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1、+2/ 方法用于检测未知抗原的双抗体夹心包被36. 牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀+2/ 方法用于检测未知抗原的双抗体夹心包被36. 牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为 SR。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加 SR液洗 次，每次 分钟。加样：加一定稀释的待检样品 SR 孵育 小时。然后洗涤。加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体 经滴定后的稀释度 SR 孵育 小时，洗涤。 SR 终止反应：于各反应孔中加入 3硫酸 SR +2/9检测仪上，于 TS若以(:9显色，则 TS处，以空白对照孔调零OD对照5*值的 倍，即为阳性方法用于检测未知抗体的间接法用包被缓冲液将已知抗原稀释至 10gS

2、R，每孔加 SR， 过夜。次日洗涤次。加一定稀释的待检样品未知抗体 SR上述已包被之反应孔中 孵育 小洗涤。 及阳性孔对照 于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体 体 SR， 孵育 分钟最后一遍用*洗涤。其余步骤同“双抗体法”的 、 、 。包被缓冲体 SR， 孵育 分钟最后一遍用*洗涤。其余步骤同“双抗体法”的 、 、 。包被缓冲液. 3碳酸盐缓冲液 4G)5% 加蒸馏水至 洗涤缓冲液. 6(9 ： 1. 65 克4G)R 1)R 克T SR 加蒸馏水至 白蛋白 (9 加洗涤缓冲液至 或以与洗涤液配成 使用。 终止液 395 ）：蒸馏水 R，逐滴加入浓硫酸 SR 底物缓冲液. 磷酸棗柠檬酸 3

3、4G.65 克2 3柠檬酸 克2 加蒸馏水 SR SR .(:9使用液 SM底物缓冲液6. 5（ ） 正常和阳性对。 板简称酶标板 孔或 孔，+2/950l100l 冰箱， 孵育箱。或(9等封闭+2/9和 冰箱， 孵育箱。或(9等封闭+2/9和 （ 包被抗体 吸附时一般要求.在 之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响一般多用 小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度 、和 10gSR 等 进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的 5* 值。选择 值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为 10gSR+2/9体分别为不同的稀释度应，而本身无色。有些供氢体 如 56* 等 有潜在的、灵敏度高的供、灵敏度高的供氢体，如 :3( 和 (:9 是目前较为满意的供氢体。底物作用一时间

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