医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册（试行第二版）要点解读

1、的：规范员、流程保障检测质量提检测效率满检测需求适范围：开展新冠核酸检测的医疗机构的及适范围一、技术人员基本要求 二、标本采集基本要求 三、标本管理基本要求 四、实验室管理基本要求五、实验室质量控制与管理六、核酸检测结果反馈基本要求 七、核酸检测安全管理八、核酸检测信息化管理九、标本混采 十、其他要求主要内容采样员基本要求物安全培训（培训合格）：物安全三级个防护要求及穿脱流程。采样技能：熟悉标本种类和采集法，熟练掌握标本采 集操作流程及注意事项。做好标本信息的记录，确保标本质量符合要 求、标本及相关信息可追溯。一、技术人员检测员基本要求资质要求相关专业的专以上学历或具有中级及以上 专业技术职务

2、任职资格。2年以上的实验室作经历。基因检测相关培训合格证书：PCR上岗证。数量要求员数量与项及标本量相适宜，保证时效 性和准确性。一、技术人员采样基本原则采样点设置人员配置及防护要求采样流程采样管选择标本的类型标本的采集方法1234567二、标本采集（）基本原则检测能与诊疗量匹配，与采样量适应，避免 标本积压、标本失效、检测结果反馈迟缓。不同采集对象设置不同采样区域，避免交叉感 染。标本采集应满本医疗机构基本需求，及其他 “应检尽检”和“愿检尽检”的要求。二、标本采集（）采样点设置设置原则：安全、科学、便民。设置要求独空间，具备通条件，内部划分相应的清 洁区和污染区，配备卫设施或装置。清晰的指

3、引标识，并明确采样流程和注意事项。独的等候区域，尽可能保证员单向流动， 落实“1线”间隔要求，严控员密度。二、标本采集（三）员配置及防护要求员配置：采样员1-2名/采样点，休息1次/2-4时。防护装备：物安全三级实验室个防护（N95 及以上、护 镜、防护服、乳胶套、防靴套）。每采个应当进严格消毒或更换套。接触患者液、体液、分泌物或排泄物，戴双层乳 胶套；套被污染时，及时更换外层乳胶套。二、标本采集（四）采样流程建采样操作流程：预约、缴费、信息采集核对、采 样、送检、报告发放等。信息采集核对受检者（患者）信息：姓名、份证号、居住地址、 联系式等。采样信息：采样点名称、标本编号，标本采集期、 时间

4、、采集部位、类型、数量等。应当利条码扫描等信息化段采集受检者信息。标本采集前，采样员应当对信息进核对。报告发放：在公共区域以信息公告形式告知发放时 限和发放式。二、标本采集新增内容（五）采样管选择群筛查应选择具有病毒灭活功能如含胍盐（异 硫氰酸胍或盐酸胍等）或表活性剂的采样管。选含胍盐的采样管。发热诊或急诊的快速检测，则根据所的核酸 检测试剂的要求确定采样管。二、标本采集(六) 采集法应采集呼吸道标本上呼吸道标本（选鼻咽拭等）2)下呼吸道标本（呼吸道吸取物、管灌洗液、 肺泡灌洗液、深咳痰液等）。重症病例优先采集下呼吸道标本。根据临床需要可留取便标本。更新内容二、标本采集取样拭子Type of

5、Swab采集端（植绒）折断处手持端选用聚酯、尼龙等非棉质、非藻酸钙材质 的拭子，且柄部为非木质材料。（七）采集法解剖位置采集时机 采集拭咽部解剖图上呼吸道标本采集二、标本采集（六）采集法1. 鼻咽拭的采集采样员轻扶被采集员的头部，执拭鼻孔垂直部向进， 沿下鼻道的底部向后缓缓深，待拭 顶端到达鼻咽腔后壁时，轻轻旋转周（如遇反射性咳嗽，应停留刻），然 后取出拭。将拭头浸含23ml病毒保存液的管 中，尾部弃去，旋紧管盖。由于鼻道呈弧形，不可过猛，以免 发外伤出。方向Direction部位Location二、标本采集（六）采集法2. 咽拭的采集被采集员头部微仰，嘴张，并发“啊”，露出两侧咽 扁桃体，将

