体外诊断试剂临床试验※仁济-糖化白蛋白检测试剂盒（酶法）-临床试验报告

1、糖化白蛋白检测试剂盒（酶法）临床试验报告申办者：XX医疗科技（中国）有限公司临床试验报告产品通用名称：糖化白蛋白检测试剂盒（酶法）试验开始日期：2016年4月试验完成日期：2016年5月研究单位：上海交通大学医学院附属仁济医院主要研究者：（签名）试验机构：上海交通大学医学院附属仁济医院（盖章）统计单位：上海交通大学医学院附属仁济医院（盖章）统计学负责人：（签名）申办单位：XX医疗科技（中国）有限公司（盖章）申办单位的联系人及联系方式：报告日期：2016年5月原始资料保存地点：上海交通大学医学院附属仁济医院目录 TOC o 1-1 h z u HYPERLINK l _Toc451957129

2、临床试验报告 PAGEREF _Toc451957129 h 1 HYPERLINK l _Toc451957130 研究报告摘要 PAGEREF _Toc451957130 h 3 HYPERLINK l _Toc451957132 一、临床试验背景 PAGEREF _Toc451957132 h 5 HYPERLINK l _Toc451957133 二、产品的检测原理及方法 PAGEREF _Toc451957133 h 5 HYPERLINK l _Toc451957134 三、产品的预期用途 PAGEREF _Toc451957134 h 6 HYPERLINK l _Toc4519

3、57135 四、临床试验目的和内容 PAGEREF _Toc451957135 h 7 HYPERLINK l _Toc451957136 五、试验总体说明 PAGEREF _Toc451957136 h 7 HYPERLINK l _Toc451957137 六临床试验结果及统计 PAGEREF _Toc451957137 h 10 HYPERLINK l _Toc451957138 七. 结论 PAGEREF _Toc451957138 h 13 HYPERLINK l _Toc451957139 附件一：样本信息记录表 PAGEREF _Toc451957139 h 14 HYPERLI

4、NK l _Toc451957140 附件二：试验数据记录表 PAGEREF _Toc451957140 h 14 HYPERLINK l _Toc451957141 附件三：相关试剂盒使用说明书及信息 PAGEREF _Toc451957141 h 14 HYPERLINK l _Toc451957142 附件四：临床试验主要研究人员的简历信息 PAGEREF _Toc451957142 h 14研究报告摘要研究单位：上海交通大学医学院附属仁济医院产品名称：糖化白蛋白检测试剂盒（酶法）临床试验类别：体外诊断试剂注册申请的临床验证主要研究者：李敏研究目的：验证考核试剂同参比试剂对于临床样本的检

5、测一致性样本数量：105例（考核试剂与参比试剂相关性）51例（血清血浆相关性）共计156例入选标准：样本性别不限，年龄不限，随机入组；医院已经检测结束的正常及异常水平的该项目样本或相关项目样本，并有确切临床诊断信息；正常没有相关疾病的人群的样本。排除标准：严重溶血、脂血、黄疸患者的样本；经过多次反复冻融的（3次以上）样本；样本信息不全或样本量不足以完成全部试验及存留的样本；临床试验时候认为不能入组的样本，应予以排除。试验后如有样本因不符合要求被剔除，应予以说明；如剔除样本后样本数量不能满足试验要求，应予以补充样本，以达到数量要求。评价指标：双变量相关性大于0.95。两种试剂检测的结果做散点图，

6、分析其线性相关系数，r20.95。试验结果的偏差95%在偏差均值2SD范围内。Bland-Altman偏倚图显示若95%以上的差值在1.96SD范围内，可视为结果具有一致性。分析和结论：分析：上海交通大学医学院附属仁济医院一共入组156例，其中105例样本在日立7600全自动生化分析仪（使用考核试剂以及参比试剂）上测定血清中浓度，在日立7600全自动生化分析仪上测定同一样本中血清与血浆的浓度共51例。其中#215检测血清血浆结果均为负值，考虑为检测仪器误差所致，因此剔除此样本，实际进行统计的样本数为50例。其中实验结果显示考核试剂同参比试剂的检测结果一致性非常好，其定量结果总结如下：血清样本：

