浮游监测操作

1、浮游菌监测操作1、目的规范洁净室（区）的浮游菌监测操作，使其符合 GMP 的要求。2、范围本规程适用于公司内除动物室之外所有洁净室（区）浮游菌的监测工作。3、3.1定义洁净室（区）：对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域内污染源的介入、产生和滞留功能。菌落：细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的细菌集落，简称 CFU，通常用个数表示。浮游菌：通过标准方法收集悬浮在空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基， 在适宜条件下繁殖到可见的菌落。浮游菌浓度：单位体积内空气中含浮游菌菌落数的多少，以计数浓度表示个/m3或个/L。静态测试：洁净室（区）净

2、化空气调节设施及功能齐备，工艺设备已安装并可运行，洁净室（区）内没有生产人员的情况下进行的测试。动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态下，人员进行正常操作时进行的测试。4、职责质保科 QA：负责本规程的起草、修订、审核、培训、实施和监督。质量授权人、质控科、生产部：负责本规程的审核。质量部经理：负责本规程的批准。相关部门及人员严格按照本规程执行。5、引用标准医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法GB/T16293-2010药品 GMP 指南2010 年版中华人民共和国药典2010 年版二部6、材料在线及离线浮游菌采样器、大豆酪蛋白琼脂培养基培养皿（培养皿规格 90mm）、记号笔、恒温培养箱7、

3、流程图无8、8.18.1.1程序监测准备进行监测前到质控科化验室领取准备好足够数量的大豆酪蛋白琼脂培养基。使用前应仔细检查每个培养皿的质量，培养皿有变质、破损或污染的不能使用。8.1.2监测人员要按照洁净区更衣程序进入洁净区，监测用仪器材料按物料、物品进出洁净区操作 YH进行清洁、消毒处理后传递进入洁净区。监测条件确认监测仪器经过检定并且有检定合格证书在检定有效期内。确认恒温培养箱经过校验并且有校验合格证书在校验有效期内。确认洁净室（区）内温湿度、压差符合要求；确认静态浮游菌测试前被测试洁净室（区）已经过清洁消毒。确认监测时间，对于单向流，测试应在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min

4、开始；对于非单向流，测试应在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min 开始。监测标准洁净区浮游菌动态监测标准见下表 1、静态监测标准见下表 2。表 1：浮游菌动态监测标准洁净度级别标准值最大微生物允许数浮游菌 cfu/m3 警戒限度纠偏限度A 级1B 级1057C 级1005070D 级200100140表 2：浮游菌静态监测标准洁净度级别标准值最大微生物允许数浮游菌 cfu/m3 警戒限度纠偏限度A 级1B 级1C 级1057D 级502535注：警戒限度为超出国家标准的 70%（微生物项目为 50%），如超出警戒限度时，需对该条件进行评估，必要时需增加检测频率或检测项目，以确保其能保持

5、该级别环境。纠偏限度为超出国家标准的 90%（微生物项目为 70%），如超过纠偏限度时，需对该级别条件下活动进行限制，并通知相关部门对该级别进行维修或更换，同时进行偏差处理。监测范围及周期动态监测：灌装半加塞工序、轧盖工序的关键操作 A 级区域采取在线监测，每批次进行在线监测。静态监测A 级：每月一次； B 级：每月一次； C 级：每月一次； D 级：每月一次。采样要求采样点设置及采样要求：采样要有代表性，能够真实反映环境的实际情况。工作区的采样点位置离地 0.8m1.5m 左右（略高于操作台面）；送风口采样点位置离开送风面 30cm 左右；可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。采样点应

6、避开尘粒较集中的回风口。采样时，监测人员应站在采样口的下风侧，并尽量少走动。应采取一切措施防止采样过程的污染和其他可能对样本的污染。采样点设置动态监测：在确定位置时应依据生产操作的内容及关键程度进行风险评估，并依据评估结果制定“定置图”。静态监测：在洁净区内均匀布置，应满足最少采样点数。最少采样点数目，见表 3。面积（M2）洁净级别C 级22223D 级22223表 3：最少采样点数10A 级23B 级2102042204082401001641002004010最少采样量，见表 4。表 4：浮游菌最小采样量洁净度级别最小采样量 L/次A 级1000B 级500C 级100D 级100洁净室或

7、洁净区面积见环境监测管理YH附件 1，采样点的布点见环境监测管理 YH附件 2。监测方法动态监测，生产操作前、中、后段分别开启监测系统，将培养皿盖打开，平移放置在操作台面上（应放置在不影响生产操作的位置），将培养皿口向上放置在采样头内进行动态监测（操作过程中可酌情增加采样次数） ，采样结束后用记号笔在培养皿盖上标清培养皿编码及日期。静态监测，测试前，仪器要开机预热，待稳定后再进行监测，用浮游菌采样器按采样点的布置要求将采样头正确放置在采样点处，设置所需采样量，进行采样。浮游菌采样器使用方法见浮游菌采样器使用、清洁、维护YH或微生物空气采样器使用、清洁、维护 YH，每个采样点采样一次，每个采样点

8、采样结束后用记号笔在培养皿盖上标清培养皿编码及日期。全部采样结束后，将培养皿倒置放入不锈钢桶内，由质保科 QA 送至质量控制部化验室，由质控科 QC 将培养皿倒置于 3035恒温培养箱中培养 48h。每次采样选定 1 只培养皿作对照试验，与采样培养皿同法操作但不暴露采样，与采样后的培养皿一同放入培养箱内培养，以检验培养皿是否在搬运或运输过程中受到影响。监测人员动态监测：操作人员应能保证生产环境不被污染。静态监测：监测区域内人员不能超过 2 个人；监测记录由质保科 QA 将监测房间人员数及采样时间记录于“浮游菌监测记录”并签名签日期，将记录同测试后的培养皿一同转交质控科 QC，由质控科 QC 人

9、员进行培养、观察、逐日点计菌落数和记录，记录内其他内容由质控科 QC 人员记录完整后，转交给质保科 QA,由质保科 QA 进行根据标准作出结论是否合格，结果判定是否符合要求。监测记录定期归档。计数方法：用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器点计，然后用 510 倍放大镜检查有否遗漏；若培养皿上有 2 个或 2 个以上的菌落重叠，可分辨时仍以 2 个或 2 个以上菌落计数，得出各个培养皿的菌落数。每个采样点的浮游菌平均浓度的计算：浮游菌平均浓度（个/m3） =菌落数采样量结果评定：每个测点的浮游菌平均浓度必须低于监测标准中的界限。在静态监测时，若某监测点的浮游菌平均浓度超标，则应重新采样两次，两次监测结果均合格才判定为符合。9、ESH无10、派生记录浮游菌监测记录YH-YH-ZB-30-003(01)11、相关文件物料、物品进出洁净区操作 YHYH-SC-20-009微生物空气采样器使用、清洁、维护 YHYH-ZB-50-002浮游