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1、ICS65.020.30CCSB 4113河北省地方标准DB 13/T56252022规模化奶牛场布鲁氏菌病净化技术规范20222022081020220910河北省市场监督管理局发 布前言GB/T 标准化工作导则 第本文件由河北省农业农村厅提出。防控制中心。规模化奶牛场布鲁氏菌病净化技术规范范围要求。本文件适用于规模化奶牛场布鲁氏菌病的净化，其他类型的奶牛场布鲁氏菌病净化可参考执行。（） GB/T 18646 动物布鲁氏菌病诊断技术NY/T 1467 奶牛布鲁氏菌病PCR诊断技术NY/T 5049 无公害食品 奶牛饲养管理准则畜禽标识与养殖档案管理办法（2006年农业部令第67号）布鲁氏菌病

2、防治技术规范（农医发200712号）病死及病害动物无害化处理技术规范（农医发201725号）4 实验室检测血清学血清4 实验室检测血清学血清血清来自布鲁氏菌病非免疫奶牛，使用A19疫苗皮下注射接种超过18个月或使用S2疫苗口腔喷服接种超过6个月的奶牛。虎红平板凝集试验（RBT），试管凝集试验（SAT），间接酶联免疫吸附试验（i-ELISA），竞争酶联免疫吸附试验（c-ELISA），补体结合试验（CFT），按GB/T 18646-2018执行。对于不符合4.1.1.1要求的血清，采用琼脂凝胶免疫扩散试验（NH-GD）进行鉴别检测，方法见附录A。乳样A1918S2疫苗采用全乳环状试验（MRT），按

3、GB/T 18646执行。病原学采用聚合酶链式反应（PCR），按NY/T 1467执行。 RBTi-ELISA、MRTSAT、c-ELISA、CFT4.1.1.1NH-GD4.2.2 3%95 2牛群布鲁氏菌病感染率2%，可接种布鲁氏菌疫苗，跟踪检测感染率2%5.2.1 执行。 串联检测 对于感染率2i-ELISARBT、MRT筛，结果阳性的样品采用c-ELISASATCFTi-ELISAc-ELISA2i-ELISARBTMRTc-ELISA 45d60d24假定净化牛群 每隔 465.4.3365.15.4.3连续 优先选择“国家级布鲁氏菌病净化场”。 奶牛佩戴耳标、建立档案符合畜禽标识与养殖档案管理办法要求，保证可追溯到奶牛个体。 消毒工作按照NY/T 5049要求执行。 附 录 A（规范性）布鲁氏菌抗体琼脂凝胶免疫扩散试验原理2（Native Hapten，NH）LPSLPSNHNHLPS材料，10L100L试剂布鲁氏菌病抗体琼脂凝胶免疫扩散试剂盒，包含琼脂平板、LPS和NH混合抗原、阳性对照血清和阴性对照血清。A.2.3 被检血清A.2.3 被检血清5LLP和N1“g；15；15L（1“；15L（1“”孔；，22324h48h图1 加样示意图A.4 结果判定LPSNHg图 2）图 2 阳性对照和阴

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