6、拭越过根，擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁并旋 转3-5次，然后取出拭。将拭头浸含23ml病毒保存液的管中，尾部弃去，旋紧 管盖，避免泄露。部位Location力度Strength二、标本采集（六）采集法深咳痰液的采集患者深咳后，将咳出的痰液收集于含3ml采样液的50ml螺塑料管中。如果痰液未收集于采样液中，可在检测前，加23ml采样液，或加与痰液等体积的含1g/L蛋酶K的 磷酸盐缓冲液将痰液化。鼻咽或呼吸道抽取物的采集与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从管抽取呼吸道分泌物。将收集器头部插鼻腔或管，接通负压， 旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并3ml采样液冲洗收集器1次（亦可导尿管接在5

7、0ml注射器上来替代收集器）。二、标本采集（六）采集法管灌洗液的采集将收集器头部从鼻孔或管插处插管（约30cm深 处），注5ml理盐，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液，并采样液冲洗收集器1次（亦 可导尿管接在50ml注射器上来替代收集）。肺泡灌洗液的采集局部醉后将纤维管镜通过或鼻经过咽部插右 肺中叶或左肺段的管，将其顶端契管分开， 经管活检孔缓缓加灭菌理盐，每次3050ml，总 量100250ml，不应超过300ml。二、标本采集（一）标本包装标本管应大小适合、带螺旋盖、内有垫圈、耐冷冻。标本管应注明标本编号、种类、姓名及采样日期。密闭后的标本管应放入大小合适的塑料袋内密封，

8、每 袋装一份标本。（二）标本送检标本采集后室温放置不超过4小时，应在2-4h内送到 实验室。如果需要长途运输标本，应采用干冰等制冷方式进行 保存，严格按照相关规定包装运输。三、标本管理（三）标本接收标本接收员的个防护按采样员防护装备执。标本运送员和接收员对标本进双签收。（四）标本保存标本应当尽快进检测，24时内检测的标本可置于4 保存；24时内法检测的标本则应置于-70或以下保 存（如-70保存条件，则于-20冰箱暂存）应设专库或专柜单独保存标本。标本运送期间避免反复冻融。三、标本管理（四）标本保存4. 境外险区域群以及新冠肺炎患者的密接 者和密接者的密接者等集中隔离员的核酸检 测标本，检测后

9、，应当在-20保存7 天。新增内容删除了“混检标本的采集和检测”三、标本管理（）实验室资质要求符合病原微物实验室物安全管理条例和医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法 有关规定。物安全级及以上实验室备案和临床基因扩增 检验实验室备案。独设置的医学检验实验室还应当符合医学检 验实验室基本标准（试）和医学检验实验 室管理规范（试）等要求。四、实验室管理（）实验室分区要求分区原则：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增和产物分析区物理空间上完全相互独，没有空直接相通。各区功能：试剂储存和准备区：试剂制备、分装，扩增混合液制 备，离管、吸头等消耗品的贮存和准备。标本制备区：转运箱开启、标本灭活，核酸提取并

10、加扩增反应管。核酸扩增区和产物分析区：如使全动核酸分析仪 可合并区域根据仪器的功能，区域可适当合并。四、实验室管理（三）主要仪器设备核酸提取仪、医PCR扩增仪、物安全柜、病毒 灭活设备（如浴锅等）、冰箱和冰柜、离机、UPS。（四）实验室检测标本核收及前处理：在物安全柜内对标本进清点 核对，并对标本进灭活处理。标准检测流程：试剂准备、标本前处理、核酸提取、 核酸扩增、结果分析及报告。复检流程：实验室应当建可疑标本和阳性标本复检 的流程。四、实验室管理（四）实验室检测实验室接收样本后，在物安全柜内对标本进清点 核对按标准操作流程进检测试剂准备：选择国家药品监督管理部批准的试剂， 使试剂盒配套或说明

11、书推荐的标本保存液和核酸 提取试剂。标本前处理：含胍盐灭活型标本保存液可直接进 核酸提取；灭活型标本保存液则56孵育30分钟 热灭活、化学灭活处理。四、实验室管理四、实验室管理（四）实验室检测按标准操作流程进检测核酸提取：在物安全柜内打开标本采集管加样。 核酸提取完成后，即将提取物进封盖处理。在物安全柜内将提取核酸加PCR扩增反应体系中。核酸扩增：将扩增体系放扩增仪，核对扩增程序 是否与试剂说明书相符，启动扩增程序。扩增后反应管不要开盖，直接放于垃圾袋中，封好 袋，按般医疗废物转移出实验室处理。实验室应建可疑标本和阳性标本复检的流程。更新内容各医疗机构应当加强核酸检测质量控制。应选扩 增检测试

