医学检验士相关笔记

1、PAGE PAGE 34火焰光度法火焰光度法是 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床检验技士考试复习需了解的知识，环球 HYPERLINK /yiyao/ t _blank 医学网搜集整理了相关内容与考生分享，希望给予大家帮助!火焰光度法：Na+、K+测定可采用火焰光度法。Na+、K+测定可采用火焰光度法。原理：火焰光度法是一种发射光谱分析法，利用火焰中激发态原子回降至基态时发射的光谱强度进行含量分析。该法可检测血清、尿液、脑脊液及胸腹水的Na+和K+，该方法属于经典的标准参考法，优点是结果准确可靠，广为 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床采用。通常采

2、用的定量方法有标准曲线法、标准加入法和内标准法。内标法是标本及标准液采用加进相同浓度的内部标准元素进行测定，一般是加入锂内标，测定的是锂/钠或锂/钾电流的比值，而不是单独的钠或钾的电流，这样，可减小燃气和火焰温度波动等因素引起的误差，因而有较好的准确性。肾前性蛋白尿肾前性蛋白尿是 HYPERLINK /yiyao/ t _blank 医学检验技士考试需要了解的知识点，环球医学网搜集整理了相关内容，希望对广大复习备考的考生有所帮助。肾前性蛋白尿见于浆细胞病：如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、浆细胞白血病等。血管内溶血性疾病：如阵发性睡眠性血红蛋白尿等。大面积肌肉损伤：如挤压伤综合征、电灼伤、多发性肌

3、炎，进行性肌肉萎缩等。酶类增高：如急性单核细胞白血病尿溶菌酶增高，胰腺炎严重时尿淀粉酶增高等。补体的代谢平衡补体的代谢平衡是 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床检验技士考试复习需了解的知识，环球 HYPERLINK /yiyao/ t _blank 医学网搜集整理了相关内容与考生分享，希望给予大家帮助!和其他血蛋白一样，补体在机体内受各种因素的调节，维持其含量的相对平衡。补体成分可被血中的蛋白酶直接降解，在病理情况下补体的代谢速率反映补体的激活程度。补体活化后的酶解片段迅速在体液中失活，并很快地从循环中清除，沉着于细胞表面及组织中会被消耗或分解，例如C3在C3转化酶的作用

4、下，生成有活性的C3a和C3b，C3b降解为无活性的iC3b，再裂解为C3c和C3dg，最后降解为C3d和C3g.血中的其他补体成分也有相似的代谢方式。在不同疾病的进展过程中，补体的代谢速度变化非常大。 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床观察补体含量时应取不同时期的标本进行动态观察，才能了解补体的动态变化。另外，补体的正常水平存在很大的个体差异，补体成分的更新也较快，故单凭测定补体成分含量，有时很难反映补体系统的激活情况，现主张应用测定补体单个成分及其相应裂解产物的方式，例如测定血清C3a、C5c、C3d等。补体碎片的连续测定，对预报有关疾病活动情况是很有价值的。补体血清

5、水平的变化对有关疾病的诊断具有重要意义，例如系统性红斑狼疮和肾小球肾炎时，由于补体系统被 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫复合物过度激活，导致C3接近耗竭，其他补体成分也减少;临床症状改善后，其含量又回升。遗传性血管神经性水肿时由于C1INH缺陷导致C4过度消耗，造成补体含量下降;肝病患者由于肝功能障碍导致蛋白合成能力下降，出现低补体血症。这些患者均有不同程度的对传染病和化脓性细菌的易感性增高;另一方面在发生感染时，常出现代偿性的血液补体含量升高，以抵抗外来微生物的侵入。淀粉酶的 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床意义淀粉酶的 HYPERL

6、INK /lcys/ t _blank 临床意义是 HYPERLINK /yiyao/ t _blank 医学检验技士考试中需要了解的内容，环球医学网小编整理了相关知识点，以便大家方便复习。淀粉酶的临床意义：1)血清淀粉酶升高：(1)急性胰腺炎：最常见于急性胰腺炎，发病后2-12h活性开始升高，12-72h达峰值，3-4天恢复正常。虽然淀粉酶活性升高程度并不一定和胰腺损伤程度相关，但升高程度愈大，患急性胰腺炎的可能性愈大。怀疑急性胰腺炎时应连续监测淀粉酶，并结合其他检查，如胰脂肪酶、胰蛋白酶等。(2)急腹症：其他急腹症也可引起淀粉酶活性升高。(3)慢性胰腺炎：慢性胰腺炎时淀粉酶活性可轻度升高或

7、降低，但没有很大诊断意义。(4)胰腺癌：胰腺癌早期淀粉酶活性也可升高。2)尿淀粉酶升高：血液中淀粉酶能被肾小球滤过，血清淀粉酶升高时，都会使尿中淀粉酶排出量增加，其升高可早于血淀粉酶，下降晚于血淀粉酶。3)淀粉酶同工酶：血清淀粉酶来源于胰腺，及唾液腺和许多其他组织，所以淀粉酶活性升高时，同工酶测定有助于疾病鉴别诊断。P-同工酶升高或降低时，可能有胰腺疾患;S-同工酶变化可能是源于唾液腺或其他组织。淀粉酶的测定结果受方法的影响较大，不同方法参考值不同，必须了解所用测定方法和参考值，才能做出正确的诊断。成分输血的特点成分输血的特点是 HYPERLINK /yiyao/ t _blank 医学检验技

8、士考试中需要了解的内容，环球医学网小编整理了相关知识点，以便大家方便复习。输全血有时可能既达不到治疗的目的，又全引起某些副作用，而对血液也是一种浪费。例如患血小板减少的或粒细胞减少症，输全血很难达到提高血小板及白细胞数量的目的。如大量输血，又会因血容量的增加而增加心脏的负担。所经，从本世纪70年代开始采用成分输血，并取得了显著的效果。成分输血的优点：提高疗效，患者需要什么成分，就补充什么，特别是将血液成分提纯，浓缩而得到高将近价的制品;减少反应，血液成分复杂，有多种抗原系统，再加上血浆中的各种特异抗体，输血更容易引起各种不良反应;合理使用，将全血分离制成不同的细胞(红细胞、白细胞、血小板)及血

