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文档简介
1、公猪采精 公猪采精与稀释操作规程1、采精与精液处理流程(1)采精过程流程1、 进入试验室后清洁双手(讲究卫生,掌握温度)2、 预备稀释液,并将稀释液放入 35水浴锅中升温3、 打开显微镜上的加热板掌握开关,设定温度到 384、 安装集精杯(预热到37),预备其它采精用品,放入壁厨5、 将公猪赶入采精室,关上栅栏,清洁其体表 6、排出包皮液用 0.1 KMnO4溶液清洗其腹部及包皮, 再用清水洗净, 抹干;7、 戴上双层手套,诱导公猪爬跨假母猪 8、 锁定并拉出阴茎 9、 待排出部分清亮液体后,开头收集精液 10、将集精杯放入壁厨 11、将公猪赶回圈内(2)精液处理操作流程1将一预温后的烧杯或塑
2、料杯放在电子秤上,打开电子秤,当显示为零时,将装精液的食品袋从集精杯中取出放入杯中,显示读数为精液的重量;2将放精液的烧杯轻轻摇匀精液后,放入35的水浴锅中与稀释液等温;3立刻用取样器取精液 1025 微升左右,滴在载物台上预热的载玻片上,盖上盖玻片,估测活力;精子活力大于0.6 ,就可用于下一步的处理;4另取 1 毫升精液放入加有 10 毫升生理盐水的精子密度杯中, 读出读数后,在查对表上查到精子密度值;5运算精液可分装的份数和最终的精液体积或重量;6将大烧杯放在电子秤上,除皮,然后再将精液袋放入其中,并将精液袋上口翻在杯沿外, 将装稀释液的三角瓶从水浴锅中取出,擦去底部水分, 将稀释液加入
3、大烧杯中, 直到达到运算的最终重量, 轻轻摇动或用玻璃棒搅拌精液使其 混合;7、精液稀释后,检查精液活力,如无明显下降,开头分装;8将精液按规定重量分装于各个精液瓶(袋)中,排出空气后封口,进行 精液标记, 置 22-25 的室温 1 小时后 或用几层毛巾包被好后 ,降温到 20左右时直接放置 17冰箱中;9清洗各种容器并放于消毒柜中干燥消毒;1 公猪采精 2、稀释液的配制过程2.1 配制过程以 1000 毫升 BTS稀释液为例,可用任一方法:经过清洗干燥消毒的三角瓶,将一袋BTS稀释粉( 50 克)全部加入瓶中,用量筒量取 双蒸馏水 1000 毫升,加入三角瓶中;盖上盖子或用稀释粉袋套在三
4、角瓶口上, 封紧摇动,使稀释粉完全溶解; 或放在磁力搅拌器上, 搅拌加速溶解;取下盖子,放入 35的水浴锅中预温;稀释液用过后,三角瓶应用蒸馏水冲洗,空干水分,然后将三角瓶、量筒 用牛皮纸封口,放入 80120的消毒柜或干燥箱中烘干;将两个食品袋相套放入大烧杯中或塑料杯中,放在电子秤上,打开电子秤 开关,当电子秤上读数为零时,将连接蒸馏水容器的硅胶管放出少量水后,将管口对准杯口注水,并留意读 数变化,当接近 1000 克时,应放慢流速,改为滴注,直到 1000 克;之后,应将 蒸馏水管的龙头套好,防止污染;在大烧杯中加入一袋稀释粉(50 克);从盛磁珠的小烧杯中取镊子并夹取磁珠, 在废液缸上用
5、洗瓶冲洗磁珠 2-3 次,待磁珠上水分滴净后,放入烧杯中,然后将烧杯放在磁力搅拌器上,打开电 源开关和加热开关,调整磁珠转速旋扭, 使磁珠以适当速度旋转 (水体形成涡流),使稀释粉全部溶解后,降低磁珠转速,关闭加热和电源开关;将杯子放入 35的水浴中预温;注:不能控温的加热磁力搅拌器使用时间不行超过 热电源;平常磁珠放在一个清洗干燥过的小烧杯中,10 分钟,或及早关闭加 注入新奇蒸馏水半杯, 镊子为不锈钢材料, 也经清洗干燥放入杯中, 盖上洁净的培育皿, 每 3 周应换掉陈水,冲净换上新的蒸馏水; 稀释液加入精液中后, 应用小烧杯中的镊子将磁珠从大烧杯中夹出, 并在废液缸上冲洗磁珠和镊子前端
