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文档简介

1、植物生理学综合实验报告植物生长调节剂对植物生长的影响(多效唑PP333对小麦幼苗生长发育的影响)摘要:本实验采用0、50、100、200mg/LPP333浸种,以水培幼苗观察其对观察 其对种子成苗的影响。分别测定小麦的生理指标(发芽小麦根系活力测定、叶 绿素含量的测定、丙二醛含量)以及形态指标(苗高,根长,发根数,根冠 比)。实验表明,施用多效唑PP333后,对小麦幼苗呼吸强度的增加,小麦幼 苗根系生长受到抑制,随着施用的浓度增加,根系的平均长度增加。但随着 PP333的浓度增加,小麦幼苗的呼吸强度出现先增加后降低,根冠比增加,且 低浓度增加更明显。关键词:多效唑(PP333)植物生长延缓剂叶

2、绿素含量根系活力丙二醛谷氨酸含量前言:多效唑是80年代研制成功的三唑类植物生长调节剂,是内源赤霉素合 成的抑制剂。也可提高水稻吲哚乙酸氧化酶的活性,降低稻苗内源IAA的 水平。明显减弱稻 苗顶端生长优势,促进侧芽(分蘖)滋生。秧苗外观表现 矮壮多蘖,叶色浓绿。根系发达。解剖学研究表明,多效唑可使稻苗根、 叶鞘、叶的细胞变小,各器官的细胞层数增加。示踪分析表明,水稻种子、 叶、根部都能吸收多效唑。叶片吸收的多效唑大部分滞留在吸收部分,很少 向外运输。多效唑低浓度增 进稻苗叶片的光合效率;高浓度抑制光合效率。 提高根系呼吸强度;降低地上部分呼吸强度,提高叶片气孔抗阻,降低叶 面蒸腾作用。多效唑的农

3、业应用价值在于它对作物生长的控制效应。具有延缓植物生 长,抑制茎杆伸长,缩短节间、促进植物 分蘖、促进花芽分化,增加植物抗 逆性能4提高产量等效果。本品适用于水稻、麦类、花生、果树、烟草 油菜、大豆、花卉、草坪等作(植)物,使用效果显著。材料与方法1.1材料:小麦品种川育2115%多效唑 0.1%HgCl21.2方法1.2.1种子的前处理1.2.2种植消毒:精选饱满的充实,胚完整的小麦种子若干,用0.1%的HgCl2 消毒10min用自来水和蒸馏水冲洗3次并用滤纸吸干种子的水分1.2.3催芽与浸种:用200mg/L的PP333母液配置成50、100、200三种浓 度的PP333的溶液,并用蒸馏

4、水无PP333浓度做对照,将已消毒的种子分别 用四种溶液浸种24h后,将种子摆放在培养皿中,置于28C的恒温箱中催芽 48h。注意观察萌发的情况并补水。1.2.4幼苗的栽培和管理:用橡皮筋将塑料窗纱紧扎在培养钵口上,再以镊 子在塑料纱窗上戳成小孔,将种子的跟从小孔穿入杯中,每钵30株,每种 浓度种3钵。栽植完后,向培养钵中注满水使得所有的根都能接触到水,将 培养钵转移全光线充足处,培养一周,即可用于测定。管理期间必须注意杯 中的水必须淹没幼苗根系。测定项目2.1生理指标2.1.1小麦幼苗根系活力的测定(TTC法)方法:A:取幼苗根尖长约0.5-1cm 50根,投入盛有反应液的小瓶中,放入35C

5、的 水浴中暗反应1h,到时取出根尖吸干表面的水分。B:色素提取;将根尖投入研钵中,加乙酸乙酯约3ml研磨,红色提取液倒入 10ml的试管中,用乙酸乙酯将研钵中所有红色物体一并洗入试管中,最后用 乙酸乙酯定容至10ml。C:比色测定;以乙酸乙酯为参比,在485nm处测定OD值D:取1mg/ml的TTC于50ml的容量瓶中,加乙酸乙酯40ml以及少量的保险 粉,剧烈震荡,使TTC充分还原为红色的TRF并溶于乙酸乙酯,用乙酸乙酯定容至刻度。将上述TRF溶液稀释成系列浓度,取10ml容量瓶8个,编号,依次向各管 加入 TRF 溶液 0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00、1