9、浆蛋白(白蛋白、 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫球蛋白、凝血因子等)成分，供不同的目的就应用;经济，既可节省宝贵的血液，又可减少的经注意到负担。开展成分输血首先在解决成分问题，分离各种细胞成分可以用塑料袋离心沉降的方法，也可用细胞单采仪器。细胞单采机可以从一个供血者采取多量的折细胞或血小板，这种方法可以减少由多个血源而引起的输血免疫反应的机会。目前我国已普通开民兵成分血液的制备，但由于条件及仪器的不同，制备方法也有差异。交叉配合试验方法及意义传统的交叉配合(crossmatching)试验是检测受者体内是否存在抗供者的特异性抗体，现在可同时检测受者对供者LD抗

10、原的相容程度。不管是否已经进行过各种HLA分型试验，交叉配合试验对选择移植物都有一定的参考价值。1.微量细胞毒试验：用供者的淋巴细胞作靶细胞，与受者的血清进行CDC;出现阳性反应说明受者体内含有抗供者的特异性抗体，移植后很有可能发生超急排斥反应。若要明确受者的抗体是抗类抗原还是抗类抗原，可以将供者的淋巴细胞进一步分离出较纯的T细胞和B细胞分别进行检测;若要排除患者自身抗体的影响，可以用患者自己的细胞与自已的血清进行试验作为对照。交叉配合是移值前必须做的一个检验项目;对一些曾经接触过移植抗原的受者，例如多次接受输血者、经产妇、有不成功移植史或接受过血清透析治疗者，尤其要进行审慎的检验。2.流式细

11、胞仪检测：将供者淋巴细胞与受者血清共育后，用荧光标记的抗人Ig对结合有抗体的细胞染色，在流式细胞仪上进行荧光标记测定。该法比微量细胞毒法的灵敏度高100倍，有条件的单位可以优先考虑使用。3.混合淋巴细胞培养：将供者与受者的淋巴细胞做双向混合培养，或者灭活供者的淋巴细胞做向混合培养，细胞反应的程度与供-受者相容的程度呈负相关。4.细胞介导的淋巴细胞毒试验：检测受者对移植物可能发生的细胞介导的淋巴细胞毒作用(cell-mediatedlymphocytotoxicity，CML)。将受者淋巴细胞与灭活的供者淋巴细胞做常规单向MLC，收获致敏的受者淋巴细胞后，再与51Cr标记的、PHA刺激的供者淋巴

12、细胞做CML试验;51Cr释放的程度与供-受者相容程度呈负相关积液的 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫学检查意义1.C-反应蛋白(CRP)感染性和恶性积液CRP含量明显增高。因此，CRP对诊断感染性、恶性积液及鉴别渗出液和漏出液有重要价值。漏出液CRP10mg/L，其灵敏度和特异性均为80%左右。2.肿瘤标志物(1)癌胚抗原：癌胚抗原(CEA)常采用ELISA、放射免疫或化学发光法检测。恶性积液CEA明显增高。动态检测CEA，并与血清CEA相对照，对恶性肿瘤诊断的符合率可达80%.当积液中CEA20g/L，积液CEA/血清CEA比值1.0时，应高度怀疑为恶性积液

13、，且CEA对腺癌所致的积液诊断价值最高。(2)甲胎蛋白(AFP)：常用ELISA、放射免疫或化学发光法检测AFP.血清AFP对原发性肝癌和胚胎性肿瘤的诊断价值较大。积液中AFP含量与血清浓度呈正相关，当腹腔积液AFP25g/L时，对诊断原发性肝癌所致的腹水有重要价值。淋巴细胞时人体主要的 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫细胞之一。(1)生理性增多：外周血淋巴细胞绝对值成人410 9/L、儿童7.210 9/L、4岁以下9109/L。见于儿童期淋巴细胞生理性增多。(2)病理性增多：见于急性传染病(如风疹、流行性腮腺炎、传染性淋巴细胞增多症、传染性单核细胞增多症、百

14、日咳等)、某些慢性感染(如结核病等)、肾移植术后(如发生排异反应)、白血病(如淋巴细胞性白血病、白血性淋巴肉瘤)、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症。1)传染性单核细胞增多症：由EB病毒引起的急性或亚急性良性淋巴细胞增多性传染病，WBC正常或轻度增高，早期以中性粒细胞增多为主，随后淋巴细胞增多(50%97%)，异型淋巴细胞在发病45d出现，710d达高峰，多数10%20%，12个月后消退。2)百日咳：淋巴细胞达3010 9/L，范围为(870)10 9/L，以CD4阳性细胞为主。3)肾移植术后：发生排异反应前，淋巴细胞绝对值增高。4)白血病：慢性淋巴细胞性白血病，以白血病性成熟淋巴细胞为主。急性淋巴

15、细胞性白血病和白血性淋巴肉瘤，以原、幼淋巴细胞为主。(3)减低：见于接触放射线、应用肾上腺皮质激素、促肾上腺皮质激素、严重化脓性感染、艾滋病、传染性非典型肺炎等。单核细胞增多在 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床上常见于感染、血液病等。(1)生理性增多：外周血单核细胞绝对值计数超过0.810 9/L。儿童外周血单核细胞较成人稍多，平均为9%，出生后2周婴儿可呈生理性单核细胞增多，可达15%或更多，妊娠时生理性增高与中性粒细胞变化相平行。(2)病理性增多：见于某些感染(如亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病等)、急性感染恢复期、活动性肺结核(如严重的浸润性和粟粒性结核)、某些

