脓汁和粪便标本中病原菌检测

1、关于脓汁和粪便标本中病原菌的检测第一张，PPT共四十二页，创作于2022年6月空气细菌检查结果分析 细菌菌落直径13mm，有光滑型、粗糙型、粘液型。霉菌菌落比较大，呈棉絮状、绒毛状。计数菌落形成单位（CFU）,报告结果。37培养24小时培养72小时培养48小时第二张，PPT共四十二页，创作于2022年6月第三张，PPT共四十二页，创作于2022年6月第四张，PPT共四十二页，创作于2022年6月第五张，PPT共四十二页，创作于2022年6月1 3 2 4 1 3 2 4 手指皮肤的细菌学检查甲和乙、丙和丁共用1个平板上:甲、丙常规洗手下:乙、丁标准洗手甲（丙）乙（丁）丙丁第1格为洗手前，第2格

2、为洗手后，第3格为消毒后，第4格空白对照。 第六张，PPT共四十二页，创作于2022年6月手指皮肤细菌检查结果分析 比较洗手前后细菌的种类。洗前细菌种类多。洗后细菌种类少。洗手能洗掉大多数暂住菌。 比较常规和标准洗手的细菌数量。常规（简单）洗手，平板上细菌数量少。标准洗手，平板上细菌数量多。常住菌数量大，牢固附着在皮肤上，常洗不掉， 可洗松动，经摩擦接种、脱落到培养基上，显示细菌更多？外科手术人员洗手？ 碘酒和酒精棉球消毒以后，有没有细菌生长？空白对照有没有细菌生长？第七张，PPT共四十二页，创作于2022年6月医学微生物学实验综合性实验一脓汁和粪便标本中病原菌的检测（三）菌落特征观察P11细

3、菌纯培养P10油镜使用方法（讲解）脓汁和粪便标本检验（录像）第八张，PPT共四十二页，创作于2022年6月菌落特征 Colony Characteristics大小：大(直径约3mm以上)，中(直径约13mm)，小(直径约1mm以下)。形状：圆形，卵圆形、假根形、丝状、不规则等。边缘：整齐，锯齿状，波浪状，羽毛状。表面：隆起、平坦、中心凸起、脐形凹陷；光滑或粗糙、湿润或干燥。色素：一般为无色或灰白色，特殊色素有两类：脂溶性色素(菌落本身着色，培养基不着色)和水溶性色素(菌落及培养基均着色)。溶血性：不溶血，不完全溶血(菌落周围呈草绿色、不透明)，溶血(菌落周围出现透明环)。第九张，PPT共四十

4、二页，创作于2022年6月金黄色葡萄球菌菌落特征X-SA琼脂培养基添加了显色酶基质，金黄色葡萄球菌形成淡蓝色菌落 。血琼脂菌落直径约2mm、圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐，菌落周围有透明的溶血环，溶血菌株大多有致病性。 Baird-Parker琼脂菌落黑色，奶油状，表面光滑，湿润，圆形，凸起，有光泽，边缘整齐，不透明，外层有一透明圈 。第十张，PPT共四十二页，创作于2022年6月伤寒沙门菌菌落特征HE琼脂Hektoen Enteric Agar沙门菌产生蓝绿色、黑色中心菌落 XLD琼脂木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂Xylose Lysine Desoxycholate Agar沙门菌产生较小黑

5、色菌落SS琼脂Salmonella Shigella Agar沙门菌产生较小黑色菌落埃希菌产生较大红色菌落 第十一张，PPT共四十二页，创作于2022年6月链球菌菌落特征血琼脂甲型溶血性链球菌，菌落周围有12mm宽的草绿色溶血环，称甲型溶血或溶血。血琼脂乙型溶血性链球菌，菌落周围有24mm宽、红细胞完全溶解、透明的溶血环，称乙型溶血或溶血。血琼脂丙型链球菌，不产生溶血素，菌落周围无溶血环，称不溶血性链球菌或溶血。甲型乙型丙型第十二张，PPT共四十二页，创作于2022年6月志贺菌菌落特征HE琼脂Hektoen Enteric Agar形成不发酵乳糖的深绿色菌落。麦康凯琼脂MacConkey Ag

