薄层色谱中展开剂的选择

1、薄层色谱中展开剂的选择之阿布王创作时间：二O二一年七月二十九日2007-04-05 02:03（一）有机合成中展开剂的选择做有机合成时走板子是常有的事,展开剂的选择就至关重要了 . 选择适当的展开剂是首要任务.一般经常使用溶剂依照极性从小 到年夜的顺序排列年夜概为：石油迷 己烷 苯乙醴THFN酸 乙酯 丙酮 乙醇 甲醇使用单一溶剂，往往不能到达很好的分离 效果,往往使用混合溶剂通常使用一个高极性和初级性溶剂组成 的混合溶剂，高极性的溶剂还有增加区分度的作用,展开剂的比 例要靠检验考试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的 展开剂，就首先检验考试使用该类展开剂,然后不竭检验考试比 例,直到找

2、到一个分离效果好的展开剂.展开剂的选择条件： 对的所需成份有良好的溶解性；可使成份间分开；待测组 分的Rf在0.20.8之间，定量测定在0.30.5之间；不与待 测组分或吸附剂发生化学反应；沸点适中，黏度较小；展开后组分黑点圆且集中；混合溶剂最好用新鲜配制.一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成,再根据需要加入甲醇、乙醇,乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性,以到达好的分离 效果，适合于生物碱、黄酮、菇类等的分离；中等极性的溶剂体 系由氯仿和水基本两相组成,由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节, 适合于慈酿、香豆素,以及一些极性较年夜的木脂素和菇类的分 离；强极性溶剂，由正丁醇和水组成,也靠甲醇

3、、乙醇，乙酸乙酯 等来调节,适合于极性很年夜的生物碱类化合物的分离.很多时候,展开剂的选择要靠自己不竭变换展开剂的组成来到达最佳效 果.我们在实验中,为了实现一个配体与其他杂质有效分离 ,曾检 验考试了很多种的溶剂组合,最后才找到石油醴一EtOAc HCOOH （5.5: 3.5: 0.1）混合溶剂.一般把两种溶剂混合时，采纳高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂，如果有分开的迹象,再调 整比例（或者加入第三种溶剂）,到达最佳效果；如果没有分开 的迹象（黑点较“拖”）,最好是换溶剂.对在硅胶中这种酸性物质上易分解的物质, 在展开剂里往往加一点点三乙胺, 氨水 , 吡啶等碱性物质来中和硅胶的酸

4、性 . （选择所添加的碱性物质 , 还必需考虑容易从产物中除去, 氨水无疑是较好的选择. ）分离效果的好坏和所用硅胶和溶剂的质量很有关系：分歧厂家生产的硅胶可能含水量以及颗粒的粗细水平, 酸性强弱分歧, 从而招致产物在某个厂家的硅胶中分离效果很好 , 但在另一个厂家的就不成 . 溶剂的含水量和杂质含量对分离效果都有明显的影响 . 温度 ,湿度对分离效果影响也很明显 , 在实验中我们发现有时同一展开条件 , 上下午的 Rf 截然分歧 .展开剂的选择主要根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等因素来考虑, 在进行薄层层析时, 首先应该知道未知化学成份的类型 , 其极性的年夜致归属 , 从提取液或从色

5、谱柱的流动相极性可知 , 另外某样品里含多种化学成份先按极性分歧年夜致分, 然后细分 , 对分离未知的化学物质, 展开剂的选择也是一个摸索的过程 , 不应该仅仅从展开剂考虑, 多因素综合衡量！溶剂：层析过程中溶剂的选择, 对组分分离关系极年夜 . 在柱层析时所用的溶剂（单一剂或混合溶剂）习惯上称洗脱剂 , 用于薄层或纸层析时常称展开剂 . 洗脱剂的选择 , 须根据被分离物质与所选用的吸附剂性质这两者结合起来加以考虑在用极性吸附剂进行层析时,当被分离物质为弱极性物质, 一般选用弱极性溶剂为洗脱剂；被分离物质为强极性成份, 则须选用极性溶剂为洗脱剂 . 如果对某一极性物质用吸附性较弱的吸附剂（如以

