制川乌煎煮时间和给药剂量与抗炎镇痛功效的相关性研究

1、制川乌煎煮时间和给药剂量与抗炎镇痛成效的相关性研究【摘要】目的研究制川乌煎煮时间、给药剂量与抗炎镇痛成效的相关性，确定药物发挥成效的最正确煎煮时间和给药剂量。方法根据川乌祛风除湿止痛的成效，选择热板痛证模型、扭体痛证模型、急性炎证模型、亚急性炎症模型等，运用均匀设计和回归分析方法，确定药物不同成效的最正确煎煮时间和最正确给药剂量。结果制川乌能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀；显著减少醋酸所致小鼠扭体次数，延长小鼠扭体埋伏期；明显延长热板刺激小鼠舔足埋伏期，进步热板小鼠痛阈值。制川乌发挥抗炎成效的最正确煎煮时间为6h，最正确给药剂量为2.4g/kg；镇痛成效的最正确煎煮时间为6h，最正确给药剂量为

2、2.4g/kg。结论制川乌具有明显的抗炎作用和中枢镇痛作用；煎煮时间、给药剂量与抗炎镇痛成效显著相关。发挥抗炎镇痛成效的最正确煎煮时间和剂量为6h，2.4g/kg。【关键词】制川乌；抗炎；镇痛；煎煮时间；剂量；均匀设计；相关性StudyntherrelatinshipbeteenDetinTie,AdinistratinDseandtheEffiayfResistingInflaatinandRelievingPainfPreparedSihuanAniteRtAbstrat：bjetiveTinvestigatetherrelatinshipbeteendetintie(DT),adinis

3、tratindse(AD)andtheatinsfresistinginflaatinandrelievingpainfPreparedSihuanAniteRt(PSAR),nfirthebestDTandADfthePSARating.ethdsArdingttheeffiayfthePSARdispellingindanddapnessandrelievingpain,severalanialdels,inludingpain,inflaatindels,unifrdesign(UD)andregressinanalysisereappliedtnfirthebestDTandADfit

4、sdifferentatins.ResultsThePSARbviuslysuppressedtheiesaurilesellinginduedbyxylene,reduedthenuberfiessprainingbdyinduedbyaetiaid,inreasedthEirlateniesfsprainingbdyandstiulatinfhtbard,andiprvedthEIrpainthreshldvalue.ThebestDTandADfrthePSARtresistinflaatinandrelievepainere6hursand2.4g/kgrespetively.nlus

5、inThePSARpssessesevidentatinsfresistinginflaatinandrelievingpain,hiharearkedlyrrelatediththeDTandAD.ThebestDTandADfrPSARtresistinflaatinandrelievepainare6hursand2.4g/kgrespetively.Keyrds：PreparedSihuanAniteRt;Resistinginflaatin;Relievingpain;Detintie;Adinistratindse;Unifrdesign;rrelatin乌头功能祛风除湿、温经止痛

6、，对痹证和痛证具有卓越的临床疗效而被广泛应用，但因毒性较大，临床屡有用药不慎导致中毒死亡的报道14，影响乌头类药物毒效发挥的因素很多，其中以煎煮时间和药物剂量最为重要。煎煮时间应多久，药物剂量应多大，才能保证乌头类有毒药物最正确成效的发挥而又不致中毒。对此，笔者应用均匀设计方法进展了一系列乌头类有毒药物煎煮时间、给药剂量与药物成效的相关性研究。现将制川乌抗炎、镇痛成效与煎煮时间、给药剂量的相关性研究报道如下。1挑选实验1.1材料1.1.1药物制川乌：受试药物，购自四川江油，经本校生药鉴定教研室鉴定为乌头AnituarihaeliDebx.的枯燥母根，当年采收。参见2000年版?中国药典?制剂通

7、那么项，以3倍量水浸泡30in，加至10倍量水煎煮，煎煮时间分别取煮沸后0.25,0.5,1,2,3,4,6h7个时间点，煎煮完毕减压浓缩为每毫升含原生药1g。根据均匀设计表，制川乌煎煮15，30in，1，2，3，4，6h7个时间点分别取临床剂量3g60kgd-1的24，3，48，12，1，36和6倍。临用时用蒸馏水分别配制成12，1.5，24，6，0.5，18，3的药液备用。醋酸地塞米松：阳性药物，浙江仙琚制药股份消费。批准文号：国药准字H33020822。消费批号：040209。规格：0.75g/片。实验时用蒸馏水配制成0.015的药液备用。盐酸曲马多片：阳性药物，石家庄制药集团消费。批准

8、文号：国药准字H10960106。消费批号：031003。规格：50g/片。实验时用蒸馏水配制成1的药液备用。1.1.2动物昆明种小鼠，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，实验动物消费答应证号：04-11。检疫后备用。1.2实验方法1.2.1抗炎实验取体重2530g昆明雄性小鼠90只，随机分为模型对照组n10，阳性对照组n10，制川乌15in组n10，30in组n10，1h组n10，2h组n10，3h组n10，4h组n10，6h组n10。按组分别灌胃蒸馏水，0.015地塞米松药液，12，1.5，24，6，0.5，18，3的制川乌药液10lkg-1d-1,连续4d。末次给药0.5h后，每只小鼠