7、样本数数量105双变量相关系数（R）0.9884线性相关系数（R2）0.9770线性方程Y=0.9686*X+1.163血清血浆样本：样本数数量50双变量相关系数（R）0.9821线性相关系数（R2）0.9645线性方程Y=0.9210*X+0.982结论：通过本次临床试验的比较分析，考核试剂同参比试剂的检测结果虽然在一定程度上存在着差异，但总体差异不明显，两种试剂的检测结果线性相关性非常好（r=0.9884）。报告日期：2016年5月25日一、临床试验背景糖化白蛋白(GA)是血液中葡萄糖与白蛋白发生非酶糖化反应的早期糖基化产物。因白蛋白在体内的半衰期较短（约17天），且白蛋白与血糖的结合速度

8、比血红蛋白快，所以GA对短期内血糖变化比糖化血红蛋白（HbA1c）敏感，通常认为GA测定可反映患者近期（约2周）的血糖控制情况，目前GA已成为临床上应用较广泛的血糖检测指标。多项研究表明，30天内的血糖水平影响HbA1c水平达50%，而90天120天只影响10%。所以，在血糖检测体系中GA是对HbA1c的有效补充。近年来，GA与HbA1c的关系受到广泛重视，通过研究GA与HbA1c的关系可进一步认识GA的临床意义。动脉粥样硬化是长期慢性炎症性过程，它并非在糖尿病确诊后才启动，在血糖升高但仍未达到糖尿病诊断标准时就已启动，随着血糖的增高而进展加速。既往研究表明，作为糖尿病患者体内主要的早期糖基化

9、产物，GA可通过破坏内皮细胞功能，导致血管壁的氧化应激和炎症反应、刺激平滑肌细胞增殖和迁移等病理过程，加快动脉粥样硬化和糖尿病血管并发症的发生与发展。因此GA在糖尿病动脉粥样硬化病理生理机制中起到重要作用。GA是反映过去2-3周平均血糖水平的一项指标。比血糖检测“金标准”HbA1c的反映周期要短一些。因此，GA在治疗效果的确认以及临床用药量的调整方面比A1c具有优势。另外，在许多血红蛋白代谢异常的情况下，A1c的结果受到影响不能真实反映患者的血糖水平，而GA的结果则不受影响，如糖尿病肾病透析患者、贫血患者、妊娠期妇女的血糖检测等，因此GA为血糖监测的首选指标。二、产品的检测原理及方法1.糖化白

10、蛋白的测定第一反应为糖化白蛋白在特异性蛋白酶的作用下，发生反应生成糖化氨基酸。第二反应为糖化氨基酸在果糖氨基酸氧化酶（FAOD）的作用下，生成过氧化氢。过氧化氢在4-氨基安替比林以及N，N-双（4-磺丁基）-m-苯胺钠盐（DSBmT）的共存下，经过过氧化酶（POD）的作用，变换成红紫色色素。通过测定此红紫色色素的吸光度进而计算出糖化白蛋白的浓度。糖化白蛋白：蛋白酶第一反应 糖化白蛋白 糖化氨基酸FAOD第二反应 糖化氨基酸+O2+H2O 葡萄糖醛酮+氨基酸+H2O2POD H2O2+4-氨基安替比林+DSBmT 红紫色色素2）白蛋白的测定在第一反应中，还原型白蛋白变成氧化型白蛋白。在第二反应中

