5.1DNA的粗提取与鉴定-高二下学期生物人教版选修1

1、专题5 DNA和蛋白质技术课题1 DNA的粗提取与鉴定课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段课题3 血红蛋白的提取与分离课题1 DNA的粗提取与鉴定温故知新(3)DNA的结构模型是什么?(1)细胞生物的遗传物质是什么？(2)真核细胞DNA的存在场所?DNA反向平行的双螺旋结构主要存在于细胞核，在叶绿体、线粒体中也有少量分布。实验思路 DNA的提取和鉴定DNA从哪儿提取？怎样将DNA与细胞中的其他物质分离？怎样鉴定我们提取的DNA？哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核。01实验材料的选取动物哺乳动物卵生动物哪一种材料更适合用来提取DNA?植物组织细胞血细胞（1）动物细胞 在鸡血细胞溶液中加入一定量的蒸

2、馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液。02破碎细胞，获取含DNA的滤液使细胞吸水涨破，释放DNA。加速细胞膜和核膜的破裂，释放DNA（1）动物细胞 在鸡血细胞溶液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液。02破碎细胞，获取含DNA的滤液注意：为防止血液凝固，需加入柠檬酸钠。使细胞吸水涨破，释放DNA。加速细胞膜和核膜的破裂，释放DNA03去除滤液中的杂质 利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。【方案一】溶解度：在一定温度下，某固体物质在100g溶剂里达到饱和状态时所溶解的质量。基础知识DNA的溶解性DNA溶解度最小O蛋白质溶解度N

3、aCl浓度0.14mol/L2mol/LODNA溶解度NaCl浓度0.14mol/L2mol/L蛋白质溶解度最大04DNA的析出与鉴定 加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液（体积分数为95）、静置2-3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA。DNA的析出：一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解；二是低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。 用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物并用滤纸吸去上面的水分。注意： 动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂实验组：含DNA的5ml 2mol/L NaCl 和4ml二苯胺对照组：不含DNA的5ml 2mol/L NaCl 和4ml二苯胺蓝色的深浅

4、与溶液中DNA的含量多少有关。DNA的鉴定：02破碎细胞，获取含DNA的滤液（2）植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解，并进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集滤液。溶解细胞膜，有利于DNA的释放。有利于DNA的溶解加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。课堂练习：1.判断正误：(1)可选人血细胞作为提取DNA的材料()(2)随着NaCl溶液浓度的升高，DNA在其中的溶解度先升高后降低()(3)DNA不溶于酒精溶液，而细胞中某些蛋白质易溶于酒精溶液中()(4)蛋白质和DNA都能忍受80 以上的高温()(5)沸水浴条件下，DNA的结构仍可保持不变()(6)在酒精

5、溶液中析出DNA时，搅拌需轻缓地进行，以免严重断裂DNA分子()(7)二苯胺试剂需要现配现用()(8)将制备的含有DNA的滤液加入6075 恒温水浴箱中保温1015 min，可以将蛋白质沉淀析出()2.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，实验原理是利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同来提取的，DNA的溶解度与图示曲线的对应点相符合的是A.a点浓度最适合析出DNAB.b点浓度最适合析出DNAC.c点浓度最适合析出DNAD.d点浓度最适合析出DNAB3.(2019河北衡水中学校级月考)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的原理的叙述，正确的是A.利用“所有蛋白质不能忍受6080 的高温，

6、而DNA在80 以上才会变性”的特性提纯DNAB.利用“DNA在2 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，易析出”的特性提取DNAC.利用“DNA不溶于酒精，而细胞中某些蛋白质可溶于酒精”特性提纯DNAD.利用“DNA与二苯胺作用而显现紫色”的特性鉴定DNAC4.关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验，下列哪项不是该实验依据的实验原理A.DNA在NaCl溶液中的溶解度，随着NaCl溶液浓度的不同而不同B.利用DNA不溶于酒精的原理，可除去细胞中溶于酒精的物质C.DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D.在沸水中DNA与二苯胺反应会呈现蓝色C5.(2018江苏南通模拟)下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验相关操作中所选取的试剂，错误的是( )B3.在DNA的粗提取实验过程中，不影响DNA提取量的选项是( )A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，释放出DNA等核物质B.搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C.在析出DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至黏稠物不再增多D.要用冷酒精沉淀DNA