6、硅藻土或滑石粉取代硅胶） , 则洗脱剂的极性亦须相应降低. 在柱层把持时, 被分离样品在加样时可采纳于法, 亦可选一适宜的溶剂将样品溶解后加入 . 溶解样品的溶剂应选择极性较小的 , 以便被分离的成份可以被吸附 . 然后渐增年夜溶剂的极性. 这种极性的增年夜是一个十分缓慢的过程, 称为“梯度洗脱” , 使吸附在层析柱上的各个成份逐个被洗脱. 如果极性增年夜过诀（梯度太年夜） , 就不能获得满意的分离. 溶剂的洗脱能力 , 有时可以用溶剂的介电常数（ ）来暗示.介电常数高,洗脱能力就年夜.以上的洗脱顺序仅适用于极性吸附剂 , 如硅胶、氧化铝 . 对非极性吸附剂 , 如活性炭 , 则正好与上述顺序

7、相反, 在水或亲水住溶剂中所形成的吸附作用 , 较在脂溶性溶剂中为强 .被分离物质的性质被分离的物质与吸附剂 , 洗脱剂共同构成吸附层析中的三个要素 , 彼此紧密相连. 在指定的吸附剂与洗脱剂的条件下 , 各个成份的分离情况, 直接与被分离物质的结构与性质有关. 对极性吸附剂而言 , 成份的极性年夜, 吸附住强 . 固然 , 中草药成份的整体分子观是重要的 , 例如极性基团的数目愈多 , 被吸附的住能就会更年夜些 , 在同系物中碳原子数目少些, 被吸附也会强些 . 总之 , 只要两个成份在结构上存在分歧, 就有可能分离, 关键在于条件的选择 . 要根据被分离物质的性质, 吸附剂的吸附强度, 与

8、溶剂的性质这三者的相互关系来考虑. 首先要考虑被分离物质的极性 . 如被分离物质极性很小为不含氧的萜烯 , 或虽含氧但非极性基团 ,则需选用吸附性较强的吸附剂 , 并用弱极性溶剂如石油醚或苯进行洗脱 . 但大都中药成份的极性较年夜, 则需要选择吸附性能较弱的吸附剂（一般田IV级）.采纳的洗脱剂极性应由小到年夜按某一梯度递增 , 或可应用薄层层析以判断被分离物在某种溶剂系统中的分离情况. 另外, 能否获得满意的分离, 还与选择的溶剂梯度有很年夜关系. 现以实例说明吸附层析中吸附剂、洗脱剂与样品极性之间的关系 . 如有多组分的混合物 , 象植物油脂系由烷烃、烯烃、舀醇酯类、甘油三酸醋和脂肪酸等组份

9、. 如对 C-27甾体皂甙元类成份, 能因其分字中羟基数目的几多而获得分离：将混合皂甙元溶于含有5氯仿的苯中, 加于氧化铝的吸附柱上 , 采纳以下的溶剂进行梯度洗脱. 如改用吸附性较弱的硅酸镁以替代氧化铝 , 由于硅酸镁的吸附性较弱 , 洗脱剂的极牲需相应降低 , 亦即采纳苯或含5氯仿的苯, 即可将一元羟基皂甙元从吸附剂上洗脱下来. 这一例子说明 , 同样的中草药成份在分歧的吸附剂中层析时, 需用分歧的溶剂才华到达相同的分离效果, 从而说明吸附剂、溶剂和欲分离成份三者的相互关系 .（二）簿层层析：薄层层析是一种简便、快速、微量的层析方法 . 一般将柱层析用的吸附剂撒布到平面如玻璃片上 , 形成

10、一薄层进行层析时一即称薄层层析. 其原理与柱层析基秘闻似.薄层层析的特点：薄层层析在应用与把持方面的特点与柱层析的比力 .吸附剂的选择：薄层层析用的吸附剂与其选择原则和柱层析相同 . 主要区别在于薄层层析要求吸附剂（支持剂）的粒度更细 , 一般应小于 250 目 , 并要求粒度均匀 . 用于薄层层析的吸附剂或预制薄层一般活度不宜过高,以nm级为宜.而展开距离则随薄层的粒度粗细而定, 薄层粒度越细 , 展开距离相应缩短 , 一般不超越 10 厘米 , 否则可引起色谱扩散影响分离效果.展开剂的选择：薄层层析，当吸附剂活度为一定值时（如n 或田级）,对多组分的样品能否获得满意的分离,决定于展开剂 的