6、同镊子放入小烧杯中,盖上培育皿;3-4 遍,待磁珠上水分滴净后, 连2 公猪采精这种方法由于稀释液是在一次性食品袋中配制的,因此,不需要对配制稀释 液的容器进行清洗和消毒,实现了稀释液配制的免消毒;冬季稀释粉溶解较慢,可将稀释粉与水混合后,放入水浴锅中预温 10 分钟,再摇匀,可加速稀释粉溶解;使用加热磁力搅拌器者不必在水浴锅中预温;注:除大规模人工授精站外,一般不主见自己配制稀释粉,举荐使用商业化 稀释粉,这些产品质量稳固牢靠; 另外,稀释粉与蒸馏水按什么比例混合是非常 严格的,应依据说明书上的配比进行稀释粉的溶解,不行转变配比;2.2 PH 值与渗透压用 1N稀盐酸或 1N氢氧化钠调整 B
7、TS稀释液的 PH值为 7.26.8-7.4 左右, 渗透压为 330mOsm 2.3 稀释液的储存液态状稀释液冰箱4储存,不超过24 小时,超过有效贮存期的变质稀释液应废弃;3、采精前的预备1. 集精杯的预备应在试验室中进行;用保温杯作集精杯时,不能直接将精液采入杯中;将两层食品袋装入保温杯内,并用洁净的玻璃棒使其贴靠在保温杯壁上,用过滤网, 用橡皮筋固定, 并使过滤网中部下陷袋口翻向保温杯外, 上盖一层专 3 厘米,以防止公猪射精过快或精液过滤慢时,精液外溢;安装好后,将其放恒温箱在 37温度下备用;假如是纸杯作集精杯,在杯口上固定上一次性过滤网,并使网面下陷 23厘米,假如没有恒温箱,可
8、在安装集精杯之前,用电吹风机将集精杯内壁加热到温热状态(不行加热到烫手);采精前应将集精杯、 消毒纸巾、一次性手套放入壁厨中, 以便利采精时取用;2精液品质检查用品预备最好先将显微镜调好备用,把显微镜加热板放在显微镜载物台上, 用标本夹固定好, 打开电热板掌握器电源开关,把设定温度3 公猪采精调到 38再打到测温状态,预备好两张洁净的载玻片和两张洁将的盖玻片放在加热板上预温;将电子秤、密度测定等用品预备好;3公猪的预备采精员将待采精的公猪赶至采精栏,关上采精区的栅栏门,并用毛刷刷拭假母猪的台面和后躯下; 然后再清扫公猪两侧肋腹部及下腹部,必要时, 可将公猪的阴毛剪短(留 3 厘米);4采精员的
9、预备采精员应穿上工作服,将公猪赶入采精室后,清扫猪体后, 应尽快右手戴上双层无毒的一次性手套,带上纸巾、集精杯、小凳预备采精;4、采精技术一、采精的目标与要求1用最简洁的方法采集到全部含较多精子的精液 公猪性反射和射精特点与牛羊不同,其龟头对压力、约束力较为敏锐,而对 温度相对不敏锐, 因此公猪采纳假阴道法采精成效往往不佳,而且猪射精时是分 段射精的, 一般不能收集最初射出的精液和清亮无精子的精液,因此,公猪适合 用拳握法进行采精;这种方法既简洁,又便于分段收集精液;2采集到的精液最大限度地不受到任何污染 由于采精过程中,射精、收集精都是在开放的环境中,精液极易受到污染;采精用的手套、集精杯、
10、过滤网等与精液接触的物品必需无菌和对精子无毒害,肯定要防止公猪体表及阴毛上的污物、尘进入精液中;包皮液、 尿生殖道中的尿液、 空气中的灰3尽可能使精液不受到外界温度的影响 公猪的精液对温度非常敏锐,特别是低温;因此,采精室的温度能够掌握,不应低于 10,最好在 15-25之间, 这不仅有利于公猪的性行为正常,而且能 防止外界温度对精液温度的影响;二、采精过程1、 诱导公猪爬跨假母猪 诱导公猪爬跨;采精员可摩仿发情母猪的叫声,并敲击假母猪2、在采精之前先剪去公猪包皮上的被毛,防止干扰采精及细菌污染4 公猪采精 2、排出包皮液 用 0.1 KMnO4溶液清洗其腹部及包皮,再用清水洗净,抹 干;公猪
