生物碱类成分分析

1、关于生物碱类成分分析第一张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室1.薄层板的制备2.黄连药材的鉴别：2.1对照品溶液的制备：小檗碱作为对照品，制备小檗碱甲醇对照品溶液；2.2黄连对照药材溶液的制备：甲醇回流提取2.3供试品溶液的制备：甲醇浸渍提取2.4点样及展开：按照薄层色谱法试验，在同一薄层板上进行2.5检视：供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同的斑点第二张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室1.药味及活性成分的选择 黄连君药 小檗碱主要活性成分2.供试品溶液的制备：提取、纯化（液液萃取法）制备供试品溶液3.对照品溶液的制备：精密称

2、取干燥至恒重的小檗碱对照品溶液，溶于甲醇即得对照品溶液4.固定相即色谱柱的选择：采用ODS柱5.流动相的选择：部分含水溶剂，水用超纯水，有机溶剂采用色谱纯溶剂，并用0.45um过滤膜过滤6.洗脱方式的选择1.如何建立一清颗粒定含量测定分析方法？叙述实验步骤及注意事项。第三张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室7.检测器的选择：UVD8.定量分析8.1方法学考察：专属性，线性关系和范围，精密度试验，重现性试验，稳定性试验8.2含量测定：第四张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第五章 中药制剂中各类化学成分分析第一节生物碱类成分分析第五张，PPT共八十八页，创

3、作于2022年6月中药制剂教研室大纲要求熟悉生物碱类成分结构特征及理化性质掌握生物碱类制剂定性鉴别常用方法掌握生物碱类制剂定量分析常用方法第六张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室问题生物碱类成分的理化性质？含生物碱类成分的中药制剂制备供试品时需考虑的问题？含生物碱类成分中药制剂定性鉴别，以硅胶为载体时，展开系统需注意的问题？HPLC法分析制剂中单体生物碱的含量时，改进流动相的常用方法？第七张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室概述定义 生物碱是生物界除生物体必须的含氮化合物（如氨基酸、蛋白质和B族微生素等）之外的所有含氮有机化合物，因其结构中氮原子上的未共

4、享电子对而大多具有碱性。 绝大多数具有显著的生理活性中药材中生物碱多和植物酸性成分结合成盐的状态存在第八张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室结构特征及理化性质结构特征 C H O N理化性质物理性状：结晶性固体；液体、小分子固体（挥发性、升华性），多无色溶解性：多样性沉淀反应：生物碱沉淀试剂，定性（蛋白质、多肽、鞣质，避免假阳性）显色反应：纯品，少用于制剂中生物碱分析碱性：多呈碱性，碱性强成盐弱游离，供试品制备及分析方法建立及条件 选择的依据紫外光谱特征：共轭体系，紫外吸收 大多数生物碱在酸性水溶液中可以与某些试剂生成不溶于水的复盐或分子复合物，这类试剂第九张，PPT共八十

5、八页，创作于2022年6月中药制剂教研室定性鉴别一般理化鉴别沉淀反应多用：酸性条件，净化处理（除蛋白质、多肽、鞣质），制剂中两种以上含生物碱药材（难说明问题）第十张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室马钱子主含生物碱。以番木鳖碱(士的宁) 与马钱子碱(布鲁生) 为主, 主效成分及毒性成分。生物碱以盐的形式存在，加浓氨水使生物碱盐转变成游离碱，易溶于氯仿有机溶剂。地龙含较多多肽、蛋白质等，不溶于有机溶剂。第十一张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室定性鉴别色谱鉴别1.TLC法：常用载体：硅胶常用展开剂：氯仿、苯及相应极性调节剂硅胶弱酸性，形成盐至Rf值小、拖尾

6、、复斑，碱性展开系统or碱性条件下显色剂：改良碘化铋钾（橘红色）供试品的制备：处方、剂型、存在状态、溶解性、共存成分的性质第十二张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第十三张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第十四张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室固体剂型回流提取第十五张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第十六张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室液体剂型液液萃取第十七张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第十八张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室固体剂型大蜜

