十张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（2）快速滴定 2min内 （1）酸性环境 HPO3-HAc 稳定VitC防止其他还原性物质干扰（3）亦可剩余比色测定 （定量过量）（测剩余染料）3、讨论第六十一张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（4）缺点 需经常标定贮存一周不稳定专属性强，多用于含 Vc的制剂和食品的分析（5）优点第六十二张，PPT共九十八页，创作于2022年6

16、月（三）高效液相色谱法血浆中维生素C的测定(稳定性） 标准溶液包括样品预处理过程均需加入偏磷酸，偏磷酸同时可用于血样中的蛋白沉淀；当天取血当天测定；处理好的样品亦需冰箱保存第六十三张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第四节 维生素D的分析一、结构与性质（一）结构维生素 D2(麦角骨化醇) 维生素D3(胆骨化醇) 第六十四张，PPT共九十八页，创作于2022年6月1.性状：无色针状结晶或白色结晶性粉末；无臭，无味。2.溶解性：宜溶于有机溶剂，在植物油中略溶，在水中不溶。3.不稳定性：含有多个烯键，所以极不稳定，宜氧化变质，效价降低，毒性增强。（二）性质第六十五张，PPT共九十八页，创作于2

17、022年6月4旋光性 维生素D2 6个手性碳原子 维生素D3 5个手性碳原子5显色反应：甾类化合物氯仿溶液 黄色 红色 紫色 绿色6紫外吸收特性：无水乙醇 265nm 醋酐硫酸第六十六张，PPT共九十八页，创作于2022年6月二、鉴别试验 （一）显色反应1与醋酐-浓硫酸反应 氯仿溶液 黄色 红色 紫色 绿色醋酐硫酸2与三氯化锑反应 本品1,2-二氯乙烷 三氯化锑试液 橙红色 粉红色 第六十七张，PPT共九十八页，创作于2022年6月3其它显色反应 维生素D 三氯化铁 橙黄色 二氯丙醇 乙酰氯 绿色 （二）比旋度鉴别无水乙醇溶液 维生素D2 比旋度为102.5至107.5 维生素D3 比旋度为1

18、05至112 第六十八张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（三）其它鉴别方法 薄层色谱法、HPLC法制备衍生物测熔点 紫外、红外吸收光谱 （四）维生素D2、D3的区别反应维生素D2 维生素D3 96%乙醇 10ml 取0.1ml 乙醇1ml和85%硫酸5ml 红色max570nm 黄色 max495nm 第六十九张，PPT共九十八页，创作于2022年6月三、杂质检查（一）麦角甾醇的检查维生素D290%乙醇溶液 洋地黄皂苷溶液 不得发生浑浊或沉淀 第七十张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（二）前维生素D的光照产物第七十一张，PPT共九十八页，创作于2022年6月四、含量测定正相高效

19、液相色谱法 （一）维生素D测定法 含量以单位表示每单位相当于维生素D 0.025g 注意：计算的是维生素D及前维生素D经折 算成维生素D的总量第七十二张，PPT共九十八页，创作于2022年6月测定在半暗室及避免氧化的情况下进行第一法：无干扰杂质第二法：有VA及其他杂质干扰第三法：用第二法时，前 VD峰受杂质干扰 仅VD峰可分离第七十三张，PPT共九十八页，创作于2022年6月 第一法内标物：邻苯二甲酸二甲酯色谱条件及系统适用性试验：填充剂：硅胶流动相：正己烷-正戊醇（997：3）检测波长：254nm无干扰杂质第七十四张，PPT共九十八页，创作于2022年6月维生素D3光照前维生素D3反式维生素

20、D3维生素D3速甾醇D3与维生素D3的比保 留 时 间分离度1.01.0溶液组成先后进样5次，维生素D3 峰面积的 RSD2.0 % 0.50.61.01.1系统适用性试验第七十五张，PPT共九十八页，创作于2022年6月校正因子测定：维生素D的校正因子: f1=Asmi/Aims前维生素D折算成维生素D的校正因子:f2=（Asmr-f1msAr1）/（Ar2ms）含量测定：计算维生素D及前维生素D折算成 维生素D的总量mi=（f1Ai1+f2Ai2）ms/As第七十六张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第二法第一步：皂化提取供试品OH-加热回流冷却乙醚提取乙醚提取液挥干乙醚残渣甲醇溶解

21、供试溶液A有VA及其他杂质干扰第七十七张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第二步：分离收集供试品溶液ARP-HPLC维生素D前维生素D维生素A及其他杂质叠峰分离收集供试品溶液B维生素D及前维生素D第三步：按第一法进行含量测定（内标法）挥干内标的正己烷溶液溶解第七十八张，PPT共九十八页，创作于2022年6月第三法第一步：皂化提取同第二法得供试品溶液A第二步：供试品溶液ARP-HPLC维生素D前维生素D维生素A及其他杂质叠峰分离供试品溶液C收集挥干异辛烷溶解90、1.5h挥干正己烷溶解前维生素D维生素D第三步：用第一法色谱条件按外标法计算含量用第二法时，前 VD峰受杂质干扰第七十九张，PP

22、T共九十八页，创作于2022年6月苯并二氢吡喃醇第五节 维生素E的分析 一、结构与性质（一）结构第八十张，PPT共九十八页，创作于2022年6月名 称R1R2相对活性-生育酚-生育酚-生育酚-生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1*第八十一张，PPT共九十八页，创作于2022年6月生物效价 右旋体 ： 消旋体 = 1.4 ：10dl生育酚醋酸酯第八十二张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（二）性质1、溶解性：易溶于有机溶剂，不溶于水4、UV2、水解性：酯键易水解3、氧化性第八十三张，PPT共九十八页，创作于2022年6月7515（一）硝酸反应橙红色二、鉴别试验第八

23、十四张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（橙红色）生育红生育酚HNO3强氧化剂第八十五张，PPT共九十八页，创作于2022年6月三氯化铁联吡啶反应O（二）第八十六张，PPT共九十八页，创作于2022年6月生育酚对-生育醌红色Fe3+O第八十七张，PPT共九十八页，创作于2022年6月max = 284nmmin = 254nm0.01%无水乙醇中UV法（三）第八十八张，PPT共九十八页，创作于2022年6月薄层板 硅胶G展开剂 环己烷 -乙醚（4 ：1）显色剂 硫酸（105 5） TLC法（四）（五）其他鉴别方法 红外、气相色谱法第八十九张，PPT共九十八页，创作于2022年6月（二）生育酚 三、杂质检查 1. 原理：游离生育酚还原性，硫酸铈滴定2. 试剂：硫酸铈滴定液（0.01mol/L） 指示剂：二苯胺（亮黄灰紫）（一）酸度：游离醋酸第九十张，PPT共九十八页，创作于2022年6月四、含量测定GC法（一）GC特点1、选择性好灵敏度高速度快分离效能好挥发性低、不稳定、极性强衍生化。易受样品蒸气压限制第九十一张，PPT共九十八页，创作于2022年6月固定液硅酮（OV-17）担体硅藻土或高分子多孔小球柱温265检测器氢火焰离子化检测器(FID)内标正三