16、血液病(如粒细胞缺乏症恢复期、恶性组织细胞病、淋巴瘤、单核细胞白血病、骨髓增生异常综合征)。1)某些感染：WBC达2010 9/L以上，外周血单核细胞明显增多，达30%以上，以成熟单核细胞为主。2)某些血液病：粒细胞缺乏症恢复期可见单核细胞一过性增多。3)恶性组织细胞病、淋巴瘤、单核细胞性白血病：可见幼单核细胞增多。中性粒细胞减低：当中性粒细胞绝对值低于1.5109/L，称为粒细胞减低症，低于0.5109/L时，称为粒细胞缺乏症。1)某些感染：如伤寒、副伤寒、流感等。如无并发症，WBC减低(2109/L)，与细菌内毒素、病毒作用使边缘池粒细胞增多，循环池粒细胞减低，或抑制骨髓释放粒细胞等有关。

17、2)血液病：如典型的再生障碍性贫血、少数急性白血病。如典型再生障碍性贫血，呈“三少”(红细胞、白细胞和血小板均减低)，WBC低于1109/L，以淋巴细胞为主。当中性粒细胞绝对值0.5109/L时，感染危险性极高，0.2109/L时，预后很差。3)慢性理化损伤：如电离辐射(X线等)、长期服用氯霉素后，可抑制骨髓细胞有丝分裂使WBC减低。 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床上，药物性中性粒细胞减低症很常见，与 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫、细胞毒性、过敏体质有关，儿童和年轻人约占10%，老年人约占50%，有药物过敏史者更易受累，女性比男性易

18、发病，在用药早期中性粒细胞就减低，停药47d后，中性粒细胞恢复正常。4)自身 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫性疾病：如系统性红斑狼疮(SLE)，约60%患者WBC为(25)109/L，中性粒细胞绝对值减低。5)脾功能亢进：如门脉性肝硬化、班替综合征。机制为脾脏单核-吞噬细胞系统破坏白细胞，或肿大脾脏能分泌过多脾素，灭活促粒细胞生成因子。造血干细胞的特性包括：造血干细胞的起源，造血干细胞的形态，造血干细胞的表面标志。一、造血干细胞的起源造血干细胞(hemopoietic stem cell ，hsc )是存在于造血组织中的一群原始造血细胞，它不是组织固定细胞，可

19、存在于造血组织及血液中。造血干细胞在人胚胎2周时可出现于卵黄囊，第4 周开始转移至胚肝，妊娠5 个月后，骨髓开始造血，出生后骨髓成为干细胞的主要来源。在造血组织中，所占比例甚少，如在小鼠骨髓中105 核细胞中的有10个，在脾中105 有核细胞中只有0.2 个。二、造血干细胞的形态干细胞是一种嗜碱性独核细胞，其大小约为8 m ，呈圆形，胞核为圆形或肾形，胞核较大，具有2 个核仁，染色质细质而分散，胞浆呈浅蓝色不带颗粒，在形态上与小淋巴细胞极其相似，但淋巴细胞体积较小，染色质浓染，核仁不明显且有细胞器。因此很难用形态学识别干细胞，并与其它独核细胞相区别。造血干细胞可包括三级分化水平，即多能干(pl

20、euripotentstem cell)，定向干细胞(committed stem cell)及其成熟的子代细胞。关于对造血干细胞的功能分析，长期以来仅限于对小鼠干细胞的研究，而对人干细胞的存在只是来自间接证据，因为不能在人体内进行如鼠体内的功能分析法。70年代以来，由于建立了新的体外细胞培养技术，大大促进了对人干细胞的直接研究。三、造血干细胞的表面标志由于造血组织中造血干细胞在形态学方面无法与其它单核细胞区别，而且数量极少，这为造血干细胞的分离纯化并对其功能分析和分化的研究造成极大困难。近年来由于单克隆抗体技术的进步，流式细胞仪(facs)的应用，以及对小鼠和人造血干细胞表面标志的研究，取得

21、了很大进展，为造血细胞的分离纯化及鉴定创造了条件。1.thy-1 与丝裂原(wheat germ agglutinin ，wga ) visseer等发现小鼠骨髓中造血干细胞对wga 有高亲和性。利用这一特性，应用facs自骨髓中分离造血干细胞应及核系mac-1 等谱系抗原与wga 反应性相结合，即可自骨髓中lin-/wga+细胞群中分离造血干细胞，也获得良好结果。也有学者发现正常小鼠骨髓细胞中，也能表达低密度thy-1 抗原(thy-11. )。如与上述标志组合，即自骨髓thy-11.lin- ，wga+细胞群中，分离造血干细胞，可用于对造血细胞的功能分析。2.干细胞抗原(stem cell

22、antigen-1，sca-1 )有学者制备一种抗原前t 细胞杂交瘤的单克隆抗体，用这种单抗检出的抗原分子称为干细胞抗原-1(sca-1 )。其后有人自骨髓中thy-1io 、lin-、sca-1+细胞群中，可分离纯人造血干细胞。3.原癌基因(c-kit )最近证明造血干细胞与c-kit 基因密切相关。c-kit可编码一种穿膜酪氨酸激酶受体分子。应用单克隆抗体证明此分子可存在于造血干细胞膜上，其后证明它的配体分子是造血干细胞因子(stem cell factor，scf)。它是信号传导分子，对造血干细胞的分化具有重要作用。目前，小鼠多能干细胞表面分子标志可视为thy-1io 、wga+、c-k

23、it+、lin-. c-kit 分子可高频率表达于多能干细胞表面，但骨髓中c-kit+细胞可分化为各种血细胞，而胸腺中c-kit 细胞可分化为淋巴细胞，不能分化为髓系细胞，所以胸腺内c-kit+细胞，可能是淋巴样干细胞。4.cd34对人体造血干细胞表面标志的研究，是用单克隆抗体cd34证明的。cd34单克隆抗体检测的抗原即为cd34分子。自人骨髓细胞中应用facs可分离纯化cd34+细胞群，如与造血因子共同体外培养可获得含有各种血细胞的混合集落，所以cd34+细胞为骨髓中造血干细胞，cd34抗原可视为骨髓造血细胞标志之一。造血干细胞是体内各种血细胞的唯一来源，它主要存在于骨髓、外周血、脐带血中