11、选择 . 中草药化学成份在脂溶性成份中 , 年夜致可按其极性分歧而分为无极性、弱极性、中极性与强极性 . 但在实际工作中经常需要利用溶剂的极性年夜小 , 对展开剂的极性予以调整.实例谈薄层色谱展开剂选择2007/12/08 12:18 P.M.实例谈薄层色谱展开剂选择根据自己的几年薄层层析经验, 参考药典等国家药品标准和有关文献, 将 2000 版药典一部里部份有代表性的对比品的薄层层实例按展开剂极性排序 , 并对其规律做一些分析 . 以下的分析和介绍是总体描述性的 , 目的是快速、简便地选择展开剂 . 如果想了解展开剂选择的各种理论, 请参考其他专著. #TfaMVME选择展开剂 , 要依据

12、溶剂极性和他们的混溶性, 溶剂对被分析物的溶解性 , 以及被分析物的结构 . 这里只讨论药典里通常使用的以硅胶为固定相主体的正相薄层 , 也不考虑板的活性.列出溶剂极性参数表, 方便以下比力展开剂 . 环已烷 :-0.2 、石油醴（I类，3060C）、石油醴（II类，6090C）、正已烷 :0.0 、甲苯 :2.4 、二甲苯 :2.5 、苯 :2.7 、二氯甲烷:3.1 、异丙醇 :3.9 、正丁醇 :3.9 、四氢呋喃:4.0 、氯仿 :4.1 、乙醇 :4.3 、乙酸乙酯:4.4 、甲醇 :5.1 、丙酮 :5.1 、乙腈 :5.8 、乙酸:6.0 、水 :10.2 1 .关于溶剂混溶性，

13、 一般根据相似相溶原则 ， 需要注意 ， 极性相差年夜的不混溶， 比如正己烷与甲醇. 多元展开剂 ， 主体的两种溶剂不能混溶， 就需要通过第三种溶剂来调和 . 比如：石油醚、正庚烷、正已烷、戊烷、环已烷和甲醇、水之类的 .一般正相色谱 ， 固定相为极性， 被分析物质的极性越年夜 ，需要极性更年夜的展开剂 .了解被分析物的极性可以通过分析其结构获得， 很难获得它的极性指数. 物质分子化学结构中 ， 通常由较极性部份和非极性部份两部份. 例如下面以苯丙烷为极性小部份， 随着极性基团部份的增加 ， 总体的极性就增加 ， 展开剂极性也增加了 ., 依次为肉桂酸、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸.相应展开

14、剂分别为：正己烷乙醚冰醋酸 (5:5:0.1)、苯冰醋酸甲醇(30:1:3) 、氯仿甲醇甲酸( 9:1:0.5 )、石油醚乙酸乙酯甲酸( 3:6: 1 )、醋酸丁酯甲酸水 (7:2.5:2.5). (由于薄层板、比移值分歧的原因 , 展开剂极性比力是相对的 , 其实不是绝对的后者年夜于前者) .现在最重要的问题是, 分歧化合物 , 怎么定它的极性 , 又用什么标准来定它对应的展开剂呢？以下分开讨论分歧化合物极性情况及其对应的展开剂 .首先是极性较小的挥发性物质. 比如：龙脑：石油醚(3060c)一醋酸乙酯(17:3)、厚朴酚：苯一醋酸乙酯(9:1.5)、“香附酮：苯醋酯乙酯冰醋酸(92:5:5

15、)、丹皮酚：环己烷醋酸乙酯(3:1), 这类化合物 , 以石油醚、正构烷和苯为体积百分数比力年夜的溶剂, 通常起溶解和分离化合物的作用, 而用醋酸乙酯为调节 Rf (比移值)的溶剂 . 为了减少拖尾之类其他相似相溶原则以外的影响, 适当加入添加剂, 如有机酸或者有机碱 .极性较小的不挥发性物质.比如：B-谷番醇：环己烷一醋酸乙酯甲醇(6:2.5:1) 或者环己烷丙酮(5:2) 、熊果酸：甲苯醋酸乙酯冰醋酸(12:4:0.5)、齐墩果酸：氯仿甲醇(40:1) 、猪去氧胆酸：氯仿乙醚冰醋酸(2:2:1) 、年夜黄素：苯醋酸乙酯甲醇(15:2:0.2)或者苯乙醇(8:1) 、丹参酮nA:苯-醋酸乙酯

