微生物学检验肠道病毒及检验课件

1、肠道病毒属小核糖核酸病毒科有72型人类肠道病毒：脊髓灰质炎病毒柯萨奇病毒埃可病毒新型肠道病毒（甲型肝炎病毒为72型）肠道病毒共同特征球形，20面体立体对称，无不包膜单股正链RNA细胞中增殖，引起细胞病变对脂溶剂敏感，耐酸经粪口途径传播临床表现多样化小核糖核酸病毒电镜图肠道病毒微生物学检验标本采集:粪便、肛拭、咽拭、 脑脊液检验程序：病毒鉴定： 中和试验 分子生物学方法：检测细胞培养物中病毒基因组血清学试验：取双份血清进行中和试验检测抗体脊髓灰质炎病毒是引起脊髓灰质炎（小儿麻痹症）的病原体生物学形状形态结构：球形，无包膜，单股正链RNA，有四种核衣壳蛋白培养特性：采用细胞培养，引起典型的细胞病变

2、分型：采用中和试验将Polio病毒分为、型，各型间无交叉反应抵抗力：在外界环境中抵抗力较强，在酸性环境中较稳定，对湿热、紫外线较敏感致病性与免疫性传染源 ：病人、带毒者传染途径：粪口途径致病机制：临床特征 90的感染为隐性感染 12为非麻痹性脊髓灰质炎或无菌性脑膜炎 仅约0.1%出现永久性弛缓性肢体麻痹 极少数发展为延髓麻痹病后对同型Polio.v有牢固免疫力微生物学检查粪便标本细胞培养中和试验血清标本中和试验病毒培养血清学诊断基因检测核酸杂交技术聚合酶联反应（PCR ）防治原则接种疫苗 小儿麻痹糖丸（口服） 灭活疫苗（注射）柯萨奇病毒和埃可病毒柯萨奇病毒分A、B 两组，共29个血清型埃可病毒

3、有31个血清型消化道感染，很少引起肠道症状临床表现多样血清学检查核核酸检测有助于病原学诊断尚无疫苗进行预防柯萨奇病毒与埃可病毒所致疾病疾病柯萨奇病毒埃可病毒无菌性脑膜炎麻痹疾病疱疹性咽峡炎普通感冒流行性肌痛手足口病报道不一心包炎新生儿心肌炎不明原因发热皮疹婴幼儿腹泻轮状病毒属轮状病毒科球形；双股RNA；双层衣壳，有放射状突起，呈轮状经粪口途径传播，引起腹泻以粪便为标本，查粪便中的病毒颗粒或病毒抗原疫苗尚在研制中轮状病毒分组及其致病性A组 引起婴幼儿腹泻B组 感染人-成人C组 感染猪，偶尔也感染人 D组 感染鸟类 E组 感染猪轮状病毒电镜图减毒活疫苗与灭活疫苗的比较项目活疫苗死疫苗接种方法口服糖

4、丸肌肉注射抗体产生血清抗体、分泌型抗体血清抗体细胞免疫有无间接免疫通过接种者粪便排毒无稳定性差，不易保存易保存副作用极少数引起疫苗相关脊灰无免疫效果更好好致病机制Polio病毒粪口途径小肠粘膜、淋巴结入血 第一次病毒血症 单核吞噬细胞 第二次病毒血症 脊髓前角运动神经原小儿麻痹症脊髓灰质炎病毒形态结构肝炎病毒是引起病毒性肝炎的病原体已知的肝炎病毒： 甲、乙、丙、丁、戊、己、庚型肝炎病毒甲型肝炎病毒是引起甲型肝炎的病原体生物学形状属肠道病毒72型形态：呈球形结构：直径2732nm,单股正链RNA，无包膜动物模型：黑猩猩对HAV易感 细胞培养：原代猕猴肝细胞、猴胚肾细胞，一般不产生细胞病变抗原型别

5、单一抵抗力：抵抗力强，对乙醚 、酸、热等较稳定致病性与免疫性传染源：病人传染方式：粪口途径致病机制： 在肝细胞内增殖，不直接造成肝细胞损伤， 免疫病理作用导致肝细胞损伤免疫性： 刺激机体产生抗HAV IgG和IgM 抗HAVIgG对再感染具有免疫力微生物学检查免疫电镜检测病毒颗粒免疫学方法检测病毒抗原检测抗HAVIgM是确诊甲型肝炎的依据 方法：ELISA法和放射免疫测定PCR法：检测病毒核酸检测抗HAVIgG主要用于流行病学调查防治原则特异性预防：接种甲型肝炎病毒减毒活疫苗紧急预防：肌肉注射丙种球蛋白一般性预防：加强饮水和食品的卫生监督管理乙型肝炎病毒是引起乙型肝炎的病原体乙型肝炎易发展为慢

