动物细胞工程-动物细胞融合与单克隆抗体

1、动物细胞工程-动物细胞融合与一、动物细胞融合隆抗体细胞工程：可分为植物细胞工程和动物细胞工程两大领域。二、隆抗体动物细胞工程包括：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产体等。隆抗1、定义：动物细胞融合（cell fu）也称细胞杂交（cell hybridization），是指两个或多个动物体细胞结一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。12、原理：2、原理：细胞膜的性细胞膜的性3、诱导： 物理法：离心、振动、电刺激 化学法：聚乙二醇（PEG） 生物法：灭活的4、具体过程：4、具体过程：离体的动物组织（胰蛋白酶处理）获得分散的单个动物细胞诱导

2、融合（杂种细胞）动物细胞培养25、意义拓展：灭活诱导细胞融合的原理表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，是细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。这一过程既能反映出糖蛋白在细胞识别中的重要作用，又能反映出细胞膜结构的性特点。突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，至今种间、属间、成功。甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得了6、应用灭活：用物理或化学使或细菌失去能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。用于研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等。特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造隆抗体开辟了新途径。点对点练习

3、【例1】动物细胞融合和植物原生7、与植物体细胞杂交的比较融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是（）A融合的原理 C融合的诱导B融合的优点 D融合的过程3动物细胞融合植物体细胞杂交原理细胞膜的性细胞膜的性、细胞的全能性诱导物理法：离心、振动、电刺激化学法：聚乙二醇（PEG） 生物法：灭活的物理法：离心、振动、电刺激化学法：聚乙二醇（PEG）意义使远缘杂交成为可能克服了远缘杂交不亲和的用途隆抗体等培育新品种等【例2】下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（1、隆）当机体受抗原刺激时，被激活的B细胞增殖形成效应B细胞G 诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养能得到优良动物B使用冷冻保存的正常细

4、胞通常为 10 代以内，以保持细胞正常的二倍体核型（浆细胞）和B细胞，大量的浆细胞和大量的抗体分子分布到血液、组织液等中。如果能选出一个制造一种专一抗体的浆细胞进行培养，就到由针对 大量的单细胞经增殖而形成细胞群，即隆。隆细胞将C在显微镜下观察发生品的毒性D用胰蛋白酶处理动物组织后，可用无菌水稀释制成细胞悬浮液突变的细胞比例可推知某化学药一种抗原的特异性抗体，如果能大量培养该种细胞，即可特异性抗体。3、2、杂交瘤细胞&隆抗体隆抗体过程B淋巴细胞（具体是指其中的浆细胞）具有产生单一抗体的能力，但不能在体外无限增殖；骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。因此，把一种

5、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细胞的特性能无限增殖，同时能特异性抗体，产生的这种特定的抗体就是隆抗体。4通过选择培养基及抗原抗体杂交检测，筛选出需要的杂交细胞4、隆抗体的优点灵敏度高、特异性强、可大量5、隆抗体的应用 作为试剂：隆抗体由于纯度高、特异性强，因此能够准确地识别抗原物质的细微差别，并跟一定的抗生特异性结合。利用同位素标记的隆抗体，在特定组织中成像的技术，可以定位和肿瘤、心畸形等疾病。（注入小鼠的腹腔内）5抗原抗体杂交【例3】“生物5、隆抗体的应用”是指（） 用于治疗疾病和运载药物：从目前临床试验来看，AB杂交瘤细胞 D在单抗上连接抗癌药物隆抗体

6、隆抗体主要用于的治疗，也有C产生特定抗体的B淋巴细胞少量用于其他疾病的治疗。将抗癌细胞的隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素结合，制成“生物”，注入体内，能够将药物定向带到癌细胞所在的位置，在原位置杀死癌细胞。【例4】运用动物细胞工程技术筛选杂交瘤细胞 【例5】下列关于利用细胞工程技术隆抗体的正确操作步骤是（特异性抗原）隆抗体的叙述，不正确的是（）A给小鼠注射抗原，是为了获得能产生相应抗体的B细胞 B骨髓瘤细胞与B细胞混合培养，是为了获得融合细胞免疫动物免疫的细胞和骨髓瘤细胞能产生特定抗体的杂交瘤细胞大量培养杂交瘤细胞 诱导细胞融合C隆抗体的第二次筛选是选出杂交瘤细胞D杂交瘤细胞进行体内培

7、养，是为了获得能产生隆抗体的胚胎隆抗体的大量 B DE生物是用癌细胞的隆抗体杀死癌细胞A CF动物细胞培养的基础是细胞具有全能性6【例7】利用细胞工程方法，以 SARS体下列相关叙述正确的是（【例6】下列有关利用动物细胞工程生产核衣壳蛋白为抗原）出隆抗隆抗体的叙述，错误的是（）A B隆抗体隆抗体使用的主要生物材料是骨髓瘤细胞和浆细胞的原理之一是一个浆细胞可以产生多种特异性抗体用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的克隆抗体体外培养单个效应B 细胞可以获得大量针对 SARS抗体抗体为单C筛选能理所需抗体的杂交瘤细胞运用了抗原-抗体特异性反应原的隆D隆抗体具有纯度高、产量大、灵敏度高等优点C将

8、等量效应 B 细胞和骨髓瘤细胞混合，经 PEG 诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D利用该出隆抗体与SARS者核衣壳蛋白特异性结合的方法可【例8】（2013 重庆）如图是【例8】（2013 重庆）如图是抗体流程的简明示意）抗体流程的简明示意）图。下列有关叙述，正确的是（图。下列有关叙述，正确的是（A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T 淋巴细胞 B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成 C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D是经筛选培养获得的能特异性抗体的细胞群7【例10】下图为细胞融合的简略过程，请据图回答：【例9】（2014）为达到相应目的，必须通过分子检测的是（）A携带链霉素抗性受体菌的筛选B

9、产生抗人白细胞介素8 抗体的杂交瘤细胞的筛选C转抗虫棉植株抗虫效果的鉴定D21 三体综合征的（1）若A、B 是植物细胞，在细胞融合之前须处理获得原生，由A、B 到细胞 C 的过程中，常用的促融剂是。融合完成的标志是。【例10】若A、B 是植物细胞，则形成的 D 细胞还要应用技术把D 培养成植株。在组织培养过程中，除了提供水分和必要的有机营养物质外，还需要在培养基中加入 和 。同时，培养过程中，除保证必要的温度、光照和氧气等外界条件外，还必须保证的关键条件。（4）若A、B 是动物细胞，一般取自，然后用使其分散开来；由A、 B 到 C 的过程中，常用的且不用于植物细胞融合段是。 A、B 融合为 C

10、 的过程说明了细胞膜具有。（5）若该过程是隆抗体，在A、B 到 C 的过程中，两两融合所形成的 C 有种，用来培养的D 细胞应该是，获得D 后，常用的培养方法是培养液中培养和。8【例11】（1）（2）【例11】人绒毛膜促 种糖蛋白，隆抗体隆抗体过程中要用到 和技术。隆抗体过程中，给小鼠注射的 HCG 相当于 ，使小鼠激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞的一抗 HCG。下图是抗 HCG隆抗体可用于早孕的相应 的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的免疫。取产生流程示意图，请分析回答：该小鼠的淋巴细胞 细胞进行融合，使用的化学诱导剂是，细胞融合的原理是。（3）图中有两次筛选过程，其中步骤将融合细胞放在A 装置中的培养基中培养的目的是筛选出，步骤是通过的方法筛选出。（4）在细胞内 DNA一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径。另一（5）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过或小鼠腹腔内培养，获取大量基