猪口腔液样品采集技术规范

1、猪口腔液样品采集技术规范1 范围的暂存与运输等技术要求。瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪口蹄疫、猪圆环病毒病等动物疫病检测。2 规范性引用文件文件。NY/T 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T 3075 畜禽养殖场消毒技术3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。猪口腔液 pigoral猪口腔中的唾液以及通过口腔黏膜和齿龈沟进入口腔的血清渗出液组成的混合液体。采样 sampling按照规定的程序和要求从动物及其产品或环境取得样品的过程。样品保存液 samplepreservative solution检测的准确性。4 采样前准备采样用品4.1.1 采样用品准备采集绳、无菌自封袋、剪刀、离心

2、管（1.5mL以上规格）、样品保存液等。4.1.2 样品保存液的选择（ProClin950 B化的具有保护核酸作用的样品保存液。4.1.3 采集绳的选择直径1.5cm2.0cm1.0m1.2m择符合上述要求的商品化的猪口腔液采集包，采集包内包含一根无菌棉绳、一个无菌吸管、无菌手套、一管样品保存液。4.1.4 采集绳数量4.1.4.1 猪饲养数量在 头以内的栏舍，悬挂一根棉绳。4.1.4.2 猪饲养数量大于 25头的栏舍，每增加 15头猪增加1根棉绳，绳子间的距离不低于 cm。4.1.5 灭菌或其他耐高温、高压容器中，121高压蒸汽灭菌30min，65烘箱中烘干，将棉绳转入无菌自封袋保存。商品化

3、采集包内的棉绳无需灭菌。防护用品一次性口罩、手套、防护服、鞋套，消毒液、医疗废弃物垃圾袋等。记录用品油性记号笔、黑色中性笔、标签纸、采样登记表、样品编号表或自动编号打印设备等。保存运输用品样品保存液、采样运输箱、冰袋、防震材料等。5 样品采集技术采集时间宜在猪只较为活跃的上午且在采食前采集。采集步骤5.2.1 棉绳悬挂将棉绳悬挂于猪栏内相对干净的区域，远离饲喂、饮水和排便区，不接触墙壁和猪栏。5.2.2 棉绳固定棉绳上端打结固定，下端悬挂高度与猪身肩关节齐平。5.2.3 棉绳放置时间棉绳放置至少30min，但不超过45min，期间任猪自由咀嚼。5.2.4 口腔液样品收集5.2.4.1 棉绳放置

4、规定时间后立即进行口腔液样品收集，口腔液样品采集量不少于 2。5.2.4.2 棉绳固定后脱落至地面或其他相对不干净区域，需重新进行样品采集。5.2.4.3 释放口腔液至袋底。剪掉自封袋底部一角，自封袋中口腔液倾斜倒入含有样品保存液的离心管中备用，口腔液与样品保存液体积比为 1:11.5:1，装入口腔液后盖上管盖后混匀，用封口膜固封。5.2.5 废弃物处置行无害化处理。采样注意事项5.3.1 个人安全防护和消毒操作按照 NY/T3075执行。5.3.2 每采集一份样品，更换一套一次性采样用品，避免交叉污染。5.3.3 采样后的废弃物等按照医疗废物管理条例进行无害化处理。5.3.4 若猪啃咬欲望不

5、强或不采食，可辅助采取其他采样方式，如鼻肛拭子等。6 样品标记与包装用油性记号笔在离心管管盖和管壁上作好标记，以阿拉伯数字标识，并在样品编号表（见附录 B）填写样品编号对应的栏舍编号，一式两份。样品名称和数量等。必要时自封袋上贴封条，封条上加盖采样企业签章及采样人签字，并注明贴封日期。7 样品信息登记填写猪口腔液采样登记表（见附录 ），一式两份。另一份留存备案。8 样品的暂存与运输口腔液样品在 24h处于 8，加填防震材料避免样品晃动。口腔液样品 24h内无法送达检测实验室的，迅速转置-20以下温度冻存。采样运输箱应完整无损，密封不漏液，必要时经清洁、灭菌后使用，详细按照 NY/T 541执行

6、。样品运送应符合生物安全要求，按照 NY/T 541附 录 A（资料性）猪口腔液采样登记表表A.1给出了猪口腔液采样登记表。表A.1猪口腔液采样登记表采样单位： 采样时间： 采样人： 联系电话：*场点名称 *联系人 *联系电话地 址 区 街（乡） 村 *地理坐标 经度： 纬度：*场点类型 种猪场 商品代养猪场 散养户 采样数量基本情况*现存栏数 年出栏数 种公畜数 母畜数生产：后备： 序号 样品编号（起止） 养殖阶段 群体数量 备注样品情况疫苗 是否免疫 疫苗类型 最后一次免疫时间 型口蹄疫 是 否 灭活苗 合成肽苗* 型口蹄疫 是 否 灭活苗 合成肽苗免疫情况猪瘟 是 否 脾淋苗 细胞苗伪狂

7、犬 是 否 弱毒苗 灭活苗猪繁殖与呼吸综合征是 否普通型灭活苗 普通型弱毒苗高致病性灭活苗 高致病性弱毒苗其他 是 否 序号 样品编号（起止） 养殖阶段 群体数量样品情况疫苗 是否免疫 疫苗类型 最后一次免疫时间 型口蹄疫 是 否 灭活苗 合成肽苗* 型口蹄疫 是 否 灭活苗 合成肽苗免疫情况猪瘟 是 否 脾淋苗 细胞苗伪狂犬 是 否 弱毒苗 灭活苗猪繁殖与呼吸综合征是 否普通型灭活苗 普通型弱毒苗高致病性灭活苗 高致病性弱毒苗其他 是 否注：表内带“*”的地方必须填写，地理坐标，要求填写6位数。注：样品编号：以例如110的简单阿拉伯数字标识在采样管上。注：养殖阶段：哺乳仔猪、保育猪、育肥猪、生产母猪、后备母猪、种公猪。注：该表格一式两份。附 录 B（资料性）样品编号表表B.1给出了样品编号表。表B.1样品编号表场点名称： 采样人： 样品编号 栏舍编号 样品编号 栏舍编号 样品编号 栏舍编号注：请详细填写表格，一式两份。填表人签字：参 考 文 献1 Seddon,Y,Optimisingoralfluidcollectionfromgroupsofpigs:Effectofhousingsystemandprovision ropes.J. Vet