6、ar 形成较小的，无色半透明不发酵乳糖的菌落。SS琼脂Salmonella Shigella Agar 菌落圆形、液滴状、边缘整齐，湿润，无色半透明。第十三张，PPT共四十二页，创作于2022年6月大肠埃希菌菌落特征麦康凯琼脂MacConkey Agar伊红美蓝琼脂eosin methylene blue Agar 科玛嘉显色琼脂CHROMagar 第十四张，PPT共四十二页，创作于2022年6月细菌的纯培养 Pure Cultures脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落，菌落的色素是脂溶性的，是细菌本身的颜色。菌落直径2mm左右、圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明。37培养24

7、小时 第十五张，PPT共四十二页，创作于2022年6月粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落，菌落色素是水溶性的，不是细菌本身的颜色，颜色的产生是因为大肠埃希菌分解乳糖产酸，酸使伊红与美蓝结合，形成紫黑色具有金属光泽、大而隆起、不透明的菌落，菌落直径23mm。致病菌不分解乳糖，菌落呈伊红的颜色，淡粉红色，半透明，直径12mm。37培养24小时 第十六张，PPT共四十二页，创作于2022年6月若培养、放置时间过长或者平板上某个部位细菌比较多、菌落比较密集，大肠杆菌菌落颜色可能会发生改变。因为大肠杆菌利用完乳糖以后，就要利用蛋白质，蛋白质分解大多产生碱性物质，中和了乳糖分解时产生的酸

8、。大肠杆菌菌落可能会由原来的紫黑色变成粉红色，或者菌落中心黑色，边缘粉红色。由紫黑色变成粉红色菌落中心黑色，边缘粉红色。大肠埃希菌菌落特征改变第十七张，PPT共四十二页，创作于2022年6月若划线分离不成功，菌落数量少的，或者菌落分布密集的，获得菌落形成单位的可能性比较大。划线分离成功的，菌落分布越往后越稀疏的，获得单菌落可能性越大。第十八张，PPT共四十二页，创作于2022年6月斜面接种分工甲普通平板黄色菌落1支斜面 乙普通平板白色菌落1支斜面 丙 EMB平板紫黑菌落1支斜面 丁 EMB平板粉红菌落1支斜面 斜面正面上2/3作标记：组号、黄色、白色、紫黑、粉红。选择平板上相同的菌落数多的、典

9、型的、容易挑取的单菌落。在平皿底部玻璃上，画个大圈选取菌落，得到同组同学认可，才能挑取。第十九张，PPT共四十二页，创作于2022年6月画圈选菌落第二十张，PPT共四十二页，创作于2022年6月画圈选菌落第二十一张，PPT共四十二页，创作于2022年6月甲黄色丙紫黑乙白色丁粉红接种环套住菌落轻刮取菌第二十二张，PPT共四十二页，创作于2022年6月斜面接种法 Streak Slant Method甲黄色, 乙白色。丙紫黑, 丁粉红。标记：组号，颜色接种环取菌后，伸入斜面底部，自下向上先拉一条细菌接种线。再伸入底部，自下向上，作蜿蜒划线。细菌涂布接种在斜面培养基的表面。第二十三张，PPT共四十二

10、页，创作于2022年6月生物安全警告接种环接种斜面一次，可产生几十个微生物气溶胶颗粒。气溶胶粒径100um沉降很快,50um在0.4s内扩散开,5um通过呼吸道直接到达肺泡。Pike博士对实验室感染统计分析结果发现，不明原因的感染高达82%，大多数是气溶胶在空气中扩散引起的。实验时应坐着，在火焰周围1020厘米内操作，保持安静、有序，尽量少说话、少走动，以免感染病原菌。第二十四张，PPT共四十二页，创作于2022年6月灭菌 收集平板 灭菌桶内（平板底部朝下，盖朝上放置） 速送灭菌室 高压蒸汽灭菌 洗刷。第二十五张，PPT共四十二页，创作于2022年6月第二十六张，PPT共四十二页，创作于202