12、剂盒指定的核酸提取试剂和扩增仪。（）性能验证在临床标本检测前，对检测系统（提取试剂、提取仪、 扩增试剂、扩增仪等）进必要的性能验证。性能指标：精密度（少要有重复性）和最低检测限。建议选灵敏的试剂（检测限500 拷/ml）。五、质量控制与管理更新内容（）室内质控依据：国家卫健康委办公厅关于医疗机构开展新 型冠状病毒核酸检测有关要求的通知每批检测少有1 份弱阳性质控品（第三质控品，通 常为检出限的1.5-3 倍）+ 3 份阴性质控品（理盐）。质控品随机放在临床标本中，参与从提取到扩增的全 过程。在规模群筛查时的阳性结果，应采另外1-2种更 为灵敏且扩增不同区域的核酸检测试剂对原始标本进复核后可报告

13、。五、质量控制与管理更新内容五、质量控制与管理更新内容（三）室间质评应常态化参加国家级或省级临床检验中室间质评。检测量以及承担重点群筛查等任务的实验室，要 适当增加室间质评频率。不按照本地要求参加室间质评的，或室间质评结果不 合格的，或检测结果质量问题突出的，不得开展核酸 检测。删除了“质量管理的内容”（）报告时限发热诊、急诊患者，6时内报告核酸检测结果。普通诊、住院患者及陪护员等群，原则上12 时内报告结果。“愿检尽检”群，般在24时内报告结果。医疗机构应当为受检者出具检测报告，并告知其查询式，不得以任何理由不出具检测报告。六、结果反馈（）检测报告新型冠状病毒核酸检测报告 单参考模版。检测结

14、果互认。可采纸质、快递、络或信 息化系统等多种形式发放核酸 检测报告，并保护个隐私。阳性结果应在2时内报告。六、结果反馈七、安全管理（）标本安全管理标本转运箱封闭前，须使75%酒精或0.2%含氯消毒剂喷洒消 毒外部标本运输包装：危险品航空安全运输技术细则的PI602 分类包装要求疑似或确诊患者标本应标有特殊标识，并进单独转运，按 照B类感染性物质进三层包装。检测完成后达到保存时限的剩余标本处理灭活标本：需压灭活，直接按医疗废物起转运出实验 室进销毁处理。灭活标本：装专密封废物转运袋中进压蒸汽灭菌 处理后再转运。新增、修改内容（）实验室检测安全管理1.基本要求七、安全管理更新内容标本检测应当在物

15、安全级实验室进在物安全险评估的基础上，采取适当的个体防护措 施，包括套、罩和隔离等。制定实验室物安全相关程序件。制定实验室物安全操作失误或意外的处理操作程序。删除了“采物安全三级实验室的个防护”（）实验室检测安全管理2. 实验前安全要求物表消毒剂：0.2%含氯消毒剂（配制不超过24时）或75%酒精消毒物表：实验室桌、台及地；样本转运桶内壁和 标本采集密封袋；标本采集管外壁（此处不建议使75% 酒精）样本渗漏的检查：转运实验室的标本转运桶应在物安 全柜内开启，取出标本采集管后，应先检查标本管外壁 是否有破损、管是否泄露或是否有管壁残留物。七、安全管理（）实验室检测安全管理2. 实验前安全要求样本

16、渗漏的处理：即吸纸覆盖，并喷洒有效氯含量 为0.55%的含氯消毒剂进消毒处理，不得对标本继续检 测操作，做好标本不合格记录后需即进密封打包，压蒸汽灭菌处理后销毁。灭活样本温浴热灭活：需旋紧标本采集管管盖，必要时 可封膜密闭管盖；温浴过程中可每隔10 分钟将标本轻 柔摇匀1 次，以保证标本均匀灭活；温浴后标本需静置 室温少10 分钟使溶胶沉降，随后再开盖进后续核酸 提取。七、安全管理（）实验室检测安全管理核酸提取和检测安全要求标本进核酸提取和检测时应尽可能在物安全 柜内进操作。如为打开标本管盖或其他有可能产溶胶的操 作，则必须在物安全柜内进。七、安全管理更新内容（）实验室检测安全管理4. 实验结