16、-甲酸(40:25:4)、穿心莲内酯：氯仿-无水乙醇 (9:1) 、靛玉红、靛蓝氯仿乙醇(9:1) 或者苯氯仿丙酮(5:4:1).这类物质展开剂极性比极性较小的挥发性物质洗脱力强一些 , 因为这类物质极性小的母核年夜 , 而极性年夜的基团通常可以形成氢键 , 比如羧酸、羟基. 以上物质 , 母核分子量减小、母核结构中不饱和健的增加(尤其是呈现苯环) , 极性基团的增加 , 都使极性增加 , 展开剂极性也增年夜. 这个范围内的物质很多 , 一般展开剂年夜百分数的溶剂可以从环己烷甲苯二甲苯苯氯仿的顺序 , 依照极性要求选择. 这里注意 ,异丙醇、正丁醇极性指数也比力小 , 在这范围的化合物很少用

17、,因为粘性年夜、展开慢, 造成黑点扩散；另外, 羟基的氢键作用力也有晦气. 调节 Rf 值的溶剂 , 从醋酸乙酯甲醇丙酮乙醇 . 挥发性物质也有很多带羰基、羟基的 , 但从它的挥发性就可以明白 , 分子间作用力不强 , 另外 , 母核与石油醚、正构烷和苯的结构不同小 , 估计更容易脱离硅胶吸附 , 更快进入溶剂中 , 而不需要通过提高展开剂的极性 .皂苷类 . 人参皂苷：氯仿甲醇水(65:35:10)10 以下放置的下层溶液或正丁醇醋酸乙酯水(4:1:5) 的上层溶液或氯仿醋酸乙酯甲醇水(15:40:22:10)10 以下放置的下层溶液、芍药苷：氯仿醋酸乙酯甲醇甲酸(40:5:10:0.2)、

18、黄芩苷：醋酸乙酯丁酮醋酸水(10:7:5:3) 、橙皮苷：苯醋酸乙酯甲酸水 (1:12:2.5:3) 的上层溶液、葛根素：氯仿甲醇水(14:5:0.5) 、芦丁：醋酸乙酯甲酸水(8:1:1). 这类物质 , 由于存在糖的多羟基结构 , 苷元的结构影响变小 . 展开剂中使用极性年夜的有机溶剂(氯仿、醋酸乙酯、甲醇、正丁醇)和水. 乙酸和甲酸的使用 , 一方面增年夜展开剂极性 , 另外也可以抑制硅胶羟基的作用 , 减少拖尾 . 由于混溶性和硅胶耐酸能力的限制 , 水和酸的使用是有限度的 .极性年夜的小分子有机酸. 没食子酸：氯仿醋酸乙酯甲酸 (5:4:1) 、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸、异绿原

19、酸.这类物质大都是苯乙烯母核的 , 这个结构的极性自己比力年夜 ,另外有酚羟基和羧酸基团 , 个别有多羟基配基. 皂苷的展开剂差未几 , 极性年夜 . 注意甲酸通常指的是浓度85%左右的, 含有水.含氮有机物 . 盐酸小檗碱：苯醋酸乙酯甲醇异丙醇浓氨试液(12 ： 6： 3： 3： 0.6)( 氨蒸气饱和 ) 或正丁醇冰醋酸-水(7:1:2) 、麻黄碱：氯仿甲醇浓氨试液(20:5:0.5) 或正丁醇冰醋酸水(8:2:1) 、甘草酸铵：醋酸乙酯甲酸冰醋酸水(15:1:1:2).由于NH2硅醇基的彳用很强,在强极性展开剂加有机酸、有机碱扫尾. 对极性化合物 , 使用正丁醇对黑点扩散影响较小，因为化

20、合物和硅胶的作用强.D B#kvL:进行薄层分析基本可以根据母核、基团 , 选择相似的化合物对号入座. 固然 , 具体的条件优化则需要根据实际情况了 . 遇到较困难的分离, 需要使用到设计优化方法的 , 已经不属于本文讨论范围了 .关于展开剂：分离的样品酸性比力年夜, 一般在展开剂中加酸加甲酸是因为该样品是酸性的 , 加酸的量和该物质的酸性成正比关系 , 加水可能是因为你的样品是苷类的用酸水做一下缓冲 , 目的就是让黑点圆滑, 不脱尾 , 展距良好 .饱和也非常重要, 边缘效应很严重的无妨用下端浸在展开剂中的滤纸贴在展开缸的内壁, 这样饱和效果会好一些1)在层析缸口涂适量凡士林, 增加密封性；