7、丸第十九张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第二十张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室定性鉴别色谱鉴别2.纸色谱法：显色：含硫酸的试剂不可3.HPLC法：快速、灵敏、微量Rt值法，峰面积 or 峰高加大法（用内标）第二十一张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室含量测定反映中药制剂中含生物碱的真实情况提取、净化、分析测定均要准确方法学考察内容1.提取净化条件的考察2.测定方法与条件的选择3. 定量分析方法验证3.1 专属性 3.2 线性关系考察 3.3 精密度试验3.4 准确度试验 3.5 稳定性试验 3.6 测灵敏度及检测限的测定第二十

8、二张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室含量测定总生物碱含量测定化学分析法范围：处方药味少，内含成分简单的中药制剂酸碱滴定法：生物碱碱性强弱，水/非溶液酸碱滴定法重量法：提取生物碱成沉淀 or 加生物碱沉淀试剂第二十三张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第二十四张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室酸碱滴定法第二十五张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第二十六张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第二十七张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第二十八张，PPT共八十八页，创作于202

9、2年6月中药制剂教研室第二十九张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室重量法溶液后标示的“（110）”等符号，系指固体溶质1.0g或液体溶质1.0ml加溶剂使成10ml的溶液；未指明用何种溶剂时，均系指水溶液；第三十张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室含量测定分光光度法样品分离、净化（化学法、柱色谱法、TLC法等）直接测定法：不经过化学反应用生物碱物质自身的吸收波长范围：药物少，内含成分简单的中药制剂离子对萃取比色法第三十一张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第三十二张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室分光光度法：直接

10、测定法2010版药典：HPLC 定量黄连、炒白芍第三十三张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第三十四张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室分光光度法：直接测定法2010版药典：HPLC 定量黄连第三十五张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室分光光度法离子对萃取比色法范围：中药制剂中微量生物碱的含量测定原理：一定PH介质中，有机碱与一些酸性染料或磺酸类、酸类的阴离子，定量结合为有色离子对，离子对定量溶于某些有机溶剂，一定波长下测定有机溶剂的或碱化后释放出的染料的吸收度，按分光光度法计算有机碱的含量。常用方法：酸性染料比色法和苦味酸盐比色法第

11、三十六张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室分光光度法酸性染料比色法 适当PH介质中，生物碱可与氢离子结合成生物碱盐的阳离子，而酸性染料在此条件下解离为阴离子，生物碱盐的阳离子与染料阴离子定量地结合成有色的配合物（即离子对），此离子对可定量地溶于某些有机溶剂，测定有机溶剂的吸收度 or 经碱化后释放出的染料的吸收度，即可计算生物碱的含量。第三十七张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室分光光度法酸性染料比色法关键：介质的PH、酸性染料的种类、有机溶剂pH值的选择：染料的性质及生物碱的碱性，生物碱一元碱与溴百里酚蓝形成1：1的离子对，pH(5.26.4)，二元碱

12、形成1：2的离子对， pH(3.05.8)常用染料：溴百里酚蓝、溴甲酚绿、溴酚蓝、溴甲酚紫第三十八张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室分光光度法酸性染料比色法有机溶剂的选择：根据离子对与有机相能否形成氢键以及形成氢碱能力的强弱，氯仿、二氯甲烷与离子对形成氢键，有中等程度的萃取率，选择性好，是常用的提取溶剂有机相中的水份的影响：微量水分使氯仿发生浑浊，且水相中的过量染料影响测定结果。有机溶剂提取液可加脱水剂或经干燥滤纸滤过除去水分。第三十九张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室2010版 乌头总生物碱+麻黄HPLC定量第四十张，PPT共八十八页，创作于202

13、2年6月中药制剂教研室第四十一张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室酸性染料分光光度法水相pH的选择是分别取乌头碱标准液，以不同pH的缓冲液进行试验，pH3.0较好。该条件下，吸收度较大，指示液空白对照吸收度较小，呈色稳定性好第四十二张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室分光光度法雷氏盐比色法雷氏盐（雷氏铵or硫氰酸铬铵）：微溶于冷水，易溶热水，可溶于乙醇雷氏盐酸性介质中可与生物碱类成分定量地生成难溶于水的有色配合物，生物碱雷氏盐沉淀易溶于丙酮，其丙酮溶液呈现的吸收特征是由于分子结构中硫氰酸铬铵部分，而非生物碱部分。第四十三张，PPT共八十八页，创作于202