11、爬跨上假母猪后, 采精员可坐公猪左后侧的小凳上,用右手按摩公猪包 皮腔,尽可能将包皮腔中的包皮液(尿液)排净,并用纸巾拭干;3、锁定公猪阴茎并将其拉出公猪阴茎勃起后, 开头有试图插入母猪阴道的动作,但有些公猪伸出阴茎较慢, 需要按摩包皮以帮忙阴茎伸出;公猪阴茎伸 出后,采精员应脱去外层手套,右手呈锥形的空拳,即拇指一侧较松,小指一侧 较紧,拳心向上,使龟头(螺旋部分)进入空拳中,只让公猪的龟头伸出空拳 1 厘米左右,或不让其伸出拳外,用中指、无名指和小指锁定龟头,留意不要抓握 阴茎体部(非螺放部分),以防造成公猪不适而从假母猪上退下,然后顺其向前 S” 状弯曲尽可能地拉直,握紧阴茎龟头防止其旋
12、转,公猪即 冲力,将阴茎的“可寂静下来并开头射精; 假如假母猪的结构合理, 可将其阴茎向左前上拉, 并使 龟头向下弯 (见图) ,这样有利于防止包皮腔中的残存包皮液顺着阴茎流至集精 杯;“挤出包皮积尿,按摩公猪的包皮部,待公猪爬上假台猪后,用暖和清洁的手 有无 握紧伸出的龟头,顺公猪前冲时将阴茎的 S 状弯曲拉直,握紧阴茎螺旋 手套皆可 部的第一和其次摺,在公猪前冲时答应阴茎自然舒展,不必强拉;充分舒展后,阴 茎将停止推动,达到强直、“ 锁定” 状态,开头射精;射精过程中不要松手,否就 压力减轻将导致射精中断;”4、左手打开集精杯盖,取下上面的纸巾;5、 精液收集公猪开头射精后,不要立刻收集,
13、待公猪射出部分精亮的液体后,再开头收集含精多的部分,假如手中的胶状物较多, 可隔着纸巾将胶状物擦除;6、 在精液收集过程中,应尽可能依据公猪的射精特点,只收集含精丰富的部分,不要收集清亮的液体和胶状物;茎将快速缩回;留意在采精过程中不要碰阴茎体,否就阴7、 采精过程中,假如仍有包皮中的尿液顺阴茎流出,可先将龟头抬高,然后在射精间隙或只射出清亮液体时,入集精杯中;放下集精杯, 左手拿纸巾将其吸附, 防止流8、 当公猪开头环顾四周时,说明公猪射精即将终止;可略松开龟头,以观 察公猪反应,假如阴茎又开头转动,说明射精没有终止,应立刻锁定龟头;假如 阴茎软缩,说明射精终止,可终止采精;8采精后,当心地
14、将集精杯上的过滤网去掉,防止其掉入集精杯中,将集精杯中食品袋束口, 将袋口上部放在集精杯沿上,盖上集精杯盖, 然后应看着公猪爬下假母猪;将精液放入采精室与试验室之间的壁厨内,然后将公猪赶回圈内;5、精液的稀释1精液稀释的目的5 公猪采精新采集的动物精液精子浓度高,而且温度较高,精子的代谢强度大,很快就 产生大量的代谢产物, 并使其自身的生命耗尽; 即使很短的时间内, 都可能因精 子的代谢产物对精子产生毒害, 而使精子储存时间缩短; 而用合理的稀释液稀释 精液,就可给精子供应养分,中和代谢产物,并且答应精液降温,从而大大延长 精子的存活时间,并能保持精子的受精才能;所以,对人工授精来说,猪精液尽
15、快进行稀释非常重要, 这也是为什么要将试验室建在采精室的隔壁的缘由;另外,原精液的精子浓度大, 而一次输精的总精子数仅几十个亿,只相当于几毫升到十 几毫升的原精, 而母猪受精时需要的总精液量又不能低于 100 毫升,这也是必需 稀释的另一个缘由;因此,精液稀释的目的是:(1)增加精液容量,以确保每头母猪输精的总精液量;(2)有利于精子的体外存活和受精才能的保持;猪精液的稀释液配方有许多种,如在常温下可储存 Kiev 、Modena等,储存 57 天的长效储存稀释液有 液;最常用的稀释液为 BTS稀释液;2每份精液的总精子数35 天的配方有 BTS,ZorPVA;也有冷冻精液稀释目前仍没有一个每头份精液的最低精子数标准和体积标准,但一般认为一次输入 15 亿以上个精子, 对受胎率和产仔数是牢靠的; 但也没有必要超过 60 亿个精子;在实际生产中,建议刚刚开展人工授精的猪场,每份精液应有 5060 亿个精子; 假如人工授精人员技术已经娴熟,可将每份精液总精子数降到 40
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