21、 2) 以展开剂边缘效应的年夜小 , 确定展开剂平衡时间的长短, 一般平衡时间在30 分钟即可 .有机溶剂的极性, 甲醇氯仿 , 因此在氯仿：甲醇：氨水( 10:1:0.6 )这个展开剂中 , 如果极性略年夜, 可适当降低甲醇比例；如极性太小, 可适当增年夜甲醇比例 .氯仿：甲醇：氨水10:1:0.6 和 20： 2： 1.2 极性肯定是相同的 ,这有问题吗？ TOC o 1-5 h z 另外还有一个问题 , 这个展开剂中 , 甲醇用量较小 , 而甲醇又易挥发,容易发生边缘效应 , 要特别注意展开剂的平衡和层析缸的密封.分歧的展开系统意思是其中至少应该有一种溶剂分歧(最好是分歧分类组的溶剂)

22、, 而不是比例分歧. 或者使用分歧的固定相 .关于展开：TLC 中样品拖尾现象是什么原因?该如何解决?2.TLC 中样品跑成几乎为一条线, 黑点没有清晰的分离, 想请教一下这是什么原因造成的 ?一般情况下该如何解决?造成问题 1 的原因基秘闻同：a 、对一些具有酸碱性的化学成份, 在溶液中部份电离, 事实上展开时存在分子、离子两种状态, 以中性的有机试剂展开肯定会呈现两种层析行为 , 造成脱尾甚至是一条线.b、展开剂选择不妥c 、点样量过年夜, 样品超载解决法子：a、在展开剂中加几滴甲酸或冰醋酸；b、展开时以氨水饱和c、减少点样量d 、参考文献, 调整展开剂种类、比例我想问问，关于TLC二次展

23、开，是在第一次展开显色后再在继续第二次展开 , 还是在第一次展开后, 换另一种展开剂接着展开啊？请哪位年夜侠指点一下关于TLC的二次展开.二次展开是依据样品定的 , 但肯定要在第一次展开后 , 将板晾干或吹干, 再放入另一种展开剂中展开, 有的样品二次展开还要换展开方向 , 和原方向垂直. 所以要以实际分离样品需要而定. 一般是因为样品成份多 , 极性分歧有的年夜 , 有的关于显色：在工作中研究过用硫酸乙醇显色作定量分析的品种 , 凡是加了 CMC的板都易烘糊，尤其是温度高于100度时，后改用不加CMG甫的水板来作，就不会有烘糊现象，故也可推论CMO于与硫酸起糊化反应.感觉辅水板关键是硅胶G与

24、水的比例要达1: 3.5左右，而且研磨后要尽快涂布, 不能易于凝固而难于涂布, 我是百思不得其解, 难道CMC5有类似稳定剂的作用“0.5%的板加热时间长了就会黑”, 是在层析完 , 显色后吧 , 我也遇到过同样的情况, 这只有严格控制加热显色的时间 .这个问题应该是这样回答：凡是加了CMC勺板都易烘糊，尤其是温度高于100度时，若改用不加CMG甫的水板来作，就不会有烘糊现象，但不加CMG甫的板又太软，点样时容易点出洞，有个好法子是将CMC勺浓度调至0.1%,这样就不容易烘黑的.不信你试试，我们这边药检所都这样做的关于薄层板加热变黑的问题 , 其实很容易解决：当喷完显色剂后不用在放烘箱里烘了

25、, 可以用电吹风在板子反面吹吹就能显色了我们实验室里一般都采纳此法, 简便、快洁如果一非想使用烘箱烘的话, 一定要用带玻璃窗的 , 当看到显色了就取出 , 否则欠好控制显色时间，时间过长，CMC容易碳化变黑各位楼主真是经验丰富, 我铺的0.5%的板加热时间长了就会黑有什么好着吗？根据我的经验, 薄层版变黑与CMC Na 的浓渡过年夜有关, 如果你留意的话 , 你会发现 , 当显色剂中有浓硫酸时, 加热时间稍长就会变黑（其他显色剂是没事的） , 我老师说这是因为浓硫酸把CMC Na炭化了，其实color=blue= 这种情况你只要适当降低 CMC-N0!勺浓度/color就可以了，固然如果不加C

