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文档简介

1、不同产地布渣叶总黄酮含量及其去除自由基活性研究【关键词】布渣叶;总黄酮;自由基;去除活性自由基是生物体内化学性质极其活泼的物质,其大量存在会对生物膜、蛋白质、核酸等生物大分子造成危害。研究说明,肿瘤、衰老、心脑血管等疾病的发生与其有着亲密的联络1,2。黄酮类化合物是自然界广泛存在的一类天然产物,具有抗氧化、抗突变、抗衰老等多种生物活性,其自由基去除活性是当前的研究热点之一1-3。布渣叶,椴树科植物破布树irspaniulataL.的叶,主要分布于我国广东、广西、海南等地,富含黄酮类成分4-7,但未见有关其抗氧化和去除自由基活性的报道。本文对不同产地布渣叶总黄酮含量进展了分析,并选择了DPPH、

2、H和2-等体外模型对其自由基去除活性进展了考察,旨在为其进一步的开发利用提供科学根据。2方法2.1供试品溶液的制备6,7精细称取不同产地布渣叶各2.500g,参加体积分数70%乙醇50L,于30下超声提取2次,第1次30in,第2次20in;合并两次滤液,减压回收至无醇味,加水至100L,静置,过滤,将滤液倒入已放有10g预处理好的D101树脂的锥形瓶中,振荡吸附12h后过滤,分别用50L去离子水、30L体积分数20乙醇和30L体积分数95乙醇洗脱;搜集体积分数95乙醇洗脱液,减压蒸干后用甲醇溶解并定容至25L,即得。2.2标准曲线的制备5精细称取120枯燥至恒重的芦丁对照品10.2g,置50

3、L容量瓶内,用体积分数70%乙醇溶解并稀释至刻度,即得芦丁对照品溶液。准确汲取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.5、3.0L芦丁对照品溶液于10L量瓶中,分别补加体积分数70乙醇至5L;然后顺次参加质量分数5%NaN2溶液0.3L,放置6in,质量分数10%Al(N3)3溶液0.3L,放置6in,质量分数4%NaH溶液4L,再参加体积分数70%乙醇溶液至刻度,摇匀,静置15in后于510n处测定吸光度值。以吸光度A对芦丁质量进展线性回归,得到回归方程:A=1.33175-0.00449r=0.9989。在0.08160.604g范围内,线性关系良好。23总黄酮含量的测定方法取各待测样

4、0.1L,按上述标准曲线显色方法显色后在510n处测定吸光度值A,根据上述标准曲线方程计算总黄酮质量。2.4去除DPPH活性测定1,2精细称取DPPH2.74g,用95乙醇溶解并定容至100L。精细量取DPPH溶液2L,参加0.1L经适当稀释的供试品溶液,混匀,30in后于517n波长处测定其吸光度值,以(1)式计算去除率。E(%)=A0AtA0100%(1)式中,E:去除率;A0:初始DPPH溶液的吸光度;At:参加供试品溶液30in后DPPH溶液吸光度。转贴于论文联盟.ll.2.5去除H活性测定利用Fentn反响进展测定2,8,标准反响体系中含9.8L/LH222L,9L/LFeS42L,

5、9L/L水杨酸乙醇溶液2L,供试品溶液2L;以H22启动反响,37反响30in后在510n波长处测吸光度值,以(2)式计算去除率。E(%)=AsAbA0-Ab100%(2)式中E:去除率;A0:不加H22反响体系吸光度;As:标准反响体系吸光度;Ab:不加供试品反响体系吸光度。E(%)=A0(AsAb)A0100%(3)式中E:去除率;A0:不加样品时反响体系的吸光度;As:标准反响体系吸光度;Ab:不加邻苯三酚溶液反响体系吸光度。3结果与分析13个不同产地布渣叶总黄酮及其总黄酮去除DPPH、H和2-自由基活性分析结果见表1。表1不同产地布渣叶总黄酮及其总黄酮自由基去除活性结果略由表1可见,各

6、产地布渣叶药材总黄酮含量差异较大,其中以广西来宾样品含量最高,到达了55.22gg-1,广东电白样品总黄酮含量最低,仅为10.76gg-1;不同产地样品平均总黄酮含量为27.06gg-1。13个样品均具有一定的去除DPPH的才能,且其自由基去除率随供试品总黄酮浓度的增大而进步,呈现一定的量效关系,其去除率Y和总黄酮浓度的关系可以表达为Y=1.194+7.298r=0.966。同样,13个样品产地的布渣叶样品均具有一定的去除H和2-的才能,但其量效关系不明显,平均去除率分别为28.9254.626%和44.519.147%。整体上,对H去除效果较稳定但去除率较低,对2-大局部样品去除率较高,但不同产地布渣叶总黄酮样品去除率差异较大,这可能与总黄酮样品中详细的组分不同有较大关系,详细因素还有待进一步讨论。4讨论4.1不同产地布渣叶因种源遗传性状、生长的地理环境、采收季节等因素不同导致其总黄酮含量各异是正常的。从上述分析结果来看,布渣叶药材的总黄酮含量可以作为其质量控制指标,但此次研究选择样本量较少,且未能考虑其采收时间等因素的影响,其总黄酮平均含量27.06gg-1仅可作为药材质量控制的参考根据。4.2由13个不同产地布渣叶总黄酮自由基去除率的测定结果可知,布渣

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