反相高效液相色谱法测定百合中两种酚酸甘油苷的含量

1、反相高效液相色谱法测定百合中两种酚酸甘油苷的含量【关键词】百合；,酚酸甘油苷；,Regalside,；,Regalside,A；,反相高效液相色谱法摘要：目的测定百合中酚酸甘油苷Regalside及RegalsideA的含量。方法色谱柱为Alltia18(4.6250,5)，以甲醇-水2773作为流动相，流速1.0lin1，检测波长325n。结果百合鲜品中Regalside和RegalsideA平均回收率分别为99.8和97.4，其RSD分别为0.67和1.36；干品中Regalside和RegalsideA平均回收率分别为100.6和102.5，其RSD分别为1.37和1.16。结论该方法快

2、速,重现性和稳定性好,可用于百合中该物质的含量测定。关键词：百合；酚酸甘油苷；Regalside；RegalsideA；反相高效液相色谱法DeterinatinfTPhenliGlysidesinLilybyRP-HPLAbstrat：bjetiveTdeterinetphenliglysides,regalsideandregalsideAinlily.ethdsTheseparatinasperfrednaAlltia18lun(4.6250,5).eHH2(2773)asusedasbilephase.Theflrateas1.0lin1.Thedetetinavelengthasat3

3、25n.ResultsInfreshlily,theaveragereveriesfregalsideandregalsideAere99.8,97.4,RSDere0.67,1.36,respetively.Indriedlily,theaveragereveriesfregalsideandregalsideAere100.6,97.4,RSDere1.37,1.16,respetively.nlusinThisethdisaurate,rapidandreprduible,anbeusedtdeterinethephenliglysidesinlily.Keyrds：Lily;Phenl

4、iglysides;Regalside；RegalsideA；RPHPL百合为常用药食两用植物，?中国药典?2022年版收载的来源为百合科植物卷丹LiliulanifliuThunb.、百合LiliubrniiF.E.Brnvar.viriduluBaker或细叶百合LiliupuiluD.的枯燥肉质鳞叶1，卷丹主产于江苏宜兴。近年来国内外在百合化学成分、药理作用、临床应用方面进展了大量的研究2,3，但对于其成分含量测定以及质量控制的报道却很少46，有关酚酸甘油苷的含量测定未见报道。本文建立了卷丹中酚酸甘油苷Regalside和RegalsideA的高效液相色谱含量测定方法，以期为控制百合的质

5、量提供科学根据。1器材1.1仪器aters2695高效液相色谱系统，996光电二极管阵列检测器。Eper色谱数据工作站；ettler百万分之一天平；illipre纯水器。1.2试药对照品Regalside和RegalsideA为自制，构造经S，1H-NR，13NR确证，纯度经HPL分析98%。甲醇为色谱纯，水为纯洁水。1.3药材实验样品采自江苏宜兴，经段金廒教授鉴定为百合科植物卷丹LiliulanifliuThunb.。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱Alltia184.6250,5；流动相为水甲醇7327。流速1.0lin-1，检测波长325n，柱温30，进样量10l。在此条件下：样品中Re

6、galside和RegalsideA与其他成分到达基线别离，理论塔板数Regalside为5982.078，RegalsideA为8606.925。别离效果见图12。1Regalside2RegalsideA图1对照品a和百合样品b的HPL色谱图略1.标准品2.样品图2Regalside和RegalsideA光谱图略根据DAD检测器的的特点，我们比拟了对照品和样品中Regalside和RegalsideA的光谱曲线，从图中可以看出，两条光谱图曲线完全吻合，说明在该色谱条件下别离效果好，无杂质干扰。转贴于论文联盟.ll.2.2线性关系考察取对照品Regalside2.338g和Regalside

7、A6.174g，精细称定,分别置25l量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得Regalside0.0935gl1，RegalsideA0.2469gL1的储藏溶液。分别精细汲取两种对照品储藏溶液1，5，10，15，20，25l，分别进样，以进样量X为横坐标，对照品Regalside和RegalsideA峰面积积分值Y为纵坐标进展回归，Regalside在0.102.62g范围内线性良好，Y2.12106X1.95104(r=0.999961)；RegalsideA在0.317.86g范围内线性良好，Y=1.65106X-5.59104(r=0.999998)。2.3精细度实验分别汲取0.0

8、935gL1的Regalside和0.2469gL1的RegalsideA储藏溶液,重复进样5次，进样10l/次，测定Regalside和RegalsideA峰面积，RSD分别为0.352%，0.359%。2.4供试品制备取粉碎后的百合鲜品(洗净，晾干)约20g，干品约3g鲜品105蒸气加热6in，55烘干，精细称定，置于圆底烧瓶中，加40%甲醇于80水浴上热回流提取2次，提取时间为1h/次。滤过，合并滤液，减压回收溶剂,残渣加甲醇溶解并转移至10l量瓶中，甲醇定容至刻度，0.45微孔滤膜滤过，即得。2.5重复性实验取同一批次药材样品，按2.3项下方法制备5份,测定Regalside和Rega

9、lsideA含量，RSD分别为0.8%，0.5%。2.6稳定性实验取同一供试品溶液,按2.1项下色谱条件,在0，1，2，4，8和10h分别测定Regalside及RegalsideA的含量，RSD分别为0.3%,0.8%。说明供试液在10h内稳定。2.7加样回收率实验精细称取含量的百合药材鲜品10g，干品1.5g各6份，分别精细参加对照品溶液，按2.3项下制备，测定含量并计算，结果Regalside和RegalsideA平均回收率分别为100.6和102.5，RSD分别为1.37和1.16。结果见表12。2.8样品含量测定取不同批次百合样品按2.3下方法进展提取，测定含量。结果见表3。从表3结

10、果可以看出不同批次样品中Regalside的含量波动较大，RegalsideA的含量波动较校3讨论3.1本实验曾选用甲醇-水(6040)，甲醇-水(4060)，甲醇水(3070)等水递增的比例，都没有得到满意的结果，最后采用方法中的比例使Regalside和RegalsideA得到了很好的基线别离,并且样品中其他成分也具有很好的别离度,同时该方法缩短了分析时间。表1百合鲜品加样回收率实验结果略表2百合干品加样回收率实验结果略表3不同批次百合中两种酚酸甘油苷的含量略3.2实验中选择比拟了甲醇、95%甲醇、75%甲醇、60%甲醇、40%甲醇和15%甲醇6种提取溶剂，并考察了使用不同提取方法回流、超声、浸置、改变时间和溶剂体积等，实验结果说明以40%甲醇80水浴热回流提取2次，提取溶剂150l/次，回流时间为1h的提取方法，提取效果最好。参考文献：1国家药典委员会.中国药典，部2000年版S.北京：化学工业出版社，2022:88.2郭朝晖，蒋生祥.中药百合的研究和应用J.中医药学报，2022，323：12.3曲伟红，周日宝，童巧珍，等.百合的化学成分研究概况J.湖南中医药导报，2022，103：