26、MC-NaH勺话容易把板弄破.一般我都是显色后用电吹风吹的 , 要均匀吹 , 电吹风离板的距离要远些 , 防止部份会黑 .另还要注意显色剂 , 如果显色剂中含有硫酸, 加热时间一定要掌握好 , 不成太长 .5. CP2000中277页苏氨酸的TLC的其它氨基酸检查似乎有问题 : . 以正丁醇 丁酮 浓氨溶液水为展开剂, 展开后 , 晾干 ,喷以茚三酮的丙酮溶液(1-50),. 茚三酮与浓氨溶液起显色反应 ,弄得整块板都有色, 茚三酮氧化苏氨酸后再与释放出的氨气起反应生成的点在整块板中尚能看到 , 其它氨基酸就别想看了 .氨基酸类的薄层鉴别过程中 , 显色前先将展完的板子在烘箱内烘一段时间 ,

27、从而确保展开剂挥干净, 效果不错关于裂板：板子会裂口 , 一则可能是因为硅胶的比例太年夜 , 二则可能是, 板子要在常温下晾干后 , 再在烘箱中活化 . 如果铺完不久就在较高温度下 , 裂口的几率就比力高的 .“晾干的板子放在烘箱里怎么全炸裂了 , 有什么方法可以防止板子炸裂 . ” 你的板没有完全干透, 概况看是干了 , 可是最中间的没有干 , 所以你直接放入 105 度的烘箱烘, 固然会炸裂了 , 所以应该先用高温年夜约 40 度左右烘 30 分钟左右 , 再用 105 度活化 , 就可以解决这个问题了 .关于活化呈现裂板、爆板的问题 . 我从没有遇上过. 活化我是这样处置不要比及温度到达

28、100 度 , 而是设好温度后就将板子放在干燥箱 , 然后再通电加热, 到达最高温度后停留 5 分钟左右即可. 这样水分是慢慢由内而外散发 , 而不是由外向内散发 , 防止了概况成膜, 里面还在散发水气, 岂有不裂、不爆的事理！ .关于点样：点样我自己没有什么技巧 , 导师教了我一招挺好用 , 写出来年夜家分享 , 就是在点样时食指放在点样管的上端, 当点样管的下端与硅胶板接触的瞬间轻轻松动上真个食指, 溶液自然从点样管出来,迅速提起点样管, 就这样反复把持点出的黑点既小又均匀 . 但要提出样品溶液不能太浓, 浓度太年夜, 点下的样品不能被硅胶很好的吸收 , 晦气于分离.关于点样 , 我上学的

29、时候, 老师用比力廉价的进样器（年夜约10几块钱吧,10 即可），将针尖打磨圆滑，老师好像是用锤一点一点锉的, 这样点样的时候样品溶液不容易沿针尖上行（甲醇溶液都这样）, 而且针尖不会刺破已经铺好的薄层板. 现在 , 我和师兄都是实行的这个法子，还是比力实用的，点样量可以精确到0.5履.固然 , 点样的时候手不能颤动 , 举措要轻 , 这些要领在于意会, 逐渐熬炼 , 相信你会体会到其中的快感.要磨平微量进样器的针尖, 简单的方法就是, 在展缸的盖子上轻磨（固然是靠近中间部份） , 就很快能解决问题 , 且很平滑 .薄层色谱小知识怎样提高点样效率?点样是造成TLC 定量误差的主要来源. 实验证

30、明：定量毛细管更适合较小体积的点样；微量注射器更适合较年夜体积的点样 . 这主要是因为微量注射器受小气泡、溶液回爬现象的影响较年夜 . 为防止分歧定量毛细管间的点样误差、建议一块薄层板上最好用同一只定量毛细管. 但应注意更换样品时, 应将毛细管用超声波或分歧极性溶剂清洗干净. 在制备样品时, 溶样溶剂黏度不能过高,以便于点样；溶剂沸点过低则进样体积易变, 过高则会改变展开剂组成；对样品溶解渡过高会使样点发生空心现象；经常使用的溶剂为甲醇、乙醇、丙酮.经典TLC样点原点一般为直径 3mm电间距 1-2cm 底边距；HPLC样点原点一般为直径 1mm点间距5mm底边 距1cm.展开剂的选 择TLC与HPLC相比，一个突出的优点就是流动相的选择具有更年夜的灵活性. 流动相的选择的目的是使绝年夜部份样品的RF 值位于 0.1-0.7 之间并到达较好的分离, 与此对应的是流动相要有适当的强度和组成 . 流动相强度越年夜, 溶质 RF 值越年夜 , 但很可能降低分离能力；另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物 , 根据相似相溶原理, 要使用多元