11、，氧化型白蛋白在溴甲酚蓝（BCP）的作用下，白蛋白与BCP生成蓝色结合体，测定此蓝色结合体的吸光度进而计算出白蛋白的浓度。第一反应 还原型白蛋白 氧化型白蛋白BCP第二反应 氧化型白蛋白 白蛋白-BCP结合体3）糖化白蛋白值（%）的计算得出的糖化白蛋白浓度除以白蛋白浓度，为使测定值与常规检测方法（露喜佳GA-L，旭化成制药株式会社）测定的结果相一致，需要用以下公式进行补正。补正公式：（糖化白蛋白浓度/白蛋白浓度）48.9+1.9三、产品的预期用途本产品用于定量检测血清或血浆中GA的浓度。四、临床试验目的和内容4.1 临床试验目的验证考核试剂同参比试剂对于临床样本的检测一致性。4.2 临床试验内

12、容通过考核试剂对按照方案要求入组的样本的检测结果同参比试剂对同一样本的检测结果的分析对比，统计出两种试剂检测的一致性。五、试验总体说明5.1 临床试验流程按照临床试验方案设定的流程进行检测。5.2 考核试剂信息5.2.1 名称及主要成分名称规格糖化白蛋白检测试剂盒（酶法）GA酶液40mL2GA酶液13.4mL2 ALB缓冲液40mL2ALB显色剂20mL2校准品1mL用3校准品1mL用35.2.2 储存条件及有效期储存条件：210有效期：制造日起14个月5.2.3 试剂信息本临床试验使用的是日立的7600系列全自动生化分析仪。生产厂家：XX医疗株式会社产品名称：糖化白蛋白检测试剂盒（酶法）试剂

13、校准品质控品产品批号005RLM005RLM005RLM有效期2016-082016-082016-08容量GA：40ml2GA：13.4ml2ALB：40ml2ALB：20ml21ml2浓度31ml2浓度65.2.4 操作步骤具体请详见考核试剂产品说明书，见附件三.1。5.3 参比试剂信息及第三方验证试剂信息5.3.1 参比试剂生产厂家：旭化成制药株式会社产品名称：Lucica GA-L糖化白蛋白测定试剂盒（酶法）试剂校准品质控品产品批号1502A1501A1501A有效期2016-092016-062016-06容量GA R-1：40ml2GA R-2：10ml2ALB R-1：40ml2

14、ALB R-2：20ml21ml23ml2浓度1参比试剂的详细操作步骤及相关注意事项请详见参比试剂的产品说明书，见附件三.2。5.3.2第三方验证试剂生产厂家四川迈克生物科技股份有限公司产品名称糖化白蛋白检测试剂盒（酶法）产品批号TBD有效期TBD5.4 临床试验的样本量按照临床试验方案的设计要求，本单位的样本量应不低于100例.上海交通大学医学院附属仁济医院一共入组156例，其中105例样本分别在日立7600全自动生化分析仪（使用考核试剂以及参比试剂）上测定血清中浓度，在日立7600全自动生化分析仪上测定同一样本中血清与血浆的浓度共51例。其中#215检测血清血浆结果均为负值，考虑为检测仪器

15、误差所致，因此剔除此样本，实际进行统计的样本数为50例。总样本例数为155例。因总临床样本数已经满足临床试验方案的要求，因此，本临床单位不再另行补充样本以满足100例的要求。5.5 临床试验单位信息名称：上海交通大学医学院附属仁济医院地址：上海市浦东新区浦建路160号电话总机)5.6 临床样本的入选与排除按照临床试验方案的要求，随机入组了156例样本，其中用于检测血清血浆的#215血清血浆测定结果均为负值，考虑为检测仪器误差所致，因此剔除此样本，故实际进行统计的样本数为50例。其他样本均符合入组要求。5.7临床样本的保存及运输方式均符合临床试验方案的要求。5.8样本

