金边瑞香活性成分瑞香黄烷Ⅰ瑞香素对SMMC7721和 MCF7细胞作

1、金边瑞香活性成分瑞香黄烷-，瑞香素对SMMC-7721和 MCF-7细胞作【摘要】目的研究金边瑞香活性成分瑞香黄烷-(E002)、瑞香素(E003)抗肿瘤活性，为进一步研究抗肿瘤机制提供根据。方法用噻唑蓝(TT)法检测不同浓度E002、E003对S-7721和F-7细胞的抑制率。结果E002、E003浓度为2501.95g/l时,作用S-7721细胞，两者的抑制率为：(86.92.2)%(50.80.6)%。E002浓度为25062.5g/l时,作用F-7细胞，其抑制率为：(72.32.1)%(52.481.65)%。E002对S-7721和F-7细胞的I50值分别为：(1.960.03)和(

2、22.893.04)g/l;E003对S-7721细胞的I50值为：(1.230.11)g/l。结论金边瑞香活性成分瑞香黄烷-对S-7721、F-7细胞,瑞香素对S-7721细胞的增殖均有显著抑制作用，且呈现良好的剂量依赖性。【关键词】金边瑞香;抗肿瘤;噻唑蓝法Abstrat：bjetiveTstudytheantiturativityfDaphnedrvar.arginataextrats-E002(daphndrinI)andE003(daphnetin)invitr.ethdsF-7andS-7721ellseretreatedrespetivelyithE002andE003atdif

3、ferentnentratins,thegrthinhibitryeffetsfE002,E003ereassessedusingtheTTassay.Results(1)Bthinhibitinrate(%)erefr86.92.2t50.80.6,henS-7721ellseretreatedithE002,E003inthenentratinrangef2501.95(g/l).(2)Inhibitinrate(%)erefr72.32.1t52.481.65,henF-7ellseretreatedithE002inthenentratinrangef25062.5(g/l).(3)I

4、50valueE002nS-7721andF-7ells(g/l)ere1.960.03and22.893.04;I50valueE003nS-7721ells(g/l)as:1.230.11.nlusinDaphndrinIhassignifiantinhibitryeffetnF-7andS-7721ellsinadse-dependentinvitr.DaphnetinhassignifiantinhibitryeffetnS-7721ellinadse-dependentinvitr.Keyrds：Daphnedrvar.arginata;Antitur;TTassay金边瑞香(Dap

5、hnedravar.arginata)，又名睡香，具有抗炎、抑菌、镇痛、调节免疫、抗缺氧、抗脂质过氧化延缓衰老等药理活性17，其主要活性成分为双黄酮类和香豆素类化合物8。本研究中所用瑞香黄烷-(E002)、瑞香素(E003)系从金边瑞香中提取的两种单体化合物，前者为双黄酮类化合物，后者为香豆素类化合物。本研究观察了E002、E003对两种人实体瘤细胞人肝癌S-7721细胞及人乳腺癌F-7细胞的增殖抑制作用，为进一步研究抗肿瘤机制提供根据。1材料1.1药物药物E002(瑞香黄烷，daphndrinI，纯度99.7%)和E003(瑞香素，daphnetin，纯度99.6%)均为由南昌大学分析化学系

6、采用高速逆流色谱技术从金边瑞香中进展别离纯化并提供的单体化合物(分子构造见图1)。其中瑞香黄烷是首次从该种植物中别离得到。药物浓度均为1g/l，临用前用1640培养液行12个梯度倍比稀释，使终浓度为250，125，62.5，31.25，15.62，7.81，3.90，1.95，0.97，0.48，0.24，0.12g/l。图1E002、E003分子构造1.2细胞F-7细胞株购自南京凯基生物公司，S-7721细胞株由江西省医学科学研究所提供，采用常规培养,培养液为含10%小牛血清的RPI1640，在37,5%2饱和湿度的孵箱中培养,细胞处于对数生长期时用于实验。2方法2.1细胞培养将细胞复苏后，

