心脏性猝死病人心肌组织CX43和CX40的表达

1、心脏性猝死病人心肌组织CX43和CX40的表达心脏性猝死病人心肌组织x43和x40的表达【关键词】猝死,心脏;连接蛋白43;连接蛋白40;免疫组织化学【摘要】目的观察心脏性猝死病人左、右心室肌及室间隔肌缝隙连接蛋白43(x43)及缝隙连接蛋白40(x40)的表达，讨论x43、x40表达与心脏性猝死的关系。方法应用免疫组化及siplepi图像分析系统，分析比拟心脏性猝死与非心脏性猝死病人心室肌及室间隔肌x43、x40的表达，并用spss13.0统计软件对数据进展统计分析。结果非心脏性猝死病人x43、x40主要表达于心肌细胞闰盘处，少数表达于细胞侧面连接及胞浆中。心脏性猝死病人x43、x40多数弥

2、散于胞浆及细胞侧面连接处，表达于闰盘的数量减少。心脏性猝死病人x43在左心室、室间隔及右心室的表达明显低于对照组(t=2.098.01，p均0.05);心脏性猝死病人x40在左心室、室间隔及右心室的表达也明显低于对照组(t=3.249.40，p均0.05)。结论x43、x40表达部位的改变与表达数量的减少，可能与心脏性猝死有一定关系。【关键词】猝死,心脏;连接蛋白43;连接蛋白40;免疫组织化学keyrdsdeath,sudden,ardia;nnexin43;nnexin40;iunhistheistry1材料与方法1.1材料来源选取20222021年我院病理科诊断为sd病人的存档标本蜡块2

3、5例(实验组)，每例均包含左、右心室及室间隔肌组织;25例病人中，男18例，年龄3365岁，女7例，年龄2850岁;其中冠心病性猝死22例，心肌病性猝死3例。另外，选取15例因交通意外死亡无心脏疾病者的左、右心室肌及室间隔肌组织的存档标本蜡块作为对照组，15例中男9例，女6例，年龄3055岁。1.2主要实验试剂兔抗人多克隆抗体x43(北京中杉金桥生物技术)，兔抗人多克隆抗体x40(abapl332abridgesienepark，uk)，即用型快捷免疫组化axvisin试剂盒(福建迈新生物技术开发)。1.3实验方法将所有切片按常规方法脱蜡至水后进展微波修复(80修复170s后，保温10in)，

4、自然冷却后以体积分数0.033的h22常温下封闭20in，pbs冲洗3次，每次5in后，一份参加x40浓缩液，按150浓度稀释;另一份加x43工作液，4冰箱过夜孵育，pbs冲洗3次，每次5in后，再按照即用型快捷免疫组化axvisin试剂盒指定方法加二抗常温孵育15in，pbs冲洗3次，每次5in后，按浓缩型dab试剂盒指定的方法进展显色。用pbs代替一抗作为阴性对照，用苏木精复染核。1.4结果判断心肌闰盘、胞浆、细胞侧面连接处出现棕黄色颗粒为x43、x40阳性表达。1.5图像分析与统计学处理2结果2.1x43免疫组织化学染色对照组x43阳性表达主要呈棕黄色，条状表达于心肌闰盘处，少部分棕黄色

5、颗粒散在表达于胞浆、细胞侧面连接处。实验组x43阳性表达大部分呈棕黄色颗粒，弥散于胞浆;有少部分的棕黄色颗粒表达于心肌闰盘及细胞侧面连接处，并且x43阳性颗粒的数量减少，而且颜色变浅。sd病人左心室、室间隔及右心室x43的表达均明显低于对照组(t=2.098.01，p均0.05)。见表1。2.2x40的免疫组织化学染色对照组x40主要表达于心肌闰盘处，细胞胞浆和细胞侧面连接处较少;而在实验组大部分弥散于胞浆，少部分表达于细胞侧面连接、心肌闰盘处。实验组与对照组相比拟x40的阳性颗粒数量减少，颜色变浅。sd病人左心室、室间隔及右心室x40的表达也明显低于对照组(t=3.249.40，p均0.05

6、)。见表2。表1两组心肌各部位x43表达的图像分析结果表2两组心肌各部位x40表达的图像分析结果3讨论3.1x与sdx是存在于动物体内多种细胞间的细胞连接通道，它是相邻细胞膜上的跨膜通道，由六聚体蛋白构成。在人类心脏的不同部位，缝隙连接蛋白的表达有差异，心室肌主要以x43、x40表达为主4。引起sd最常见的心律失常为室性心律失常。室性心律失常的发活力制包括折返自律性增高及触发活动等。已有研究显示，心肌细胞间的缝隙连接决定心肌电冲动阻滞与否6。心肌细胞膜通道的主动电活动不能使单个心肌细胞的兴奋传递到相邻的心肌细胞，从而引起整个心室肌的同步收缩，这一环节主要受控于x介导的细胞间电耦联。3.2x43

7、与sd研究显示，心肌急性缺血时，x43表达数量及表达形式发生变化，心肌闰盘处x43表达数量减少，使心肌纵向传导速度下降，从而引发心室折返传导，心室传导阻滞，进而诱发心律失常7。而一般情况下，冲动传到心肌组织，不会形成折返运动8。慢性心肌缺血引起x43大量降解，进而引发心律失常9。本研究显示，x43主要呈棕黄色条状表达于非sd病人心肌闰盘处，少部分棕黄色颗粒散在表达于胞浆、细胞侧面连接处;而在sd病人x43大部分呈棕黄色颗粒弥散于胞浆，少部分表达于心肌闰盘及细胞侧面连接处，并且x43阳性着色的数量减少，颜色变浅。同时，sd病人左心室、室间隔及右心室心肌x43的表达明显低于对照组。说明x43表达数

8、量及表达形式的改变可能与室性心律失常引发的sd有关。3.3x40与心脏疾病x40的基因突变可能与遗传性扩张型心肌病的发生有关。x40表达异常所致心脏传导异常以房室传导阻滞及右束支传导阻滞为主10。本研究显示，非sd者x40主要表达于心肌闰盘处，少部分表达于细胞胞浆和细胞侧面连接处，而sd病人x40大部分弥散于胞浆，少部分表达于细胞侧面连接、心肌闰盘处。实验组与对照组相比x40的阳性颗粒数量减少，颜色变浅。而且sd病人左心室、室间隔及右心室x40的表达也明显低于对照组。说明x40表达数量的减少及表达形式的改变可能与室性心律失常引发的sd有关。综上所述，正常成人心室肌的电传导具有多向异性，缝隙连接蛋白主要表达于心肌闰盘处，决定其传导以纵向传导为主，而sd病人x43、x40的表达自心肌细胞闰盘处向胞浆和胞膜处弥散，使其