6、4.00g/ml, 在加入乙酸乙酯定容至10ml。以空白为参比,在分光光度计上,测定485nm下的吸光度,绘制标准曲线 叶绿素含量的测定 方法:1.色素提取:取小麦叶片0.2g剪碎入研钵,用80%的乙醇,少量石英 砂和碳酸钙研磨,过滤,用80%乙醇定容至25ml备用比色测定:以80%乙醇为参比液,分别在645、663nm处测定OD值分别测定chla、b的含量以及chl的总含量2.1.3小麦叶片中丙二醛(MDA)含量的测定(TBA法)方法:1.材料处理:将其余的叶片裁剪成0.5cm2的小块,称取0.5g两份,一份做室温处理,另一份做高温处理(50C) 30分钟MDA的提取:将处理的叶片放入研钵体

7、中,加入2ml10%的TCA溶液研磨成匀浆,再加6mlTCA混匀,倒入离心管中,在3000/r离心10min,取上清液测定显色参比:取三支试管并编号,按照如下操做管参比:3ml 10% 的 TCA+3ml 0.5% 的 TBA0室温管:3ml样液+3ml 0.5%的TBA高温管:3ml样液+3ml 0.5%的TBA入沸水浴中加热10min,迅速冷却,分别在450、532、600nm处测定OD值2.1.4脯氨酸含量的测定方法:1.材料测定:称取0.5g叶片剪碎脯氨酸的浸提:将处理后的材料如研钵,加0.5ml 80%乙醇,少量石英砂 研磨成匀浆状,倒入大试管中,冲洗研磨一并倒入大试管中,使体积为1

8、0ml 即可,放入80 C恒温水浴浸提20min。脱色除杂:向大试管中加入1g活性炭,0.5g的人造沸石,剧烈震荡6min, 过滤入25ml的容量瓶中,用蒸馏水定容至25ml。显色反应参比液:2ml 80%的乙醇溶液+2ml冰醋酸+2ml茚三酮样液:2ml样液+2ml冰醋酸+2ml茚三酮 摇匀后入沸水浴中加热15min,讯冷,在515nm处测定OD值。2.2形态指标2.2.1株高,根长,发根数的测定取10株长势相同的幼苗,分别测取株高,根长,以及发根数,各取平均值2.2根冠比的测定将上面测定后的幼苗地上部分分装一铝盒中,地下部分装一铝盒中,放入瓷 盘内,在105 C烘箱中杀青15-20min。

9、转入80C烘箱中烘干至恒重,称取重 量,计算根冠比。结果分析3.1生理指标的测定3.1. 1小麦幼苗根系活力的测定(TTC法)标准曲线:y=0.0145xR 2=0.9879根系活力(ugTPF/根 h) =x v/根 h表一、小麦幼苗根系活力浓度(mg/L )050100200485nm OD 值0.4500.4600.4330.478根系活力(ugTPF/根h)6.0276.3455.9726.593相对于CK的-105.399.10109.4经过不同浓度多效唑处理后小麦根系活力先增加后减小,但均高于对照组,结果表明 适当浓度的多效唑可以增强根系活力,浓度过高增强作用有不同程度的减弱1.由

10、表一 知道我们的实验经过浓度为50、200mg/L的多效唑处理根系活力比对照都增强了,但是 经过浓度为100mg/L的多效唑处理的幼苗根系活力与对照比有一点减弱为对照的 99.1%,可能实验切根时没注意及时把切好的根放入反应液中。3.1.2叶片叶绿素含量测定(分光光度法)Chla 含量(mg g-1) =(12.7OD663-2.69OD645)*V/(W*1000)Chlb 含量(mg g-1) =(22.9OD645-4.68OD663)*V/(W*1000)Chl 总含量(mg - g-i) =Chla+Chlb= (20.2OD645+8.02OD663) * V/(W*1000) 表

11、二、不同浓度PP333处理后的叶绿素含量浓度(mg/L )050100200645nmOD 值0.3320.3080.2900.280663nmOD 值0.8100.8000.7630.745Chl总含量(mg/g )1.6571.5731.4971.454Chla 含量(mg/g )1.1741.1661.1141.089Chlb 含量(mg/g )0.4830.4070.3830.365相对于CK的84.379.375.6不同浓度处理的小麦幼苗的叶绿素含量比对照组高,说明多效唑可以增加小麦叶片中叶绿素的量,并且叶绿素的量随浓度的增大而增大i;而我们的实验数据表明 处理后的幼苗叶绿素下降且浓