7、接种于已加有67l含1640完全培养液的细胞培养瓶中，置于37，5%2的培养箱中培养，每两天换液一次，当细胞生长至密度70%80%时，用0.25%胰蛋白酶消化传代。待细胞养至第3代后，消化细胞调整到所需浓度备用。2.2抑瘤实验采用TT比色法，取1.0105/l的对数生长期细胞，以每孔100l接种于96孔培养板中。12h后，于各实验孔中参加不同浓度相应药物100l/孔，每个浓度设3个平行孔;同时设阳性对照孔(参加12.5g/l阿霉素)、细胞对照孔、溶剂对照孔和空白对照孔。培养至44h时，每孔参加5g/l的TT20l。继续培养4h后，弃去全部上清，每孔参加150l二甲基亚枫(DS)，振荡后，在酶标

8、仪492n波长处测D值，实验重复两次。然后计算细胞生长抑制率：抑制率(%)=(1-加药孔平均D值/对照孔平均D值)100%;然后计算出半数抑制浓度(I50)。2.3统计学方法采用SPSS13.0统计软件，进展统计学分析。转贴于论文联盟.ll.3结果E002、E003为250，125，62.5，31.25，15.62，7.81，3.90，1.95g/l浓度时，作用于S-7721细胞，前者的抑制率(%)为：85.133.72，83.060.56，80.881.67，74.231.12，67.630.90，62.581.09，56.151.68，50.80.63;后者的抑制率(%)为：86.92.2

9、3，83.42.47，80.352.22，78.010.41，74.533.46，69.052.83，60.012.68，51.461.63。见图2A。取E002为：250，125，62.5g/l浓度时，作用于F-7细胞，其抑制率(%)为：72.32.10，54.312.43，52.481.65。(见图2B);E003对F-7细胞增殖抑制作用不明显。E002作用于S-7721和F-7细胞的I50值(g/l)分别为：1.960.03和22.893.04;E003作用于S-7721细胞的I50值(g/l)为：1.230.11。4讨论瑞香素(Daphnetin)系香豆素类化合物，具有强心、抗血栓形成

10、、镇痛、抗炎、镇静催眠、抗疟疾、杀蚜虫及抗菌等多种作用。瑞香黄烷系双黄酮类化合物。已有研究说明：双黄酮类化合物和香豆素类化合物均具有良好的抗肿瘤活性9，10。但关于瑞香黄烷-和瑞香素的抗肿瘤活性却鲜有报道。本实验采用TT法，用从我省盛产植物金边瑞香中提取的瑞香黄烷和瑞香素作用于人的两种实体瘤细胞人肝癌S-7721细胞及人乳腺癌F-7细胞，观察其是否具有抗肿瘤作用。结果说明瑞香黄烷-对S-7721、F-7细胞,瑞香素对S-7721细胞的增殖均有显著抑制作用，且呈现良好的剂量依赖性;瑞香素对F-7细胞抑制作用不明显。提示瑞香黄烷和瑞香素均具有一定的体外抗肿瘤活性，其详细抗瘤机制还有待进一步深化研究

11、，而其抗肿瘤作用是否具有实用价值，还需动物试验进一步证实。【参考文献】1叶和杨，曾靖，杨敬格，等.金边瑞香的抗炎症作用J.赣南医学院学报，2002，22(1)：7.2徐静，傅颖媛.金边瑞香对小鼠免疫细胞的影响J.广东医学，2022，26(9)：1207.3叶和杨，曾靖，胡晓，等.金边瑞香的耐缺氧作用J.赣南医学院学报，2002，22(4)：329.4叶和杨，汪秀荣，胡志萍，等.金边瑞香对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用J.赣南医学院学报，2022，25(5)：579.5叶和杨，熊小琴，王中平，等.金边瑞香提取液镇痛作用的实验研究J.赣南医学院学报，2022，24(5)：505.6叶和杨，周俐，曾靖，等.金边瑞香对小鼠SD活性及DA含量的影响J.赣南医学院学报，2022，23(3)：246.7陈水亲，徐静，黄彬红，等.植物药金边瑞香对小鼠肠道Peyers法