24、。造血干细胞是体内各种血细胞的唯一来源，它主要存在于骨髓、外周血、脐带血中。今年年初，协和医大血液学研究所的庞文新又在肌肉组织中发现了具有造血潜能的干细胞。造血干细胞的移植是治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性和转移性恶性肿瘤疾病的最有效方法。在 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床治疗中，造血干细胞应用较早，在20世纪五十年代， HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床上就开始应用骨髓移植(BMT)方法来治疗血液系统疾病。到八十年代末，外周血干细胞移植(PBSCT)技术逐渐推广开来，绝大多数为自体外周血干细胞移植(APBSCT)，在提高治疗有效率和缩

25、短疗程方面优于常规治疗，且效果令人满意。与两者相比，脐血干细胞移植的长处在于无来源的限制，对HLA配型要求不高，不易受病毒或肿瘤的污染。在今年初，东北地区首例脐血干细胞移植成功，又为中国造血干细胞移植技术注入新的活力。随着脐血干细胞移植技术的不断完善，它可能会代替目前APBSCT的地位，为全世界更多的血液病及恶性肿瘤的患者带来福音。嗜碱性粒细胞：嗜碱性粒细胞(basoophilic granulocyte，basophil)数量最少，占白细胞总数的015.细胞呈球形，直径10-12m.胞核分叶或呈S形或不规则形，着色较浅。胞质内含有嗜碱性颗粒，大小不等，分布不均，染成蓝紫色，可覆盖在核上。颗粒

26、具有异染性，甲苯胺蓝染色呈紫红色。电镜下，嗜碱性颗粒内充满细小微粒，呈均匀状或螺纹状分布。颗粒内含有肝素和组胺，可被快速释放;而白三烯则存在于细胞基质内，它的释放较前者缓慢。肝素具有抗凝血作用，组胺和白三烯参与过敏反应。嗜碱性粒细胞在组织中可存活12-15天。单核细胞：单核细胞(monocyte)占白细胞总数的3%8%.它是白细胞中体积最大的细胞。直径1420m，呈圆形或椭圆形。胞核形态多样，呈卵圆形、肾形、马蹄形或不规则形等。核常偏位，染色质颗粒细而松散，故着色较浅。胞质较多，呈弱嗜碱性，含有许多细小的嗜天青颗粒，使胞质染成深浅不匀的灰蓝色。颗粒内含有过氧化物酶、酸性磷酸酶、非特异性酯酶和溶

27、菌酶，这些酶不仅与单核细胞的功能有关，而且可作为与淋巴细胞的鉴别点。电镜下，细胞表面有皱褶和微绒毛，胞质内有许多吞噬泡、线粒体和粗面内质网，颗粒具溶酶体样结构。单核细胞具有活跃的变形运动、明显的趋化性和一定的吞噬功能。单核细胞是巨噬细胞的前身，它在血流中停留1-5天后，穿出血管进入组织和体腔，分化为巨噬细胞。单核细胞和巨噬细胞都能消灭侵入机体的细菌，吞噬异物颗粒，消除体内衰老损伤的细胞，并参与 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫，但其功能不及巨噬细胞强。血小板的介绍血小板(blood platelet)或称血栓细胞(thrombocyte)， 正常数值为10万30

28、万/1.它是骨髓中巨核细胞胞质脱落下来的小块，故无细胞核，表面有完整的细胞膜。血小板体积甚小，直径24m，呈双凸扁盘状;当受到机械或化学刺激时，则伸出突起，呈不规则形。在血涂片中，血小板常呈多角形，聚集成群。血小板中央部分有着蓝紫色的颗粒，称颗粒区(granulomere);周边部呈均质浅蓝色，称透明区(hyalomere)。电镜下，血小板的膜表面有糖衣，细胞内无核，但有小管系、线粒体、微丝和微管等细胞器，以及血小板颗粒和糖原颗粒等。血小板在止血和凝血过程中起重要作用。血小板的表面糖衣能吸附血浆蛋白和凝血因子，血小板颗粒内含有与凝血有关的物质。当血管受损害或破裂时，血小板受刺激，由静止相变为机

29、能相，迅即发生变形，表面粘度增大，凝聚成团;同时在表面第因子的作用下，使血浆内的凝血酶原变为凝血酶，后者又催化纤维蛋白原变成丝状的纤维蛋白，与血细胞共同形成凝血块止血。血小板颗粒物质的释放，则进一步促进止血和凝血。血小板还有保护血管内皮、参与内皮修复、防止动脉粥样硬化的作用。血小板寿命约714天。血液中的血小板数低于10万/1为血小板减少，低于5万/1则有出血危险。血小板颗粒有两种：特殊颗粒和致密颗粒。特殊颗粒又称颗粒，体积较大，圆形，电子密度中等，内含凝血因子、酸性水解酶等。致密颗粒较小，电子密度大，内含5-羟色胺、ADP、ATP、钙离子、肾上腺素等。两种颗粒内容物的释放均与血不板功能有关。

30、血小板小管系也有两种：开放小管系和致密小管系。开放小管系散在分布，管腔明亮，开口于血小板表面，借此摄取血浆物质和释放颗粒内容物。致密小管系是封闭的小管，多分布在血小板周边，管腔电子密度中等，能收集钙离子和合成前列腺素等。血小板周边有环行排列的微丝和微管，与血小板的形态变化有关。血液抗凝剂选择抗凝是用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固。能够阻止血液凝固的物质，称为抗凝剂或抗凝物质。常用抗凝剂和使用方法如下。1.乙二胺四乙酸(EDTA)盐常用有钠盐或钾盐，能与血液中钙离子结合成螯合物，使ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。根据国际血液学标准化委员会(ICSH)建议，

