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文档简介
柱色谱目的和要求 初步掌握柱色谱和纸色谱的操作技能。关于柱色谱柱色谱：也叫柱层析，将混合物的溶液通过装有吸附剂的层析柱，利用吸附剂对各组分吸附能力的不同，经过洗脱剂的洗脱，将各组分分开的过程。柱色谱的操作步骤：装柱 加样 洗脱和分离 收集各组分柱色谱分离示意图本次柱色谱实验样品：偶氮苯和对羟基偶氮苯的混合物洗脱剂（流动相）：石油醚 : 丙酮=8 : 2（体积比）吸附剂（固定相）：中性层析氧化铝（200300目）装柱取15cm1.5cm色谱柱一根或用25mL酸式滴定管作色谱柱，垂直装置，用25mL锥形瓶作接收瓶。用玻棒将少许脱脂棉放置于干净的色谱柱底部，轻轻塞紧。关闭活塞，向柱中倒入洗脱剂到约柱高的3/4处。打开活塞，控制流速约1滴/s。通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入吸附剂，用木棒轻轻敲打柱身下部，使其填装紧密，装至3/4时停止加吸附剂。待洗脱剂将干时，轻轻放少许脱脂棉到吸附剂的上方。加样待洗脱剂即将流干时，立即沿柱内壁加入约10滴已配好的混合物。当此溶液即将全部浸入吸附剂时，再用少量洗脱剂冲洗下沾在内壁和棉花上的有色物质，如此反复23次，至洗净为止。洗脱与分离，样品收集加样完毕后，即可小心加入洗脱剂（注意一定要待有色物质全部吸附于吸附剂上之后才可以加入大量的洗脱剂）。保持流出速度约1滴/s，随着洗脱剂的洗脱，可以明显看到层析柱上出现两个色带。待第一各色
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