6、性乙肝乙肝病毒在世界范围内传播乙肝病毒携带者达10以上生物学形状形态与结构大球形颗粒:又称Dane颗粒，是完整的HBV小球形颗粒:是病毒组装后过剩的衣壳蛋白管形颗粒：由小球形颗粒串连而成 乙肝病毒的基因短链：为正链，长度是长链的50100长链：为负链，含HBV全部遗传信息 S区：编码HBsAg和前S1抗原和前S2抗原 C区：编码HBcAg和HBeAg P区：编码DNA 多聚酶 X区：编码HBxAg(可能与肝癌发生有关)乙肝病毒的复制方式吸附、穿入肝细胞脱壳转译外衣壳蛋白转译内衣壳蛋白前基因组复制子代核酸组装释放HBV的抗原组成 HBsAg:以三种不同形式存在于患者血清中HBsAg亚型的分布有明

7、显地区差异,并与种族有关血清HBsAg是感染HBV的重要标志HBsAg刺激机体产生的抗-HBs是中和抗体,对机体有保护作用关于前S1和前S2抗原 HBcAg存在于Dane颗粒中不易在血液中检出可在感染的肝细胞表面存在刺激机体产生抗-HBc（IgG、IgM）血清抗-HBcIgM的检出，表明病毒在肝细胞中复制 HBeAg存在于Dane颗粒中游离存在于血液中是病毒复制及强传染性的指标产生抗HBe，是预后良好的征象突变株可不产生HBeAgHBV其他生物学性状培养: 黑猩猩是HBV最敏感的动物模型 细胞培养已获成功抵抗力:强 能耐受低温、紫外线、干燥和一般消毒剂10010分钟、高压蒸汽灭菌、0.5过氧

8、乙酸等能使HBV灭活传染源与传播途径传染源：乙肝病人、无症状病毒携带者传播途径：血液、血制品等途径传播母婴垂直传播临床表现： 无症状携带者 急性乙肝 慢性乙肝暴发性肝炎 肝外表现：发热、皮疹、血管炎等致病机制细胞免疫介导的免疫损伤免疫复合物性的免疫损伤：肝外损伤自身免疫反应的免疫损伤病毒变异：逃逸免疫免疫性抗-HBs：一般于感染后45月阳转，持续6个月或数年，是保护性抗体抗-HBc：一般于感染后35周阳转，无保护作用，IgM可作为急性一干的诊断指标，IgG是HBV既往感染的指标抗-HBe：一般在HBeAg消失时出现，是病情开始恢复的征兆HBV诱导免疫应答对机体的双重作用免疫保护作用 抗HBS和

9、抗前S对病毒的中和作用 CTL对细胞内病毒的清除作用免疫损伤作用 肝细胞损伤 肝外损伤机体免疫状态与HBV感染的转归免疫功能正常隐性感染或急性乙肝，病毒被清除免疫低下慢性乙肝免疫过强暴发性肝炎免疫耐受HBV无症状携带HBV与原发性肝癌流行病学方面动物模型病毒分子结构微生物学检查HBV抗原抗体系统的检测HBV五项指标 HBsAg、抗HBs HBeAg、抗HBe 抗HBcHBV抗原抗体检测的应用乙型肝炎的诊断判断传染性判断预后筛选献血员检测疫苗接种效果流行病学调查HBV抗原抗体检测结果的临床分析HBsAgHBeAg抗-HBs抗-HBe抗-HBc结果分析 HB V感染或无症状携带 急慢性乙肝或无症状

10、携带 急慢性乙肝（大三阳） 趋于恢复（小三阳） 既往感染恢复期 既往感染或接种过疫苗防治原则控制传染源，切断传播途径人工自动免疫： 疫苗（血源性、基因工程)人工被动免疫： 高效价人血清球蛋白（HBIg）丙型肝炎病毒（HCV）球形，有包膜，属RNA病毒传染源：病人、病毒携带者传播途径：输血、注射、性接触等引起丙型肝炎比乙型肝炎更易转为慢性病后免疫力不牢固ELISA法检测抗HCV抗体丁型肝炎病毒（HDV）属缺陷病毒，由HBsAg构成其外壳经输血等途径传播只感染HBsAg阳性的人与HBV协同或同时感染戊型肝炎病毒（HEV）球形，无包膜，属RNA病毒传染源：病人传播途径：粪口途径病情较重，孕妇感染死亡率高乙肝病毒感染经过与免疫反应关系（隐性感染）HBsAg抗HBs抗HBc(IgG)抗HBeHBeAg0 3月 5月 8月 1年 5年乙肝病毒感染经过与免疫反应关系（慢性持续性肝炎）HBsAg抗HBc(IgG)抗HBe0 3月 1年 10年 20年 30年HBe