31、CBC抗凝剂用量为EDTA-K.2H2O 1.52.2mg/ml血液。不适于凝血检查、血小板功能试验。2.草酸盐常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵，溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。2mg草酸盐可抗凝lml血液。但不适于凝血检查。而且，草酸盐浓度过高还会导致溶血、改变血液pH，干扰血浆钾、钠、氯和某些酶活性的测定。双草酸盐抗凝剂：适用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等检查，不适于血小板计数、白细胞分类计数。3.肝素是加强抗凝血酶(AT-)灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。肝素是红细胞透渗脆性

32、试验的理想抗凝剂。但不适于CBC、细胞形态学检查。每毫升血液肝素用量为(152.5)U，多为肝素钠盐或钾盐。4.枸橼酸盐常用有枸橼酸钠，能与血液中钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。枸橼酸盐抗凝剂的抗凝力不如上述抗凝剂。枸橼酸钠与血液的抗凝比例为l：9或1：4.适用于红细胞沉降率、凝血检查，是输血保养液的成分。血细胞阻抗法的价值根据库尔特原理，将不良导体血液按一定比例稀释于等渗的电解液中，在小孔电极的两侧加一恒流源。在负压作用下，使稀释的血细胞通过小孔。当细胞通过截面时会由于电阻增大产生相应的脉冲，其脉冲的幅度与细胞的体积成正比，脉冲的频度与细胞的数量成正比。这便是著名的库尔特原理或称变阻脉冲

33、原理。利用库尔特原理可以有效地区分淋巴及单核细胞。-微球蛋白的定量检查方法及意义正常脑脊液中含有2-MG，其水平在1.510.72mg/L.许多研究表明，CSF中2-MG可用于预报中枢神经系统白血病和淋巴瘤的复发。中枢神经系统白血病和淋巴瘤复发者CSF的2-MG的改变较细胞学诊断早48周，其2-MG水平升高显著;白血病和淋巴瘤累及中枢神经系统时，CSF的2-MG明显高于未受累者，经化疗后，2-MG水平随症状体症消失而恢复正常，故2-MG可作为中枢神经系统是否受累的诊断依据和疗效监测指标。中枢神经系统感染时，CSF的2-MG增高，细菌性较病毒性升高明显，结核性较化脓性升高更加明显，故在病原体检出

34、困难，CSF常规检查不典型时，CSF的2-MG检查对诊断有参考价值。急性脑梗塞患者脑脊液的2-MG明显增高，有严重偏瘫的大面积梗塞患者升高更显著，经治疗后2-MG下降;故2-MG测定对本病的病情判断和疗效观察有参考价值。 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床实验室常用的方法有酶免法和放免法。脑脊液蛋白电泳原理/试剂1、原理与血清蛋白电泳相同，利用各种蛋白质在电场作用下迁移率不同来进行检测。由于CSF蛋白质含量较低，电泳前须进行浓缩处理。一般采用透析法浓缩，将CSF加入透析袋内，置于吸水的透析液中，CSF中的水分移至透析液内，CSF的蛋白质浓度增加后，再进行电泳分析。2、试剂

35、与器材(1)器材透析膜可商品化购买，亦可用玻璃纸袋;电泳设备同血清蛋白电泳。(2)试剂透析液为聚乙二醇20000氯化钠溶液：称取聚乙二醇2000030.0g，氯化钠0.9g，加90ml蒸馏水溶解，再加巴比妥缓冲液(pH8.6，0.05mol/L)10ml，混匀，溶液pH为7.4.透析液亦可用500g/L的右旋糖酐溶液。3.方法先将CSF加入透析袋内，放入聚乙二醇20000氯化钠溶液中，室温透析67小时(如用500g/L的右旋糖酐溶液，透析24时需15小时)，浓缩至0.050.1ml即可。浓缩的脑脊液按血清蛋白电泳的方法进行电泳分析。正常脑脊液蛋白电泳带与血清蛋白电泳带有不同之处：脑脊液出现较多

36、的前白蛋白而血清中较少;CSF的-球蛋白略高于血清;-球蛋白仅为血清的一半。总蛋白定量测定/原理/方法1、原理磺基水杨酸为生物碱试剂，能沉淀蛋白质，但对白蛋白的沉淀能力比球蛋白强，加适量硫酸钠后，沉淀白、球蛋白的能力趋于一致，与标准蛋白浊度对比进行定量测定。2、试剂磺基水杨酸-硫酸钠试剂(SS-S)磺基水杨酸3.0g无水硫酸钠7.0g蒸馏水加至100ml过滤后，储存于棕色瓶中，如显色或混浊则不能用。3、方法(1)制备标准曲线含蛋白200、400、800、1200、1600mg/L的稀释混合人血清标准系列各0.5ml，加SS-S试剂4.5ml，充分混匀，715分钟后，用420nm波长比浊，以吸光

37、度为纵坐标，蛋白质浓度为横坐标，绘制标准曲线。(2)样品检测取待测脑脊液标本各0.5ml于两只试管中，其中一只试管加SS-S试剂4.5ml，另一试管加154mmol/L的NaCl溶液4.5ml作为标本空白管。在与标准曲线相同的条件下比浊，所得得吸光度可从标准曲线上求得蛋白质浓度。4、注意事项(1)脑脊液如有多量细胞或混浊，应先离心以除去。如蛋白质浓度过高，应先行用生理盐水稀释后重新测定。(2)加入SS-S试剂的操作手法和速度、室温及比浊前的放置时间都会影响实验结果。故操作时应注意控制加入试剂的方式和比浊时间与标准管一致。应随气温改变，勤作标准曲线。5、正常参考值腰穿CSF蛋白含量：0.20.4

