HPLC法测定不同产地灯盏细辛中灯盏乙素的含量

1、HPLC法测定差异产地灯盏细辛中灯盏乙素的含量刘鹏，周军，秦向阳，王巧峰，李晓晔【关键词】,灯盏乙素DeterinatinfsutellarininErigernbrevisapusfrdifferentplaesbyHPL【Keyrds】sutellarin;HPL;Erigernbrevisapus【摘要】目的：创立测定差异产地灯盏细辛中灯盏乙素含量的要领.要领：接纳高效液相色谱法，以ZDBAX18(4.6150，5)为色谱柱，活动相为甲醇-0.02l/L，磷酸缓冲液pH为5.23565，检测波长为335n，流速0.8L/in，柱温25，以外标法测定灯盏细辛中灯盏乙素含量.结果：灯盏乙素在

2、0.743.70g范畴内与峰面积呈精良线性干系，r=0.9996，灯盏乙素均匀加样接纳率为97.24，RSD为0.82n=6.结论：本要领可靠性高，正确性和重现性好，实用于灯盏细辛中灯盏乙素的含量测定.【关键词】灯盏乙素；高效液相色谱法；灯盏细辛0弁言灯盏细辛为菊科植物短葶飞蓬Erigernbrevisapus(Vant.)Hard.azz的枯燥全草.重要漫衍于我国云南、贵州、广西、四川等地，是一种民间常用中药.该药具有散寒解表、祛风除湿、活血化瘀、通经活络等成果.临床重要用于治疗缺血性脑血管疾并冠心并心绞痛等症，其疗效较好，毒副作用小，运用范畴广1.灯盏细辛重要有用身分为黄酮类化合物灯盏乙素

3、2-3，由于差异产地的灯盏花药材主身分含量差异较大，为了操纵药材质量，本研究参考文献4,5的要领，创立了以灯盏花有用部位为底子的高效液相色谱指纹图定性定量阐发要领，确定了操纵灯盏花药材质量的指纹峰，为快速轻便地断定差异泉源的灯盏花药材质量提供了参考尺度，并为扩大灯盏细辛资源的应用提供可靠的科学根据.1质料和要领1.1质料Agilent1100高效液相色谱仪：Agilent1100系列四元梯度泵、Agilent1100系列UAD检测器、Agilent1100化学事情站美国Agilent公司；BAKANDU640紫外分光光度计；SK250LH型超声波洗濯器上海科导超声仪器.灯盏乙素比较品中国药品生

4、物品检定所，批号0842200102，纯度98.0；灯盏细辛样品泉源于云南、贵州、广西和四川等地，并经第四军医大学药物研究所王四旺主任药师断定；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为阐发纯.1.2要领2结果2.1线性干系线性干系的观察中测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，进样量g为横坐标，绘制尺度曲线，回归方程Y=-27.343876.04X，r=0.9996(n=6).结果表白灯盏乙素在0.743.70g范畴里呈精良线性干系.2.2灯盏乙素不变性不变性试验中，6次所测灯盏乙素峰面积RSD为1.03，灯盏乙素在活动相溶液中48h内不变.细密度试验中，6次丈量峰面积的细密度RSD为0.98.重现

5、性试验中，测得灯盏乙素的RSD为0.94n=6，表白此法重现性精良.加样接纳率试验中，测定的均匀加样接纳率为97.24，RSD为0.82n=6表1.表1加样接纳率试验结果略表2样品测定结果略A:灯盏乙素比较品;B:灯盏细辛生药样品.图1灯盏乙素比较品与灯盏细辛生药样品色谱图略3讨论3.1活动相选择文献4,5接纳磷酸盐缓冲液、甲醇水磷酸为活动相，其题目是灯盏乙素主峰与其他峰分散度欠好，达不到有用分散.我们革新活动性配比，选择甲醇0.02l/L磷酸缓冲液pH为5.23565为活动相，此活动相能去除滋扰，相宜灯盏乙素主峰与其他峰显着分散.3.2测定波长选定通过对灯盏乙素比较品在波长200700n之间

6、举行紫外汲取扫描，表白灯盏乙素在215n，284n，335n波优点有最大汲取，此中在335n处有最大值，应选择335n为灯盏乙素检测波长.3.3提取条件选择我们参考文献4报道的提取条件，观察了提取溶剂浓度对灯盏乙素含量的影响，别离用600，700，800和900L/L的乙醇溶液举行提取试验，结果表白，700L/L的乙醇溶液提取率最高，故接纳700L/L乙醇为提取液，加热回流提取2次，每次2h，得到满足提取结果.总之，本研究革新的要领操纵轻便、快速、敏捷、正确，经对差异产地的灯盏细辛中灯盏乙素含量测定，能到达有用分散各组分的目的，表白此法可作为灯盏乙素的定量测定要领，为灯盏乙素的质量操纵奠基了底子；同时表白差异地区的灯盏细辛中灯盏乙素含量有显着差异，说明生态情况、采收时间和储存条件等大概对灯盏乙素的含量产生影响.【参考文献】1宋立人，洪恂，丁绪亮，等.当代中药学大辞典.北京:人民卫生出书社，2001:885-887.2张卫东，陈万生，孔德生，等.中药灯盏细辛化学身分的研究J.第二军医大学学报,2000,21(2):143-145.3郭济贤，潘伟坚，杨瑞萍，等.中药灯盏花及其同属部门植物的研究外表J.中成药研究,1987,9(8):30-31.4李延钊，刘