安捷伦LC1260液相色谱操作规程及使用注意事项

1、安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项一、操作规程开机1 .把经过滤、脱气的各流动相装入贮液瓶中。打开计算机，打开主机各模块电源（从上至下）再双击桌面 “LC1260（联机）”图标，进入化学工作站。旋开排气阀（逆时针），右键单击“四元泵”图标出现快捷键， 点击“方法”选项进入泵编辑画面。将泵流量设为“5mL/min”，溶 剂A设为“100%”，打开泵，排出管路中的气体，直到由贮液瓶到泵 入口整个管路中无气泡为止，此过程约需要5min。依次切换到溶剂B、C、D，分别排气。数据采集编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”设定操作 者姓名，样品数据，文件名等。编辑完整方法：从“方法”

2、菜单中选择“编辑完整方法”项， 单击“确定”进入“方法注释”，编辑好单击“确定”。在“选择进样 源”中选择“手动进样”单击“确定”，在“设置方法”中进行参数 设定。四元泵参数设定：在“流速”处输入流量，如1mL/min，在 “溶剂”处依据需要选中B、C、D并输入相应的百分数，在右侧注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运行时间”，在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子，在“时间表”添 加编辑梯度。TCC （柱箱）参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入 所需温度，并选中它，右侧选中“与左侧相同”，使柱箱的温度左右一 致。VWD检测器参数设定：在“波长”右侧的空白处输入所需的

3、检测波长，在“峰宽（响应时间广下方点击下拉式三角框，选择合适 的响应时间，再设置“停止时间”和“后运行时间”。仪器曲线设置：默认即可。关闭排气阀（顺时针），冲洗色谱柱2030min，待柱前压力 基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况。将进样器转动手柄逆时针转到LOAD位置，在环路全量进样 时（定量环体积为20uL），用50100 uL的液相进样针将25倍定量 环体积的样品缓慢注入进样器中，再将进样器转动手柄顺时针方向迅 速转到INJECT位置，将定量环中样品引入系统中。数据处理在桌面上单击“LC1260（脱机广进入数据分析界面。从“文件”菜单选择“调用信号”选中您的数据文件名，单 击“确定。谱

4、图优化，从“图形”菜单中选择“信号选项”，从“范围” 中选择“自动量程”及合适的显示时间单击“确定”，或选择“自定 义量程”调整，反复进行直到图的比例合适为止。积分：从“积分”中选择“自动积分”，积分结果不理想，再 从菜单中选“积分事件”选项，选择合适的“斜率灵敏度，峰宽，最 小峰面积，最小峰高”。从“积分”菜单中选择“积分”选项则数据 被积分，如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。单 击左边图标将积分参数存入方法。校正表设计：点击“校正”菜单中的“校正设置”给出各个 参数，点击“确定七调出建立校正表所需的谱图并对谱图进行图形 优化和积分优化；点击“校正”菜单中的“新建校正表”，在

5、“新建 校正表”栏里选定“自动设定”点击“确定”在“校正表”中给出 正确的“化合物名”和“含量”；如需增加校正点数，给出第二校正 点的“含量”，校正表建立完成后点击“确定”，点击“保存图标”将 校正表存入方法中。打印报告：从“报告”菜单中选择“设定报告”选项进入画 面，单击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角选中所需定量方法， 其它选项不变，单击“确定”，从“报告”菜单中选择“打印”则报 告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上则勾选“报告”中的“输 出至打印机”。关机1.关机前，用95%水冲洗柱子和系统0.51h，流量0.51mL/min，再用100%有机溶剂冲洗0.5h，然后关泵。退出化学

6、工作站及其它窗口，关闭各模块电源，关闭计算机。日常维护项目内容贮液器保持贮液瓶清洁，定期清洗；尽量使用HPLC级溶剂和试剂；流动相使用前一 定要用合适的滤膜过滤；含有缓冲盐的流动相应现配现用。泵仪器使用完毕应立即将泵中的缓冲盐冲洗干净；定期清洗过滤筛板，用1mol/L 硝酸浸泡1h，再用纯水清洗干净。进样器样品进样前要过滤；手动进样器要用液相专用的平头针，切不可用气相色谱仪 用的尖头针代替；进样针和进样阀使用完毕要用有机溶剂清洗干净。色谱柱新柱或长期不用的色谱柱使用前要用适宜的溶剂在低流量下（0.20.3mL/min） 冲洗30min ；使用缓冲盐后要先用5%甲醇水溶液冲洗再用有机溶剂冲洗；仪器 工作完成后要立即冲洗柱子和管线；建议使用保护柱；应避免流动相组成和极 性以及压力脉冲的剧烈变化。检测器保持检测器清洁、干燥；检测器灯不用时不要打开，也不要频繁开关；不要用 手直接接触氘灯表面。（二）注意事项氘灯是易耗品，应最后开灯，不分析样品时即关灯。开机后，打开排气阀，依次将所需溶剂设为100%，泵流量 5mL/min，若此时显示压力大于10bar，则应清洗过滤白头。流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的超纯水（易长