2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体课件-高二下学期生物人教版选修3

1、专题二 动物细胞工程2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体血浆疗法治疗新冠病人，实际上是利用血浆里面的哪种物质？康复患者血浆里只有针对新冠病毒的一种抗体么？这种抗体一定足够多么？血浆疗法有哪些缺陷？产量低、纯度低、得到的抗体特异性差怎样大量获得针对新冠病毒的抗体呢？每一个浆细胞只分泌一种化学性质单一，特异性强的抗体。如果利用单个浆细胞进行无性繁殖（克隆），形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体单克隆抗体。在体外培养的条件下，一个浆细胞能无限增殖形成细胞群吗？ 什么样的细胞能够在体外无限增殖呢？浆细胞能够产生特异性抗体，癌细胞能够无限增殖，我们可以怎么做？植物体细胞杂交

2、过程植物细胞 A（白菜）植物细胞 B（甘蓝）原生质体 A原生质体 B1.去除细胞壁2.原生质体融合杂种植株(白菜-甘蓝)愈伤组织杂种细胞纤维素酶、果胶酶物理方法和化学药剂:聚乙二醇杂种细胞再生出细胞壁植物组织培养植物细胞融合植物体细胞杂交技术脱分化再分化一、动物细胞融合1.概念： 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。动物细胞融合前需要去壁么？怎样获得单个动物细胞？动物细胞融合的诱导方法有哪些？跟植物细胞工程方法完全一致么？动物细胞融合的原理是什么？不需要，用胰蛋白酶使细胞分散离心振动电激(物理

3、方法)聚乙二醇(化学方法)灭活病毒(生物方法)细胞膜的流动性仙台病毒紫外线灭活丧失感染活性（不感染细胞）保留融合活性（诱导细胞融合）什么是灭活的病毒？（阅读P52页生物技术资料卡） 灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。 灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合 把两个不同的动物细胞放在一起，用灭活的病毒处理细胞，它们先发生质融合，再出现核融合，进而形成杂交细胞。 融合后的杂交细胞经过有丝分裂后仍能形成两个完整的杂交细胞任何一项技术的发明，都不是凭空产生的，必定有个发展的过程，让我们阅读课本P52中的小字来了解动物细胞融合

4、的发展简史。并思考：实现动物细胞融合有什么意义呢？又有哪些应用？怎样解决短时间内获得针对新冠病毒抗体这一问题？如果你是研发人员，你的具体思路是什么？小组讨论三分钟二、单克隆抗体向动物注射灭活的新冠病毒取其体内的B淋巴细胞取骨髓瘤细胞，诱导融合此时进行诱导融合的培养基内可能有多少种细胞？如何将其区分开？5种（BB;B瘤;瘤瘤;B细胞;瘤细胞）利用选择培养基筛选杂交瘤细胞将单个杂交瘤细胞单独培养并克隆，筛选可大量产生所需抗体的杂交瘤细胞（克隆化培养+抗体检测）体外培养或在小鼠腹腔内增殖，获得大量单克隆抗体单克隆抗体诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合第一次筛选：利用选择培养基，排除“杂交瘤细胞”之外的细

5、胞类型第二次筛选：利用多孔培养板进行细胞培养，并进行抗体检测，筛选出可大量产生目标抗体的杂交瘤细胞获得所需的单克隆抗体科勒米尔斯坦荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导方法用途克服远源杂交的障碍，获得杂种植株细胞膜的流动性细胞增殖细胞膜的流动性植物细胞的全能性去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）制备单克隆抗体灭活的病毒三、单克隆抗体的特点和应用“生物导弹”单克隆抗体药物诊断试剂用于治疗疾病1、特点：特异性强，灵敏度高，产量高。2、应用：用于运载药物优点：准确，高效，快速动物细胞融合动物细胞培养新冠病毒表面蛋白筛选出杂交瘤细胞即能大量增殖，又能产生特异性抗体生物导弹动物体细胞核移植特异性强、灵敏度高、可大量制备动物细胞融合单克隆抗体制备概念：原理：细胞