临床免疫学检验：第2章 抗原抗体反应

1、第二章 抗原抗体反应(Chapter 2 Antigen-Antibody Reaction)临床免疫学检验主 要 内 容第一节 抗原抗体反应的原理1第二节 抗原抗体反应的特点2第三节 影响抗原抗体反应的因素3目录第四节 抗原抗体反应的类型4目录 抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。体内反应：体液免疫应答的效应作用 可介导吞噬、溶菌、杀菌、中和毒素、阻住病原体侵入组织细胞，介导免疫病理损伤。体外反应：抗原抗体体外特异性结合 根据抗原的物理性状、抗体类型、参与反应的成分，可表现为：凝集反应、沉淀反应、溶血反应等。第一节 抗原抗体反应的原理目录物质基础: - 抗原表位与抗体超

2、变区间的互补结合 - 抗原表位与抗体超变区的沟槽分子表面的结合 - 抗原抗体之间的结合力 - 亲水胶体转化为疏水胶体第一节 抗原抗体反应的原理目录一、抗原抗体结合力 抗原和抗体的结合为分子间结构互补的特异结合，是一种非共价的结合，不形成牢固的共价键。在抗原抗体特异结合后有四种分子间引力参与并促进其结合。静电引力范德华引力氢键疏水作用力第一节 抗原抗体反应的原理目录一、抗原抗体结合力静电引力（electrostatic forces）范德华引力:作用最小（van der Waals interactions）氢键: 最具特异性（hydrogen bond ）疏水作用力: 作用最大（hydroph

3、obic interactions） 抗原抗体结合力示意图第一节 抗原抗体反应的原理目录二、抗原抗体的亲和性与亲合力 抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位之间结合强度，抗原抗体的亲和力取决于两者空间构型互补的程度。亲和性 (affinity)第一节 抗原抗体反应的原理目录二、抗原抗体的亲和性与亲合力 指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度。与亲和性、抗体结合价、抗原的有效抗原表位有关。亲合力 (avidity)第一节 抗原抗体反应的原理目录三、亲水胶体转化为疏水胶体可见反应（凝集、沉淀）IC (疏水胶体)电解质 抗原(亲水胶体) 抗体(亲水胶体) +蛋白质（负电

4、荷） 水化层 亲水胶体H2O第一节 抗原抗体反应的原理目录三、亲水胶体转化为疏水胶体可见反应（凝集、沉淀）IC (疏水胶体)电解质 抗原(亲水胶体) 抗体(亲水胶体)亲水胶体疏水胶体转化NaCl可见反应 +第一节 抗原抗体反应的原理目录小结一、抗原抗体结合力静电引力、范德华引力、氢键、疏水作用力二、抗原抗体的亲和性和亲合力亲和性、亲合力三、亲水胶体转化为疏水胶体第二节 抗原抗体反应的特点目录特异性 可逆性比例性 阶段性目录 特异性是抗原与抗体结合反应的专一性。是指抗原分子上的抗原决定簇和抗体分子超变区结合的特异性。一、特异性第二节 抗原抗体反应的特点分子基础：抗原表位与抗体分子超变区之间空间构

5、型的互补性目录一、特异性第二节 抗原抗体反应的特点交叉反应（cross reactions）目录 可逆性是指抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性。二、可逆性第二节 抗原抗体反应的特点影响因素： 抗体对相应抗原的亲合力: 亲合力越高，结合越牢固，越不易解离 环境因素对抗原抗体复合物的影响：pH、离子强度目录 抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系。 是指抗原与抗体特异性结合反应时，生成肉眼可见结合物的量与反应物浓度的关系，只有当二者浓度比例适当时，才出现可见反应。三、比例性第二节 抗原抗体反应的特点目录三、比例性第二节 抗原抗体反应的特点前带(prezon

6、e)： 抗体过量后带(postzone)： 抗原过量等价带(equivalence zone)： 抗原抗体比例合适 目录四、阶段性第二节 抗原抗体反应的特点特异结合阶段可见反应阶段此阶段仅需数秒至数分钟，但并不出现可见的反应 这一阶段抗原抗体复合物在适当的电解质、PH、温度和补体等的影响下，进一步交联聚集，出现凝集、沉淀、溶解和补体结合介导的生物现象等肉眼可见的反应。 目录小结第二节 抗原抗体反应的特点特异性 可逆性比例性 阶段性目录第三节 影响抗原抗体反应的因素一、反应物自身因素1抗原 抗原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目均可影响抗原抗体反应的结果。目录第三节 影响抗原抗体反应的因素一

7、、反应物自身因素1抗原2抗体 抗体的来源、浓度、特异性与亲和性均可影响抗原抗体反应。目录第三节 影响抗原抗体反应的因素二、环境因素电解质: 生理盐水或缓冲液酸碱度: pH6pH8温 度: 1540，37最适 目录第三节 影响抗原抗体反应的因素三、对照的设置 抗原抗体反应的影响因素较多，因此应十分注意实验条件的选择和稳定化，必须严格设置好试验对照。对照是实验质量控制的手段之一，目的在于消除无关变量对实验结果的影响。目录第三节 影响抗原抗体反应的因素三、对照的设置对照类型：阳性对照(positive control) 组成应尽量与检测标本的组成相一致阴性对照(negative control) ：

8、不含待测物质空白对照(blank control) 标准品对照：45个浓度目录第三节 影响抗原抗体反应的因素小结一、反应物自身因素抗原、抗体二、环境因素电解质、酸碱度、温度等目录第四节 抗原抗体反应的类型取决于： 抗原、抗体的性质 反应条件 其他参与成分五种主要类型： 凝集反应 沉淀反应 补体参与的反应 中和反应 标记免疫反应目录第四节 抗原抗体反应的类型反应类型试验方法结果判断凝集反应直接凝集试验观察凝集现象间接凝集试验同上抗球蛋白试验同上沉淀反应液相沉淀试验观察沉淀，检测浊度免疫电泳技术观察扫描沉淀峰、沉淀弧补体参与的反应补体溶血试验观察测定溶血现象补体结合试验同上目录第四节 抗原抗体反应的类型反应类型试验方法结果判断中和反应病毒中和试验检测病毒感染性毒素中和试验检测外毒素毒性标记免疫反应荧光免疫技术检测荧光现象放射免疫技术检测放射性强度酶免疫技术检测酶底物显色发光免疫技术检测发光强度金免疫技术检测金颗粒沉淀目录小 结抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。抗原抗体之间的结合力涉及静电引力、范德华引力、氢键和疏水作用力。抗原抗体反应的特点是特异性、可逆性、比例性和阶段性。影响抗原抗体反应的因素包括反应物的自身因素和环境因素。免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应，免疫学技术有凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫反应五种类型。目录思