2021年大理大学临床医学院306临床医学综合能力(西医)考研核心题库之生物化学论述题精编

1、 4/42021年大理大学临床医学院306临床医学综合能力(西医)考研核心题库之生物化学论述题精编 特别说明 本书根据历年考研大纲要求并结合历年考研真题对该题型进行了整理编写，涵盖了这一考研科目该题型常考试题及重点试题并给出了参考答案，针对性强，考研复习首选资料。 版权声明 青岛掌心博阅电子书依法对本书享有专有著作权，同时我们尊重知识产权，对本电子书部分内容参考和引用的市面上已出版或发行图书及来自互联网等资料的文字、图片、表格数据等资料，均要求注明和来源。但由于各种原因，如资料引用时未能联系上或者无法确认内容来源等，因而有部分未注明或来源，在此对原或权利人表示感谢。若使用过程中对本书有任何异议

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3、。 （2）利用：绝大多数的合成反应需要A TP直接提供能量，仅少数情况下利用其他三磷酸核苷酸供能。在一些生理活动中，如肌肉收缩、分泌吸收、神经传导和维持体温等，也需ATP参与。 （3）贮存：由ATP和肌酸可生成CP贮存，需要时再转换成ATP。 （4）转换：在相应的酶催化下，ATP可供其他二磷酸核苷酸转变成三磷酸核苷酸，参加有关反应。 2鱼藤酮是来自植物的一种天然毒素，强烈抑制昆虫和鱼类线粒体NADH脱氢酶；抗霉素A 也是一种毒性很强的抗生素，强烈抑制电子传递链中泛酸的氧化。 （1）为什么某些昆虫和鱼类摄入鱼藤酮会致死？ （2）为什么抗霉素A是一种毒药？ （3）假设鱼藤酮和抗霉素A封闭它们各自的

4、作用部位是等同的，那么哪一个毒性更厉害？ 【答案】（1）NADH脱氢酶被鱼藤酮抑制，降低了电子流经呼吸链的速度，因此也就减少了A TP的合成。如果在这种情况下生成的ATP不能满足生物体对ATP的需求，生物体将死掉。 （2）因为抗霉素A强烈抑制泛醌的氧化，同样会发生（1）的情形。 （3）由于抗霉素A封闭了所有电子流向氧的路径，而鱼藤酮只是封闭来自NADH，而不是来自的电子的流动，所以抗霉素A的毒性更强。 3有一个七肽，经分析它的氨基酸组成为Lys、Gly、Arg、Phe、Ala、Tyr和Ser。此肽未经糜蛋白酶处理时，与FDNB反应不产生氨基酸。经糜蛋白酶作用后，此肽断裂成两个肽段，其氨基酸组成

5、分别为Ala、Tyr、Ser和Gly、Phe、LyS、Arg。这两个肽段分别与FDNB反应，可分别产生DNP-Ser和DNP-Lys。此肽与胰蛋白酶反应，同样能生成两个肽段，它们的氨基酸组成分别是Arg、Gly和Phe、Tyr、Lys、Ser、Ala。试问此七肽的一级结构是怎样的？给出分析过程。 【答案】（1）此肽未经糜蛋白酶处理，与DNFB反应不能给出任何有用的信息，表明该肽没有游离的氨基末端，系一环状多肽，由7个氨基酸组成。 （2）当用糜蛋白酶处理这个环状分子时产生两个小肽，与DNFB反应后水解可得到DNP-Ser 和DNP-Lys。从给出的条件可知这两个小肽是： （3）当用胰蛋白酶处理这

6、个七肽时，产生的两个小肽是： 考虑到（2）给出的结果，用胰蛋白酶处理后所得到的五肽的氨基酸顺序应为； 。又由于（3）给出了的顺序，进而可知糜蛋白酶处理环状分子后所 得到的四肽的氨基酸顺序是：。 上述总的结果是： 用糜蛋白酶处理：。 用胰蛋白酶处理：。 由于该物质是一个环状多肽，所以它的氨基酸顺序如下： 。 4何谓甲硫氨酸循环，有何生理意义？ 【答案】甲硫氨酸与ATP在腺苷转移酶催化下生成SAM，SAM在甲基转移酶作用下可将甲基转移给另一物质，使其甲基化后转变成腺苷同型半胱氨酸，后者进一步脱去腺苷，生成同型半胱氨酸。同型半胱氨酸可以接受甲基四氢叶酸提供的甲基，以维生素为辅酶，重新生成甲硫氨酸的循

