刺五加不同药用部位及不同组织有效成分含量比较研究

1、刺五加不同药用部位及不同组织有效成分含量比拟研究【摘要】目的为刺五加合理利用及质量评价提供科学的根据。方法采用反相高效液相色谱法测定根、根茎、茎刺五加不同药用部位及木质部、韧皮部不同药用组织刺五加苷B、绿原酸及刺五加苷E和异嗪皮啶含量，并测定韧皮部所占成分的比例。结果刺五加药材中根、根茎和茎中各种成分含量相近，且主要分布在韧皮部。结论不同用药部位根、根茎和茎及不同组织韧皮部和木质部可共同入药具合理性。【关键词】刺五加根根茎茎韧皮部木质部Abstrat：bjetiveTprvidesientifibasisfrratinalutilizatinandevaluatinfAanthpanaxsen

2、tisus.ethdsRe-HPLasusedtdeterinethententsfthepundssuhaseleuthersideB,hlrgeniaid,eleuthersideEandisfraxidinfrxyleandphleinrt,rhizeandsteanddeterineprprtinfedialateria.ResultsAbve-entinednstituentntentshadlittledifferene,andtheyeredistributedinphle.nlusinItisreasnablethatrt,rhizeandsteasellasphleandxy

3、leareanbeusedtgether.Keyrds：Aanthpanaxsentisus;Rt;Rhize;Ste;Phle;Xyle刺五加药材为五加科植物Aanthpanaxsentisus(Rupr.etaxi)-Hars的枯燥根、根茎和茎。始见于东汉?神农本草经?，别名为五加参、老虎钌子、刺拐棒，中医用作强壮剂，具有益气健脾，补肾安神的功能。植株各局部均可入药，茎、叶、果实的生药学也有研究1。19851995版?中国药典?中规定的刺五加药用部位为根及根茎，2000版?中国药典?刺五加药用部位变为根、根茎和茎。野生刺五加主要为无性繁殖生长在阴湿环境下，根不兴旺，根茎极为兴旺，所以根茎为

4、商品的绝大局部。刺五加的生态幅较小2，1992年出版的?中国植物红皮书稀有濒危植物?(第1册)中被列为渐危植物。为保护野生资源林业部门已经制止采收地下局部，所以目前野生品主要为茎部。随着野生资源的减少，黑龙江省各地区进展刺五加的栽培消费，栽培的刺五加主要是通过有性繁殖，具有兴旺的根系，根占有较大的比例，所以，根、根茎和茎3种药用部位均有较大的应用。刺五加根茎和根的组织特征差异显著3，不同药用部位由于其构造的不同对有效成分含量差异较大，如甘草4、防风5等，因此，对刺五加不同药用部位有效成分的含量分析可科学评价刺五加的质量。1.2仪器与试药1.2.1仪器aters高效液相色谱仪aters2695S

5、eparatinsdule，aters2996PhtdideArrayDetetr，KD-160HR高速冷冻离心机，AS3120-B型超声震荡仪。1.2.2试剂乙腈为色谱纯，水为娃哈哈水，其余试剂为分析纯。1.2.3对照品刺五加苷B、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶对照品均由中国药品生物制品检定所提供。2方法2.1色谱条件色谱柱:diansil18(2504.6，5)；大连物化所保护柱；流动相：乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱：乙腈由13%等度2in，再10in内线性变化到21%，然后在21in中内线性变化到22%。柱温：40；流速：1l/in；检测波长：刺五加苷B、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶的检测

6、波长分别为265，327，271n和344n。进样量20l。2.2对照品溶液的制备分别取10g左右的对照品置10l容量瓶中加50%甲醇定容至刻度，制成约1g/l的对照品母液。2.3供试品溶液的制备称量1g左右样品，置圆柱瓶中，精细称定，再向瓶中参加25l的50%的甲醇，称重并记录，密封后超声30in，放置冷却，补足失重，再取上清液置离心管中4000r/in10in，过0.45的微孔滤膜，得供试品溶液。2.4线性关系考察分别从母液中取出不同体积置于10l容量瓶中，用50%甲醇定容至刻度，摇匀，制成6个不同浓度的对照品溶液。刺五加苷B880g/l、绿原酸1001000g/l、刺五加苷E580g/l

7、和异嗪皮啶0.14g/l,按上述色谱条件测定，以对照品溶液的质量浓度Xg/l对峰面积Y进展线性回归，回归方程为：刺五加苷B：Y=4107X-33628(r=0.9994)；绿原酸：Y=5107X+106r=0.9991；刺五加苷E：Y=3106X-3423.6(r=0.9996)；异嗪皮啶：Y=8107X-3477.6(r=0.9989)。2.5方法学考察转贴于论文联盟.ll.2.5.1精细度考察精细汲取上述刺五加苷B、绿原酸、刺五加苷E和异嗪皮啶4种对照品的混合溶液，连续进样5次，通过对刺五加苷B、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶面积积分，其积分值的RSD分别为0.34%，2.17%，1.34%

8、，1.71%，均小于3%，说明仪器的精细度良好。2.5.2重复性考察取同一批刺五加，按样品制备方法平行操作制备5份供试品溶液，按上述色谱条件进展分析，通过对刺五加苷B、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶面积积分，其积分值的RSD分别为2.31%，2.69%，1.44%，2.36%，均小于3%，说明方法重复性良好。2.5.3稳定性考察取同一批刺五加，按样品制备方法制备供试品溶液，分别在3，6，9，12h测定HPL色谱图，通过对刺五加苷B、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶面积积分，其积分值的RSD分别为1.36%，2.15%，2.60%，2.79%，均小于3%，说明样品在12h内稳定。2.5.4加样回收率实

9、验精细称取含量的刺五加1.00g左右，共5份，分别参加一定量的刺五加苷B、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶对照品，按供试液制备方法制备样品5份，按上述色谱条件进展分析，结果各对照品的加样回收率均为100.78%，100.93%，100.39%，99.61%，其积分值的RSD分别为1.46%，1.79%，1.44%，2.29%均小于3%，说明本方法回收率良好。3结果3.1韧皮部和木质部的含量差异的研究韧皮部和木质部的含量差异较大见图14，木质部含有大量导管，木纤维等死细胞，具有输导水分的功能，而韧皮部是植物的贮藏组织，也是化学成分积累的场所，所以韧皮部化学成分含量较高，虽然在药材中所占的比例为20%左右，但其占药材总成分的含量约在50%左右见表1，有些产地通过机械碾压刺五加茎，获得韧皮部用药具有一定的道理。刺五加药材木质部中有效成分异嗪皮啶含量极低，甚至为零，在整体药材中含量也很低，缺乏0.3%，所以木质部与韧皮部共同入药不会影响质量。刺五加为渐危植物物种，目前仍主要依靠野生资源，去除木质部将弃去50%左右的成分，从资源和加工人力角度考虑，刺五加应根、根茎或茎整体入药。表1木质部、韧皮部在药材中所占的比例略3.2刺五加药用部位的研究结果证明刺五加苷B在茎中的含量略高于根部，这与以往的文献相一致6。而绿原