9、右耳廓滴注0.04l二甲苯，造模后1.5h脱颈椎处死，用6打孔器分别在同一部位摘取小鼠双耳片，称重，求两耳片之差值，即为耳肿胀度。实验数据用SPSS11.0统计软件处理，回归分析采用均匀设计1.0专用软件处理。1.2.2镇痛实验扭体实验：取体重1822g昆明种小鼠雌雄各半90只随机分为模型对照组n10、阳性对照组n10、制川乌15in组n10，30in组n10，1h组n10，2h组n10，3h组n10，4h组n10，6h组n10。按组分别灌胃蒸馏水，1曲马多药液，12，1.5，24，6，0.5，18，3的制川乌药液10l/kg。给药后1h，各鼠腹腔注射0.6%冰乙酸10l/kg，观察15in内

10、各鼠出现扭体反响的埋伏期及扭体次数。实验数据资料用SPSS11.0统计软件包进展统计学处理，多组间比拟用单因素方差分析，回归分析采用均匀设计1.0专用软件处理。转贴于论文联盟.ll.热板实验：以RB-200型智能热板镇痛仪挑选根底痛阈值以小鼠舔后足的时间作为痛阈在530s的雌性小鼠90只，按根底痛阈值的上下随机分为模型对照组n10，阳性对照组n10，制川乌15in组n10，30in组n10，1h组n10，2h组n10，3h组n10，4h组n10，6h组n10。按组分别灌胃蒸馏水，1曲马多药液，12，1.5，24，6，0.5，18，3的制川乌药液10lkg-1d-1，连续4d。第4天，测定末次给

11、药后0.5，1，1.5h和2h的痛阈值。实验数据资料用SPSS11.0统计软件包进展统计学处理，多组间比拟用单因素方差分析，回归分析采用均匀设计1.0专用软件处理。1.3实验结果1.3.1抗炎实验结果见表1及回归分析。表1对二甲苯致炎小鼠耳廓肿胀的影响(略)1.3.2镇痛实验结果详见表23和回归分析。表2对冰乙酸致痛小鼠的影响(略)表3对热板致痛小鼠痛阈值的影响(略)2验证实验2.1材料同挑选试验。2.2方法同挑选试验。2.3结果2.3.1抗炎实验结果见表4。表4对二甲苯致炎小鼠的影响(略)2.3.2镇痛实验结果见表56。表5对冰乙酸致痛小鼠的影响(略)表6对热板致痛小鼠痛阈值的影响(略)3讨

12、论均匀设计方法是由方开泰教授和数学家王元于1978年共同提出5，6。他们根据多因素多程度实验设计的要求，分析了正交设计“均匀分散、整齐可比的原理，认为“均匀分散是实验设计的本质，而“整齐可比只是便于数据分析，可以去除，从而可大量增加实验程度数，实验次数却增加很少。由于均匀设计具有实验次数少每个因素的每个程度仅做一次实验，实验范围可调，可用计算机处理等特点，在药学研究中应用较多79，包括提取工艺、制剂工艺、炮制工艺以及处方挑选等，大大节约了研究时间和经费。但采用均匀设计方法进展煎煮时间、给药剂量和药物成效的相关性研究文献报道很少。经一系列经典抗炎镇痛实验发现，制川乌能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿

13、胀；显著减少醋酸所致小鼠扭体次数，延长小鼠扭体埋伏期；明显延长热板刺激小鼠舔足埋伏期，进步热板小鼠痛阈值，即具有显著的抗炎作用和中枢镇痛作用。回归分析和验证实验说明，制川乌抗炎镇痛成效与煎煮时间、给药剂量具有显著的相关性，发挥抗炎成效的最正确煎煮时间为6h，最正确给药剂量为2.4g/kg；镇痛成效的最正确煎煮时间为6h，最正确给药剂量为2.4g/kg。川乌中主要含脂溶性生物碱乌头碱、中乌头碱和次乌头碱，具有很强的毒性，同时又具有较强的抗炎镇痛成效，但其不耐热，加热后极易水解为毒性很小的乌头原碱等。煎煮6h后脂溶性有毒生物碱几乎完全水解，提示，制川乌在最正确煎煮时间、剂量下发挥抗炎镇痛成效的物质根底并非乌头碱类有毒生物碱，但是否就是其水解产物，或其它抗炎镇痛成分，尚需进一步研究。【参考文献】1张新龙.草乌中毒致死1例报告J.山西临床医药杂志，2000，910：777.2吴国炎.草乌中毒致心律失常死亡1例报告J.急诊医学，1997，61：51.3范存富.12例制川乌中毒报告与分析J.中国医院药学杂志,1995,15(10):476.4靳昌山.服川乌中毒死亡二那么分析J.河北中医,1996,18(6):22.5方开泰.均匀设计数论方法在试验设计中的应用J.应用数学学报，19