38、g/L池穿CSF蛋白含量：0.10.25g/L侧脑室穿刺CSF蛋白含量：0.050.15g/L脑脊液蛋白质含量与年龄成正比，儿童含量较低，成人稍高，老年人又比成年人高。6、 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床意义脑脊液蛋白质含量增高，为血脑屏障被破坏的标志。颇受 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床工作者的重视。蛋白质含量增高常见于下列情况：(1)中枢神经系统炎症。脑部感染时，脑膜和脉络丛毛细血管通透性增加，蛋白质分子容易透过，首先是白蛋白增高，随后是球蛋白和纤维蛋白增高。(2)神经根病变。如急性感染性多发性神经炎(Guillain-Barre综合征)

39、，多数病例有蛋白质增高，而细胞数正常或接近正常，即蛋白-细胞分离现象。(3)椎管内梗阻。脑与蛛网膜下腔互不相通，血浆蛋白由脊髓中的静脉渗出，CSF蛋白质含量显著增高，有时高达3050g/L，这时CSF变黄，可自行凝固。如脊髓肿瘤、转移癌、粘连性蛛网膜炎等。此外，早产儿CSF蛋白含量可达2g/L，新生儿为0.81.0g/L，出生两个月后逐渐降至正常水平。含血的CSF蛋白质含量增高。为了鉴别原来有无蛋白质增高，可用每升红细胞700106个约相当增加蛋白质量0.01g/L来推算，用含血CSF的蛋白质含量减去含红细胞数折算成的蛋白质含量，即为原来CSF的蛋白质含量。网织红细胞生成指数的 HYPERLI

40、NK /lcys/ t _blank 临床意义网织红细胞的生成指数(RPI)是网织红细胞生成相当于正常人的倍数。不同生理、病理情况下，Ret从骨髓释放人外周血所需时间不同，故Ret计数值不能确切反映骨髓红细胞系统造血功能，还应考虑Ret生存期限。通常Ret生存期限约为2d，若未成熟网织红细胞提前释放人血，Ret生存期限将延长，为了纠正网织红细胞提前释放引起的偏差，用网织RPI来反映Ret生成速率。计算公式为：RPI=被测Hct/正常人Hct1/2被测网织红细胞百分比。在估计红细胞生成有效性方面，使用RPI较准确。关节积液【正常参考值】淡黄色或草黄色。【 HYPERLINK /lcys/ t _

41、blank 临床意义】1.红色：见于穿刺损伤或血友病的病理出血，如血友病色素性绒毛结节性滑膜炎等。2.乳白色：见于结核性关节炎、急性痛风性关节炎或红斑狼疮病。3.绿色：见于化脓性关节炎、慢性类风湿性关节炎、痛风。HLA1.器官移植：HLA配型的作用为：在肾移植中，供受双方共有的DR抗原越多，或已检出的DR错配抗原数越少，移植存活率就越高。在移植前输血的患者中，DR配型能提高存活率。骨髓移植前不宜输血，以防受体被 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫。心、肝、肺等器官的移植，多用于生命垂危的患者，主要要求AB0血型相同。2.输血：成分输血疗法时，如HLA同型血液，则能

42、提高疗效。 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床输血的发热反应中，有些是由HLA抗体引起，尤其是多次输血的患者，HLA抗体可以破坏白细胞，为避免HLA引起输血反应，可在输血前做交叉淋巴细胞毒试验。在70%的非溶血性输血反应是发热反应，一般认为是白细胞被HLA抗体破坏后释放致热原物质所致。可先将白细胞过滤后再输血病毒的细胞 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫1.CTL通过细胞裂解和细胞凋亡两种机制，直接杀伤靶细胞。在多数病毒感染中，因CTL可杀伤靶细胞达到清除或释放在细胞内复制的病毒体，从而在抗体的配合下清除病毒，因此被认为是终止病毒感染的主要机

43、制。CTL还可通过分泌多种细胞因子，如IFN-、TNF等而发挥抗病毒作用。2.活化的细胞释放IFN-，TNF等多种细胞因子，发挥抗病毒作用。真菌检验的生物学技术(一)、用PCR等技术字标本中扩增真菌DNA.国内应用PCR与反向斑点杂交快速检测及鉴定念珠菌主要种别。国外可以用PCR-DEIA技术从血清中扩增出白色念珠菌的DNA来诊断念珠菌病。针对真菌的共同序列而设计的全能引物(pan-primer)而扩增580bp的产物，为真菌所共有。检测血液标本即可明确体内有无真菌感染。(二)、用于真菌的型别分析。国内应用随机引物PCR扩增后进行真菌分型，结果可靠。应用随机引物扩增物多态性分析(RAPD)可以

44、将5种曲霉菌鉴别开(烟、黄、黑、土、构巢曲霉)。国外结合PCR与酶标记探针在纸条上进行检测(LiPA，lineprobeassay)可鉴别出主要的致病性真菌。(三)、检出念珠菌的基因变异快速确定念珠菌对酮康唑的耐药性。此种耐药性由基因的1554T突变为C而致，应用Lightcycler仪器，以荧光共振能量转移和基因片段溶解温度曲线技术测定。单核细胞计数的定义单核细胞(moncyte)占白细胞总数的3-8%，骨髓多能造血干细胞分化为髓系干细胞和粒-单系祖细胞之后进而发育为原单核细胞、幼单核细胞及单核细胞，后者逐遂可释放至外周血中。循环血内的单核细胞并非终末细胞，它在血中的停留只是暂的，3-6天后

45、进入组织或体腔内，可转变为幼噬细胞，再成熟为巨细胞。因此单核细胞与组织中的巨噬细胞构成单核巨噬细胞系统，而发挥防御功能。流行性感冒病毒的结构流行性感冒病毒(简称流感病毒)呈球形或丝状。结构由内至外分为3部分：1.核心是单负股RNA(78个片段)，与核蛋白组成核糖蛋白(RNP)，并含有RNA多聚酶。核糖蛋白即核衣壳，呈螺旋对称。核蛋白抗原很少发生变异，具有型特异性;2.基质蛋白(M蛋白)位于包膜与核心之间，抗原性稳定，亦具有型特异性;3.包膜包膜表面有两种病毒编码的糖蛋白刺突，一种称血凝素(HA)，另一种称神经氨酸酶(NA)，是划分流感病毒亚型的依据，其抗原性易发生变异。HA能与鸡、豚鼠、人等的