14、2年6月中药制剂教研室分光光度法雷氏盐比色法I 将此沉淀过滤洗净后溶于丙酮/甲醇直接比色测定，换算生物碱的含量；II 精密加入过量雷氏盐试剂，滤除生产的生物碱雷氏盐沉淀，用滤液进行比色测定残存的过量雷氏盐含量，间接计算生物碱的含量（雷氏盐剩余比色法）。第四十四张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室分光光度法雷氏盐比色法注意事项：1.雷氏盐的水溶液室温可分解，应新鲜配制，沉淀需在低温进行2.中药制剂应先纯化处理3.雷氏盐的丙酮or丙酮水溶液吸收值，随时间有变化，应尽快测定第四十五张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第四十六张，PPT共八十八页，创作于2022

15、年6月中药制剂教研室超声处理：不同功率、频率超声提取仪对含量测定的结果不同在同一提取器内由于摆放部位不同提取效果也不一致。第四十七张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室含量测定单体生物碱的含量测定TLCHPLCGC第四十八张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室含量测定单体生物碱的含量测定TLC法：样品需纯化，吸附剂、展开剂及显色与鉴别相似，要求更严格第四十九张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室3第五十张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室3第五十一张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室2010版药典：H

16、PLC法定量黄连第五十二张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第五十三张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室含量测定HPLC法：反相HPLC法应用多（ODS or C18)硅醇基酸性大，生物碱可与其牢固键合，保留时间延长，峰形变宽，拖尾，克服措施：改进流动相改进固定相第五十四张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室含量测定HPLC法：改进流动相：流动相中加入硅醇基抑制剂，竞争或部分阻断硅醇剂的影响，最常用硅醇基抑制剂是二乙胺、三乙胺（TEA)等。采用离子对色谱系统：合适的pH下，流动相中加入低浓度离子对试剂，通过与生物碱类成分生成离子对而掩蔽

17、其碱性基团。常用离子对试剂：辛烷磺酸钠或十二烷基磺酸钠。注意：清洗柱子，避免过夜，保证色谱柱的寿命。第五十五张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室含量测定HPLC法：改进流动相： 流动相中加入季铵盐试剂，掩蔽固定相表面的硅醇基，如在水甲醇中加入0.01mol/L的溴化四甲基胺。流动相中加入电解质缓冲盐，通过改变流动相离子强度，稳定pH值及促进离子对相互作用，起到改善峰形及分离效果的作用。第五十六张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第五十七张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室流动相+电介质缓冲盐第五十八张，PPT共八十八页，创作于2022

18、年6月中药制剂教研室第五十九张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室流动相+电介质缓冲盐第六十张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第六十一张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第六十二张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室流动相+离子对试剂第六十三张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第六十四张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第六十五张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第六十六张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第六十七张，PPT共八十八页，创

19、作于2022年6月中药制剂教研室第六十八张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第六十九张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第七十张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第七十一张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第七十二张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第七十三张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第七十四张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第七十五张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室含量测定GC法范围：有挥发性，遇热不分解的生物碱类（药典未

20、收载），如麻黄碱、槟榔碱、苦参碱、颠茄类生物碱等。第七十六张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第七十七张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第七十八张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第七十九张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室第八十张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室常见生物碱类成分的中英文对照小檗碱：berberine士的宁：strychnine乌头碱：aconitine苦参碱：matrine甜菜碱：betaine麻黄碱：ephrine水苏碱：stachydrine吴茱萸碱：evodiamine第八十一张，PPT共八十八页，创作于2022年6月中药制剂教研室思考题小儿清热片质量分析方案设计，请设计本品定性鉴别、检查及含量测定分析方案。定性鉴别：对照品、对照药材、鉴别方法（要不少于5味药材）检查：片剂的检查内容含量测定：所测成分、提取净