11、2年6月奥林巴斯 CX21型 生物显微镜第二十七张，PPT共四十二页，创作于2022年6月使用须知显微镜是精密光学仪器，请不要让其受到撞击，请小心操作。在搬运显微镜时，请按右图所示，以双手抓住镜臂孔的两侧，小心搬运。如果拿住载物台和镜筒等部位搬运的话，有可能会造成损坏。第二十八张，PPT共四十二页，创作于2022年6月开关与调整光强开或关之前，必须将亮度调整旋钮按箭头相反方向转动到最小位置，以免损坏灯泡。电源开关拨到侧为开，拨到侧为关闭。按箭头方向转动亮度调整旋钮变亮，相反方向转动则变暗。第二十九张，PPT共四十二页，创作于2022年6月聚焦从显微镜的侧面观察，按箭头方向转动粗调旋钮，使物镜尽

12、可能接近标本。一边看目镜，一边慢慢逆箭头方向转动粗调旋钮， 使载物台下降。看到标本以后，用微调旋钮来正确对焦。10倍物镜的工作距离（WD，从物镜到标本的 距离）为10.5mm。 油镜的WD为0.13mm。第三十张，PPT共四十二页，创作于2022年6月调整聚光镜位置和孔径光阑用聚光镜上下移动旋钮，将聚光镜转到最上面。在孔径光阑环上刻有物镜倍率（10倍，100倍等），观察时将与使用物镜相对应的倍率放到正面。第三十一张，PPT共四十二页，创作于2022年6月转换物镜旋转物镜转盘，将希望使用的物镜（10倍、100倍）转到标本的上方。第三十二张，PPT共四十二页，创作于2022年6月100倍浸油物镜使

13、用方法油镜放入光路之前，一定要在标本的观察部位上加一滴浸油。旋转物镜转盘，使油镜进入光路，用微调旋钮对好焦距。如果浸油内有气泡，会影响观察，可稍微旋转物镜转盘，使油镜来回通过12次浸油，排除油内气泡。第三十三张，PPT共四十二页，创作于2022年6月香柏油折射率n=1.515空气的折射率n=1.000玻璃的折射率n=1.520油浸镜的原理光线 滴加香柏油可使光线更多进入物镜,避免光线通过折射率低的空气而散失,以提高物镜的分辨率,使物象明亮清晰。 放大倍数：目镜10倍物镜90或100倍。第三十四张，PPT共四十二页，创作于2022年6月奥林巴斯 CX21型 生物显微镜（实验柜内，每人一台）注意：

14、只能横放，不得竖放。第三十五张，PPT共四十二页，创作于2022年6月显微镜油镜的使用P1310物镜看到标本滴加香柏油100油镜浸泡油中模糊物象细调节调焦，观察物像记录结果关闭电源。将聚光镜调到最高处；孔径光阑环上刻有的物镜倍率（10，100）必须转到正面，与使用的物镜相对应。油镜处理：擦镜纸拭去香柏油 擦镜纸沾少许乙醇和乙醚（7:3）混合液擦拭擦镜纸擦拭油镜。显微镜罩上防尘罩 横放在实验柜内。(顺德校区）实验台两侧的电源插座，只能插入一个插头，请选择离你最近的电源插座。（校本部）实验台中间，三个位的插座，中间那位插孔没有电，不能使用，只能用两侧的插座。第三十六张，PPT共四十二页，创作于20

15、22年6月医学微生物学实验综合性实验三、一空气、手指皮肤的细菌学检查结果分析脓汁和粪便标本中病原菌的检测菌落特征观察P11细菌纯培养P10油镜使用方法（讲解）脓汁标本检验 （录像）肠道致病菌的分离鉴定（录像）第三十七张，PPT共四十二页，创作于2022年6月试管用毛刷，上下刷洗内壁和管底。字迹用湿纱布，粘去污粉擦拭。管口朝向相同，流水冲洗10次。洗干净的试管，倒扣在筐内，晾干。平皿用纱布，旋转擦拭内外侧，字迹用纱布粘去污粉擦拭。流水冲洗10次。逐个倒扣在筐内，晾干。第三十八张，PPT共四十二页，创作于2022年6月思考题在微生物学实验中,怎样才能避免杂菌的污染?空气的卫生标准规定如何?你的实验结果说明了什么问题?怎样从医务人员手指上分离和