12、度越大下降幅度越大,我们实验结果与其他文献的 结果不一致!3.1.3小麦叶片中丙二醛(MDA)含量的测定(TBA法)C(p mol/L)=6.45(OD530-OD600)-0.56OD颗MDA 含量(p mol - g-iFW)=C - V - 10-3/W表三、小麦叶片中丙二醛(MDA)含量(一)常温处理浓度(mg/L )050100200450nmOD 值0.1640.2440.3520.245532nmOD 值0.2610.0990.2290.138600nmOD 值0.1760.060.1450.082MDA 含量(p mol g-1FW)0.007300.001540.005520

13、.00502相对于CK的21.175.668.8(二)高温处理浓度(mg/L )050100200450nmOD 值0.1810.1880.2590.252532nmOD 值0.1540.0800.1270.156600nmOD 值0.0600.0460.0570.094MDA 含量(“mol g-1FW)0.008080.001920.004900.00414相对于CK的23.860.651.2由上表知道经过不同浓度处理的幼苗中MDA均减少了,其中常温下经过浓度为50、 100、200处理后的MDA含量为对照CK的21.1%、75.6%、68.8% ;高温下经过浓度 为50、100、200处

14、理后的MDA含量为对照的23.8%、60.6%、51.2%。其中经过高 温处理的比常温处理的MDA含量低。3.1.4脯氨酸含量的测定标准曲线:y=0.0422x R 2=0.9844脯氨酸含量二C - V/W - V1表四、脯氨酸含量浓度(mg/L )050100200515nmOD 值0.040.01600.01950.0510脯氨酸含量23.6979.47911.55230.213相对于CK的%-40.048.7127.5由表四知道经过浓度为50、100的多效唑处理后的脯氨酸含量为对照的40.0%、48.7%,比对照降低了一倍左右;而经过浓度为200的多效唑处理的幼苗中脯氨酸含 量为对照的

15、127.5%,比对照中的含量多了 1.275倍。3.2形态指标的测定3.2.1株高,根长,发根数的测定表五、不同浓度PP333处理后的小麦幼苗株高、根长、发芽数浓度(mg/L)050100200株高(cm)4.84.24.63.5相对于CK的87.595.872.9根长(cm)14.816.716.115.0相对于CK的112.8108.8101.4根数6666相对于CK的100.0100.0100.0由表五可以看出多效唑对小麦植株的生长有明显的抑制作用,随着浓度的增高抑制作用 越明显,其中浓度为200mg/L的为对照的72.9%,抑制最强!从上表还可以看出多效唑对 根系的生长有促进作用,其中

16、浓度为50mg/L的促进作用明显为对照的112.8。结果说明多 效唑抑制幼苗株高的生长,适当浓度的多效唑促进根的伸长,高浓度多效唑抑制根的伸 长,对主根数影响不大这种抑制作用在增加小麦的抗倒伏性能上具有重要作用。3.2.2根冠比的测定表六、不同浓度PP333处理后的小麦根冠比浓度(mg/L)050100200地上十重(g)0.230.220.240.20地下十重皿)0.070.090.080.08根冠比0.3040.4090.3330.400相对于CK的-134.5109.5131.5由表六知多效唑对小麦幼苗的生长有抑制作用,相对于对照而言处理后的幼苗根和冠的质量减轻,而根冠比增加。其中浓度为

17、50mg/L多效唑处理后的幼苗根冠比相对于对照的 134.5%,最为明显!浓度为200mg/L的多效唑对幼苗的地上部分的生长的抑制最显著!结论试验结果表明,不同浓度的多效唑浸种处理小麦种子,可显著抑制小麦 幼苗的生长,表现为株高变矮,叶面积减小,十物重下降,根冠比增加。产 生这些结果的主要原因是:多效唑通过抑制由贝壳杉烯到贝壳杉烯酸三步氧 化作用的氧化酶活性,因而抑制赤霉素合成。而赤霉素最显著的作用则是促 进细胞的纵向生长,使植物体长高。因此,经多效唑浸种处理,可有效抑制 小麦幼苗茎与根的伸长生长。同时,试验还表明:多效唑可增强根系活力, 具有较显著的壮苗效果。主要原因是施用多效唑后,植株矮化,减少了地上 部的营养消耗,根部脱落酸含量增加,促进地上部积累的同化物向下运输, 从而有利于根系生长。参考文献:黄小珍秦嘉岳李静英唐晓珊(四川农业大学,四川成

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