46、红细胞表面受体结合引起红细胞凝集，简称血凝。HA具有 HYPERLINK /lcys/606/ t _blank 免疫原性，其相应抗体能抑制血凝现象和中和病毒，是主要保护性抗体。溶细胞型感染溶细胞型感染多见于无包膜病毒。如脊髓灰质炎病毒、腺病毒等。其机制主要有：阻断细胞大分子物质合成，病毒蛋白的毒性作用，影响细胞溶酶体和细胞器的改变等。溶细胞型感染是病毒感染中较严重的类型。靶器官的细胞破坏死亡到一定程度，机体就会出现严重的病理生理变化基侵犯重要器官则危及生命或留下严重的后遗症。狂犬病病毒致病性病毒的动物感染范围较广。在易感动物或人的中枢神经细胞中增殖时，在胞质内形成嗜酸性包涵体，称内基小体，在

47、诊断上很有价值。在动物发病前5天，唾液中可含有病毒。人被犬咬伤后，病毒通过伤口进入体内。潜伏期一般为13个月，人发病时的典型 HYPERLINK /lcys/ t _blank 临床表现是神经兴奋性增高，吞咽或饮水时喉头肌肉发生痉挛，故又称恐水症。经35天后，病人转入麻痹期，最后因昏迷、呼吸、循环衰竭而死亡。死亡率几乎达100%.人被犬等动物咬伤后，应将动物捕获隔离观察。若经57天不发病，一般可认为该动物不是狂犬病或咬人时唾液中尚无狂犬病病毒。真菌检验的生物学技术(一)、用PCR等技术字标本中扩增真菌DNA.国内应用PCR与反向斑点杂交快速检测及鉴定念珠菌主要种别。国外可以用PCR-DEIA技

48、术从血清中扩增出白色念珠菌的DNA来诊断念珠菌病。针对真菌的共同序列而设计的全能引物(pan-primer)而扩增580bp的产物，为真菌所共有。检测血液标本即可明确体内有无真菌感染。(二)、用于真菌的型别分析。国内应用随机引物PCR扩增后进行真菌分型，结果可靠。应用随机引物扩增物多态性分析(RAPD)可以将5种曲霉菌鉴别开(烟、黄、黑、土、构巢曲霉)。国外结合PCR与酶标记探针在纸条上进行检测(LiPA，lineprobeassay)可鉴别出主要的致病性真菌。(三)、检出念珠菌的基因变异快速确定念珠菌对酮康唑的耐药性。此种耐药性由基因的1554T突变为C而致，应用Lightcycler仪器，

49、以荧光共振能量转移和基因片段溶解温度曲线技术测定。分析范围评价（线性试验）这种参数指的是“方法应用未经修改样本的浓度范围或其他量”。通过线性试验，即候选方法检测含较宽范围的特定分析物量的参考溶液。理想情况下，校准曲线（响应对分析物浓度之间关系图）应该是线性并通过原点。如果曲线是线性，检测范围被称为方法的线性范围。如果无法获得线性响应，校准程序应使用较高校准溶液数量来足够地确定响应曲线医学教育网搜集整理，以及校准溶液应包括未知浓度。方法的分析范围应足够的宽包括没有预稀释期望样本的95%至99%。正如美国临床实验室改进修正案1988最终规则（CLIA88）所规定，一旦已确认了方法的分析范围，它就是

50、方法的可报告范围。在检测过程中，反映测定结果的数据分布有两个规律：1.波动即重复某一检测，测定结果总是上下波动的，即是说测定的数据是在平均值上、下波动的，这是由于测定过程中一些条件的变化引起的，而这些变化又难以予先知道的。波动的大小取决于检测条件完善程度和对影响因素影响量的认识程度；2.分布即测定的数据都是按一定规律分布的，例如定量测定中，常呈正态分布，数据常在均值上、下分布，其离散的程度常用标准差来表示，因此均值及标准差就成为这一分布的两个特征值，也成为绘制质控图时两个基本依据。造成这种波动的原因有两大类：1.偶然因素所引起。这一因素在正常情况下也存在，故又称正常因素，其影响比较轻微且难以去

51、除，其分布在定量测定中常呈正态分布；2.系统因素（又称异常因素）所引起的。这一因素不是经常存在的，对检验结果影响较大，其原因可以找到并去除，其分布不呈正态分布。由于偶然因素引起的波动呈正态分布，而异常因素引起的波动不呈正态分布。Shewhart就是根据这一特点将统计学原理引进质量管理中，通过测定数据的分布可从偶然因素引起的波动中发现异常因素引起的波动，达到过程控制的目的。所以质控图实际上就是形状和位置改变了的正态分布图。对检验质量产生影响的有两类误差：1.测定均值偏离了“真值”或理想值称为系统误差：2.检测精度变差，也就是标准差变大，重复测定中重复性变差。造成的原因也是存在异常因素的缘故，但数

52、据分布常呈正态分布，故常称为随机误差。在统计学及误差理论中，随机误差与偶然误差是同义词，但在此处要注意其区别。这里随机误差是指变大了的偶然误差。常见的数据分布有三个类型：正态分布、二项分布、普哇松（Poisson）分布。在临床检验工作中定量分析属正态分布，医学教育网搜集整理白细胞分类属二项分布，细胞计数及细菌计数属普哇松分布。相应三种分布，质控图也有三个类型：用于正态分布时有xS控制图、xR控制图、xR控制图等；用于二项分布的有p控制图、pn控制图等；用于普哇松分布的有c控制图、u控制图等。Shewhart质控图对影响要素是全部控制的，即只要其中某一质量要素发生变化影响到质量时，它都能反映，故