17、束后清洁要求需对实验室环境进清洁，消除可能的核酸污染。实验室空清洁：每次检测完毕后，固定和/或可移 动紫外灯进紫外照射 2 时以上。 必要时可采 核酸清除剂等核酸清除剂等试剂清除实验室残留核 酸。作台清洁：使0.2%含氯消毒剂或75%酒精进台、地清洁。七、安全管理（）实验室检测安全管理实验结束后清洁要求物安全柜消毒：0.2%含有效氯消毒液或75%酒 精喷洒消毒医疗废物垃圾袋外表。消毒后将垃 圾袋带出物安全柜放实验室废弃物转运袋中。 试管架、实验台、移液器等使75%酒精进擦 拭。物安全柜关闭后，紫外灯消毒30分钟。转运容器消毒：使前后需0.2%含氯消毒剂或75%酒精进擦拭或喷洒消毒。塑料或有机玻

18、璃材质物品清洁：使0.2%含氯消毒 剂或过氧酸或过氧化氢擦拭或喷洒。七、安全管理（三）实验室医疗废物管理基本要求制定医疗废物处置程序及污物、污处理操作程序。所有的危险性医疗废物必须按照统规格化的容器和 标式，完整且合规地标废物内容。由经过适当培训的员使适当的个防护装备和设 备处理危险性医疗废物。建医疗废物处理记录，定期对实验室排HEPA过滤 器进捡漏和更换，定期对处理后的污进监测， 采物指剂监测压灭菌效果。七、安全管理（三）实验室医疗废物管理2. 医疗废物的处理措施废液的处理普通污：产于洗池等设备，排实验室处理系 统，经统处理达标后进排放。感染性废液：实验操作过程中产的废液，化学消毒（0.55

19、%含氯消毒剂处理）或物理消毒（紫外照射30 分钟以上）式彻底消毒灭活后可排实验室处理 系统，经统处理达标后进排放。处理效果按GB18466医疗机构污染物排放标准 相关规定进评价。七、安全管理（三）实验室医疗废物管理2. 医疗废物的处理措施固体废物的处理分类收集。收集容器应当具有不易破裂、防渗漏、耐湿耐热、可密封 等特性潜在感染性废物应当及时进压蒸汽灭菌处理。废物处置之前，应 当存放在实验室内指定的安全位置。型固体废物如检测耗材、个防护装备等均需使双层防渗漏专 包装袋打包密封后经过压蒸汽灭菌处理，再转运出实验室。体积较的固体废物如HEPA 过滤器，应当由专业进原位消毒 后，装安全容器内进消毒灭菌

20、。不能进压蒸汽灭菌的物品如电设备可采环氧烷熏蒸消毒处 理。经消毒灭菌处理后移出实验室的固体废物需集中交由医疗废物处 理单位进处置。七、安全管理（四）实验室污染的处理物安全柜操作台局限污染：即吸纸覆盖，并使0.55% 含氯消毒剂进喷洒消毒。标本倾覆造成实验室污染保持实验室空间密闭，避免污染物扩散。即使润湿有0.55%含氯消毒剂的覆盖污染区。必要时（如量溢撒时）可过氧酸加热熏蒸实验室过夜（ 2g/m ）；或20g/L 过氧酸消毒液喷洒（8ml/m），作1-2时；或锰酸钾-甲醛熏蒸（8g/m），后加40%甲醛（10ml/m），4 时。清理污染物时严格遵循活病毒物安全操作要求，采压蒸汽 灭菌处理，并进

21、实验室换等。七、安全管理信息对接：在卫健康政部统筹下，做好标本 采集、核酸检测、检测报告的信息对接。建统的信息采集扫码程序：信息包括姓名、性 别、年龄、份证号、联系电话。标本采集的个信息与医疗机构信息系统顺利对接。各医疗机构间应做到信息互通、互采、互认。四川省新冠核酸检测信息系统八、信息化管理九、标本混采新增内容在群筛查时可以考虑采混采的案进，以提升 核酸检测效率。混合标本数可以为10 个或者10 个以下（如5合1）。 以10 合1 或5 合1 混采为例，与单检流程不同的主要 为采集、送检和检测结果的处理。（）采集和送检流程1.标识及信息登记登记流程：采集前分配10 个或5 个受检者为组，收集并 登记受检者相关