16、相关信息记录入组样本的相关信息符合临床试验方案的要求。5.9临床样本分组符合临床试验方案的要求。六临床试验结果及统计6.1 样本说明样本信息见附件一。本次临床试验使用了105例血清样本进行了考核试剂和参比试剂的检测，50例同一样本考核试剂血清血浆结果相关性的检测。检测后，105例血清样本经Bland-Altman偏倚图比较两组结果的差值，有101个样本结果（95.05%95%）的差值在均值1.96SD范围内，可视为结果具有一致性，无需剔除或补充样本。6.2定量检测结果统计描述说明：以下统计中，考核试剂指的是XX医疗株式会社生产的糖化白蛋白测定试剂盒（酶法），参比试剂指的是旭化成制药株式会社生产

17、的糖化白蛋白测定试剂盒（酶法）。试验数据见附件二。6.2.1 线性相关及散点图考核试剂和参比试剂的检测结果的相关系数为r=0.9884（r2=0.9770），两者的线性方程为：Y=0.9686*X+1.163，两组检测结果高度相关。以自变量（参比试剂结果）为X轴，因变量（考核试剂结果）为Y轴做散点图，结果如下：考核试剂与参比试剂相关性考核试剂GA%参比试剂GA%6.2.2偏倚图（bland-altman）分析以参比试剂和考核试剂的差值作为纵坐标，参比试剂作为横坐标，做散点图，进行差值偏倚分析。105例血清样本经Bland-Altman偏倚图比较两组结果的差值，有4个样本结果超出均值1.96SD

18、范围，有96.19%（95%）的差值在均值1.96SD范围内，可视为结果具有一致性，因此无需剔除或补充样本。6.3 血清与血浆样本比对结果血清样本检测结果和血浆样本检测结果的相关系数为r=0.9821（r2=0.9645），两者线性方程为：Y=0.9210*X+0.982。以同一患者的血清检测结果为自变量Xi，血浆检测结果为因变量Yi，以Yi对Xi作散点图，结果如下：血清与血浆相关性考核试剂血浆GA%考核试剂血清GA%七. 结论通过本次临床试验的比较分析，考核试剂同参比试剂的检测结果无显著性差异，两种试剂的检测结果线性相关性高度相关（r=0.9884）。经Bland-Altman偏倚图比较两组

19、结果的差值，有96.19%（95%）的差值在均值1.96SD范围内，可视为结果具有一致性。同时，考核试剂在进行血浆样本与血清样本检测结果比对时，两组结果的线性相关性良好。本次临床试验结果显示考核试剂与参比试剂对临床样本的检测具有等效性，适用于临床使用。附件一：样本信息记录表请查看附件附表1_GA_样本筛选入选表附件二：试验数据记录表1. 考核试剂和参比试剂数据记录表2. 血清与血浆对比实验检测数据请查看附件附表2_GA_测定结果统计。附件三：相关试剂盒使用说明书及信息考核试剂产品说明书参比试剂产品说明书附件四：临床试验主要研究人员的简历信息李敏职 称：研究员职 务：上海交通大学医学院附属仁济医

20、院检验科科主任1975 年1月出生，医学博士，研究员，博士研究生导师。2005 年 10 月至 2008年 3 月以博士后身份在美国国立卫生研究院（NIH）工作。现任中国微生物学会临床微生物学专业委员会青年委员会副主任委员；上海医学会检验医学分会青年委员（兼学会工作秘书）、青年学组组长；上海市分子诊断技术准入及基因扩增检验技术评审专家；美国微生物学会（American Society for Microbiology）会员等；担任PLoS One 、中华微生物学和免疫学杂志编委以及Infect Immun、EMI 等 6 本国际杂志审稿人等。医疗专长：目前主要从事“病原性微生物耐药和致病机理”等研究工作。先后在Nat Med、Mol Cell、PNAS等国际专业期刊发表SCI论著35篇，以第一或通讯作者发表SCI论著13篇（13篇论文影响因子累计84.7分，他引379次）；其中近5年发表SCI论著25篇，第一或通讯作者10篇（10篇论著总影响因子67.1分，他引208次）近5年主持国家自然基金5项(包括优秀青年科学基金1项)、国家教育部基金2项、上海市科委基金1项以及上海市人才基金3项等。 研究成果受邀在美国“Gord