53、又称全控图；但影响质量的某一要素非检测人员所能控制，检测人员只能控制其所能控制的质量要素，这种非全控的控制图称选控图，选控图是我国学者张公绪教授提出的，己广泛应用于工业、邮电、医疗卫生部门，在临床检验工作中也有着广泛用途。Shewhart质控图及选控图都是建立在统计学基础上的，此外还有一种不用统计方法设计和绘制质控图，它是根据质量标准合格与否绘制的质控图叫予控图。总之质控图的类型和种类是比较多的，我们常用的LeveyJennings质控图只是其中一种。Shewhart质控图主要用于工业生产领域，工业生产和临床实验室相比，有许多不同。上面已提及一些，同时相对于工业生产产品的数量而言，每天检测标本

54、只是“小批量”的，因此临床检验工作中通常用“小批量”产品的单值质控图，即xS质控图，且是通过质控品的测定来进行质控的。现在在临床检验中有一种情况，即不论数据呈何种分布，都采用正态分布的质控图，这是不正确的；另外定性分析并无必要一定要采取质控图法进行质控。实验室管理是整合和协调实验室资源以达到既定目标的过程。管理过程通常由计划、组织、领导和控制四个阶段组成。计划阶段主要指确定实验室工作目标，实行目标管理；组织阶段则是指对实验室内部的人、财、物等各种资源进行有效整合和分配；领导阶段是指实验室管理者应建立一系列规章医学教育网搜集整理、制度和标准，并依据有关规定领导实验室人员的具体工作；以建立的文件对

55、已做的工作进行对比检查，协调、控制整个检测过程，并修正已建立的目标及相关程序，此为控制阶段。管理过程中计划、组织、领导和控制并不是完全独立的，实际工作中管理者常常需要同时进行几项工作。管理过程的运行循环往复，可不断改进和完善。床检验对测试标本都有专门的要求，或是标本类型，或是抗凝剂种类，不一而足，操作者必须明确患者在受检前要注意或禁忌的事项，这是保证检验合理性的前提。由于方法学存在着差异，首先要了解在检测原理上对标本有哪些具体要求，如：光学法检测的仪器多数会受到标本中溶血和乳糜的干扰，化学显色法会受到外源性氧化还原物质的影响，这是分析前质量控制的重要环节。采血对象要处于空腹平静的状态，饱食和油

56、腻食物会干扰血小板因子和纤溶成分的测定；情绪紧张、激烈运动也将导致测量的偏差；血气分析时一定要使用动脉血，且应密封保存，还要注意送检过程中是否出现封套脱落等。尿液分析时必须保证标本新鲜，并核实患者是否服用药物，利尿剂可导致亚硝酸盐检验试验出现假阳性，尿液中污染甲醛等可使白细胞检验出现假阳性。血细胞压积高低的不同可能导致全血葡萄糖含量测定的差异，试剂中酶（氧化酶、脱氢酶、己糖激酶）的差异可能在方法学之间被进一步反应出来，甚至毛细管、静脉和动脉血之间的含氧差异也可能影响某些分析仪器的检测结果。若在医院做床旁检验，医护人员必须提醒患者注意相关事项并监测用药，以保证正确取样和处理标本医学教育网搜集|整

57、理。自行检验的患者也应该对标本采集要求有足够清晰的认识，无论患者是否曾向相关部门进行咨询，医务人员接触到这类患者时都有义务详细地介绍注意事项，尽量防止由于采样和处理的问题造成误判在常规分析过程中，使用标准物质对分析方法进行校准，是保证检测结果准确性的基础。标准物质又称参考物质，是一类充分均匀，并具有一个（或多个）确定的特性值的材料或物质。用以校准仪器、评价测量方法，或给其他物质赋值。标准物质的定值结果一般表示为：标准值？总不确定度。一级标准物质：稳定、均一。采用高度准确、可靠的方法定值，可用于校准决定性方法及为二级标准物质定值。在我国由国家技术监督局批准、颁布并授权生产。如血清无机成分分析标准

58、物质和血清胆固醇标准物质医学教育网搜集整理。二级标准物质：用一级标准物质校准，为参考方法定值。如红细胞微粒标准物质、胆红素标准物质等。校准品：用二级标准物质校准，为常规方法定值。用于对常规方法和仪器的校准。质控品：具有与检测过程相适应的特性，其成分与检测标本的基质相同或相似，主要用于室内质控。为了保证质控方法对系统性能提供独立的评价，必须将质控品与校准品分开，不因宜用质控品校准检测系统或检测方法。1.实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理、使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。2.进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽

59、、鞋，戴好口罩，非实验室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。3.实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、检修， 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。4.各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告；药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出医学教育网搜集整理。5.禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开实验室前认真检查水电，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。6.负责人严格执行本制度，出现问题立即报告，造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。实验室玻璃器皿管

60、理与使用制度：1.根据测试项目的要求，申报玻璃仪器的采购计划、详细注明规格、产地、数量、要求，硬质中性玻璃仪器应经计量验证合格。2.大型器皿建立账目，每年清查一次，一般低值易耗器皿损坏后随时填写损耗登记清单医学教育网搜集整理。3.玻璃器皿使用前应除去污垢，并用清洁液或2%稀盐酸溶液浸泡24 h后，用清水冲洗干净备用。4.器皿使用后随时清洗，染菌后应严格高压灭菌，不得乱弃乱扔实验室安全制度：1.进入实验室工作衣、帽、鞋必须穿戴整齐。2.在进行高压、干燥、消毒等工作时，工作人员不得擅自离现场，认真观察温度、时间，蒸馏易挥发、易燃液体时，不准直接加热，应置水浴锅上进行，试验过程中如产生毒气时应在避毒