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文档简介

1、首批9价HPV疫苗在浦东开针.mp4基因工程专题复习 之HPV疫苗知多少执教教师:高鑫华学校名称:上海市位育中学学科版本:生命科学沪科版资料:HPV疫苗HPV疫苗:预防由HPV病毒感染引起的宫颈癌。接种HPV疫苗可使宫颈癌的感染率至少降低70%。HPV疫苗说一说:接种HPV疫苗后为何能够预防宫颈癌?HPV疫苗作用机理疫苗:B淋巴细胞T淋巴细胞浆细胞记忆B细胞记忆T细胞致敏T细胞二次免疫反应:反应快、反应强相同抗原再次侵入浆细胞致敏T细胞记忆B细胞记忆T细胞HPV疫苗作用机理抗原“一苗难求”价格高昂疫苗种类参考价格(3针)二价HPV1740元四价HPV2394元九价HPV3915元资料:HPV疫

2、苗人乳头瘤病毒(HPV) :DNA病毒,能引起人体皮肤、黏膜的上皮细胞增殖,有些可引起宫颈癌及癌前病变。思考:HPV结构中哪一种成分是激发人体免疫反应的抗原?资料:HPV病毒请根据讨论,设计出制备HPV疫苗的技术路线图。资料:HPV基因工程疫苗,主要以病毒的L1衣壳蛋白作为抗原,诱发机体产生免疫反应,清除感染的病毒。制备生产HPV疫苗1获取目的基因2目的基因与运载体进行体外重组3重组DNA分子导入受体细胞4筛选含目的基因的受体细胞基因工程过程:表达产物目的基因重组质粒导入筛选制备生产HPV疫苗1获取目的基因直接从生物体细胞中提取化学方法人工合成表达产物目的基因重组质粒导入筛选制备生产HPV疫苗

3、方法:表达产物目的基因重组质粒导入筛选制备生产HPV疫苗2目的基因与运载体进行体外重组基因工程工具:运载体:限制性核酸内切酶(限制酶)DNA连接酶自主复制酶切位点标记基因识别DNA分子中特定的脱氧核苷酸序列,并切断特定部位的两个脱氧核苷酸之间的键。将具有相同黏性末端的两个DNA片段拼接成新的DNA分子质粒或病毒稳定存在于受体细胞内制备生产HPV疫苗-C-T-G-C-A-G-G-A-C-G-T-C-C-T-G-C-A-G- Pst酶 G-A-C-G-T-C- 练一练:-G-A-C-G-T-C-G-T-G-C-A-C-A-T-C-G-A-T-黏性末端-G-T-G-C-A-C-制备生产HPV疫苗L1

4、基因BamHBamHEcoRVEcoRV青霉素抗性基因LacZ基因EcoRVEcoRBamHBgl资料:L1基因在HPV病毒DNA上的位置如下。质粒上的LacZ基因可在加入IPTG的情况下,使细菌利用X-Gal,呈现蓝色菌落,否则菌落为白色。思考:酶切目的基因和质粒时,可行的限制酶选用方案为?EcoRV制备生产HPV疫苗L1基因BamHBamH制备生产HPV疫苗BamHBamH自身环化目的基因正向连接、反向连接L1基因BamHEcoRBgl青霉素抗性基因LacZ基因EcoRVEcoRBamHBgl思考:酶切目的基因和质粒时,可行的限制酶选用方案为?EcoRV制备生产HPV疫苗目的基因与运载体重

5、组酶切效率有限DNA连接酶BamHEcoRBamHEcoR制备生产HPV疫苗表达产物目的基因重组质粒导入筛选制备生产HPV疫苗3重组DNA分子导入受体细胞4筛选含目的基因的受体细胞青霉素抗性基因目的基因加入青霉素IPTG和X-Gal利用标记基因筛选含目的基因受体细胞大肠杆菌被破坏的LacZ基因抗性基因LacZ基因LacZ基因:在加入IPTG和X-Gal的情况下,菌落蓝色重组质粒空质粒本身不具有标记基因制备生产HPV疫苗HPV疫苗是基因工程疫苗,主要成分是病毒不具备致病能力的衣壳蛋白。说一说:HPV基因工程疫苗与传统疫苗相比有何优点?安全性提高:主要成分是病毒的衣壳蛋白,不含病毒的遗传物质,既激发免疫反应,又不会引发相关疾病。解决了传统疫苗制备方法对

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