7、环过程。这个循环的生理意义是： 为机体的某些甲基化反应提供活性甲基； 使甲基四氢叶酸的甲基得到利用，提高四氢叶酸的利用率。 5论述基因重组技术中常用的筛选方法及其作用原理。 【答案】重组克隆的筛选和鉴定是基因工程中的重要环节之一。不同的克隆载体和相应的宿主系统，其重组克隆的筛选和鉴定方法不尽相同。从理论上说，重组克隆的筛选是排除自身环化的载体、未酶解完全的载体及非目的DNA片段插入的载体所形成的克隆。常用的筛选方法有两类：一类是针对遗传表型改变筛选法，以半乳糖苷酶系统筛选法为代表；另一类是分析重组子结构特征的筛选法，包括快速裂解菌落鉴定质粒大小、限制酶图谱鉴定、Southern印迹杂交、PCR

8、 法、菌落（或噬菌斑）原位杂交等方法。 （1）半乳糖苷酶系统筛选法（蓝白斑筛选法）。使用本方法的载体包括M13噬菌体、pUC 质粒系列、pGEM质粒系列等。这些载体的共同特征是载体上携带一段细菌的基因LacZ。LacZ 编码半乳糖苷酶的一段146个氨基酸的肽，载体转化的宿主细胞为基因型。重组子由于外源片段的插入使肽基因失活不能形成互补作用，也就是说，宿主细胞表现为半乳糖苷酶失活。因此，在X-gal平板上，重组克隆为无色噬菌斑或菌落，非重组克隆为蓝色噬菌斑或菌落。这种筛选方法操作简单，但当插入片段较短（小于500bp），且插入片段没有影响LacZ基因的读框时，有假阴性结果的出现。 （2）快速裂解

9、菌落鉴定质粒大小。从平板中挑取菌落，过夜培养后裂解，直接进行凝胶电泳，与载体DNA比较，根据迁移率的减小初步判断是否有插入片段存在。本方法适用于插入片段较大的重组子的初步筛选。 （3）限制酶图谱鉴定。对于初步筛选具有重组子的菌落，提纯重组质粒或重组噬菌体DNA，用相应的限制性内切核酸酶（一种或两种）切割重组子释放出的插入片段，对于可能存在双向插入的重组子还可用适当的限制性内切核酸酶消化鉴定插入方向，然后用凝胶电泳检测插入片段和载体的大小。 （4）Southern印迹杂交。为确定DNA插入片段的正确性，在限制性内切核酸酶消化重组子、凝胶电泳分离后，通过Southern印迹转移，将DNA移至硝酸纤

10、维膜上，再用放射性同位素或非放射性标记的相应外源DNA片段作为探针，进行分子杂交，鉴定重组子中的插入片段是否是所需的靶基因片段。 （5）PCR法。用PCR对重组子进行分析，不但可以迅速扩增插入片段，而且可以直接进行DNA序列分析。因为对于表达型重组子，其插入片段的序列的正确性是非常关键的。PCR法既适用于筛选含特异目的基因的重组克隆，也适用于从文库中筛选含感兴趣的基因或未知的功能基因的重组克隆。前者采用特异目的基因的引物，后者采用载体上的通用引物。 （6）菌落（或噬菌斑）原位杂交。菌落或噬菌斑原位杂交技术是将转化菌DNA转移到硝酸纤维膜上，用放射性同位素或非放射性标记的特异DNA或RNA探针进

11、行分子杂交，然后挑选阳性克隆。这种方法能进行大规模操作，是筛选基因文库的首选方法。 6简述基因工程的主要过程。 【答案】（1）目的基因的获取：通过化学合成或PCR的方法获取，也可从基因组DNA文库或cDNA文库筛选。 （2）克隆载体的选择与构建：常用载体有质粒、噬菌体、病毒DNA。 （3）目的基因与载体的连接：利用DNA连接酶将目的基因与载体DNA进行共价连接形成重组DNA分子。 （4）重组DNA分子导入受体细胞：目的基因与载体连接成重组DNA分子后，需将其导入受体菌，随受体菌生长、繁殖，重组DNA分子也复制、扩增。导入的方法有转化和感染等。 （5）重组体的筛选：筛选出含重组DNA的受体菌，常用筛选方法有遗传学方法如耐药性标志选择、分子杂交和免疫化学方法。 （6）克隆基因的表达：包括原核表达和真核表达两种体系。可以生成有药用价值的蛋白质或多肽。 7试总结对蛋白质进行分离及纯化的相关技术。 【答案】蛋白质分