黄酮类化合物 (3)PPT

1、关于黄酮类化合物 (3)第一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月一、黄酮类化合物概述 黄酮类化合物是在植物中分布最广的一类物质，几乎每种植物体内都有，它们常以游离态或与糖结合成苷的形式存在，它们对植物的生长、发育、开花、结果以及抵御异物入侵起着重要的作用。由于其分布广且部分化合物在植物中的含量较高，而且多数化合物易以结晶形式获得，所以它们是较早被人类发现的一类天然产物 ，也是中药中一类重要的有效成分。第二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月 据估计，经植物光合作用所固定的碳约有2%转变为黄酮类化合物或与其密切相关的其他化合物。 黄酮类化合物实际存在于植物的所有部分根、心材、

2、边材、树皮、叶、果实和花中，在花、果实、叶中较多；且大部分存在于有色植物中，如松树皮提取物、绿茶提取物、银杏叶提取物、红花提取物等。黄酮类化合物概述第三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮类化合物大部分存在于有色植物中，如松树皮提取物、绿茶提取物、银杏叶提取物、红花提取物等。松树皮绿茶银杏叶红花第四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮类化合物的生理活性：1.对心血管系统的作用：芦丁、橙皮苷，d-儿茶素等有Vit P样作用，能降低血管脆性及异常的通透性,可用作防治高血压及动脉硬化的辅助治疗剂。扩冠作用橙皮苷第五张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月2.抗肝脏毒

3、作用：儿茶素、水飞蓟素作为治疗慢性肝炎和保肝药物在国内外销售。黄酮类化合物的生理活性第六张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月3.抗炎作用: 芦丁、羟乙基芦丁、二氢槲皮素。黄酮类化合物的生理活性第七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月4.雌激素样作用：大豆异黄酮。黄酮类化合物的生理活性第八张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月5.抗菌、抗病毒等：木犀草素、黄芩苷、槲皮素、 桑色素、山萘酚等。黄酮类化合物的生理活性第九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月6.解痉作用：异甘草素、大豆素等具有类似罂粟碱解除平滑肌痉挛样的作用大豆苷、葛根黄素，缓解高血压患者的头痛7

4、.其他作用：止咳、祛痰、平喘黄酮类化合物的生理活性第十张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月葡萄籽提取物多酚（polypheno1）类黄酮，由单体（儿茶素、表儿茶素等）、基于此单体的聚合物（ 原花青素proanthocyanidin）和其它酚类组成。这一组成分中生物活性最强的部分是低聚（二，三聚体）原花青素，即OPCs（oligomeric proanthocyanidins)原花青素proanthocyanidin, PC, 是一大类多酚化合物的总称，由不同数目的黄烷-3-醇或黄烷-3，4-二醇聚合而成原花青素在葡萄、山楂、松树皮、银杏、花生、野生刺葵、番荔枝、野草莓、可可豆、贯叶金

5、丝桃、白桦树等植物中含量丰富原花青素的抗氧化、心脑血管、抗肿瘤、抗诱变 皮肤的保健作用：抗皱、美白、保湿、抗辐射黄酮类化合物的生理活性第十一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮类化合物在植物界主要分布在双子叶植物中。常见的科属有；芸香科、唇形科、伞形科及豆科等。至1979年止国内外发表的黄酮类化合物共1674(其中苷元902个，苷722个，其它为合成产物)。至1993年止：黄酮类化合物总数超过4000个。黄酮醇类最常见、黄酮类其次、其余则较少。第十二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮类化合物概述1、基本结构和分类（1）结构 1952年前，黄酮类化合物主要指基本母核

6、为2-苯基色原酮的系列化合物。天然黄酮类化合物母核上常有-OH、-OCH3等取代基，由于这些助色基团的存在，使黄酮类化合物多显黄色。色原酮2-苯基色原酮注意编号。第十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月现黄酮类化合物泛指两个苯环(A与B环)通过中央三碳链相互连接而成的一系列化合物，具C6-C3-C6结构。由15个碳原子组成的基本结构如下：C6-C3-C6结构第十四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月例如：槲皮素，具有抗氧化性，柠檬、柚子、柑橘、绿茶中含量高，属于黄酮类化合物。再如：具有抗癌活性的苦参素都是黄酮类化合物。“素“A环上为游离酚羟基或甲氧基。“苷”至少一个羟基与

7、糖成苷。槲皮素苦参素甘草苷第十五张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月（2）黄酮类化合物的分类1. 中央三碳链的氧化程度2. B环（苯基）连接位置(2-或3-位) 3. 三碳链是否构成环状等特点分类如下：根 据第十六张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月1. 中央三碳链的氧化程度2. B环（苯基）连接位置(2-或3-位) 3. 三碳链是否构成环状等特点天然黄酮类化合物的分类如下：第十七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月 续 表：黄酮类化合物的分类第十八张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月一）黄酮和黄酮醇类 黄酮类： 该类化合物中以芹菜素和木犀草素最为常见，

8、黄芩素也是个代表性化合物。芹菜素木犀草素芹菜素木犀草素黄酮类化合物的分类第十九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮醇类：槲皮素槲皮素黄酮类化合物的分类第二十张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月双黄酮类：13，8双芹菜素型：银杏素、白果素银杏素黄酮类化合物的分类第二十一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月二氢黄酮类：紫花杜鹃甲素、甘草苷。甘草苷紫花杜鹃甲素黄酮类化合物的分类第二十二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月二氢黄酮醇类：水飞蓟素GYH黄酮类化合物的分类第二十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月查耳酮类查耳酮的定位与其他黄酮类化合物

9、不同。GYH黄酮类化合物的分类第二十四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月异黄酮类： 大豆素、大豆苷、葛根素等。豆科植物多见。 大豆素GYH黄酮类化合物的分类第二十五张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月噢弄类（橙酮类）： 硫磺菊素，定位与其它黄酮类不同。硫磺菊素GYH黄酮类化合物的分类第二十六张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月花色素类： 矢车菊素、飞燕草素。飞燕草素GYH黄酮类化合物的分类第二十七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄烷醇类： 黄烷-3-醇的衍生物称儿茶素类，(+)儿茶素GYH黄酮类化合物的分类第二十八张，PPT共一百七十六页，创作于2

10、022年6月其它黄酮类如：口山酮类：为苯骈色酮，异芒果素为碳苷。异芒果素GYH黄酮类化合物的分类第二十九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮类化合物概述1、基本结构和分类2、黄酮苷的构成方式黄酮类化合物的三种形式：游离黄酮、黄酮苷、与鞣酸（又叫鞣质）形成酯，其中黄酮苷种类较多，连接方式有两种：黄酮苷的连接方式：（1）O-糖苷 苷元与糖以C-O-C方式连接，例如单糖形成的黄芩苷、双糖形成的橙皮苷等。除了单糖基苷类外，二糖基黄酮苷类在豆科植物中普遍存在。橙皮苷：1分子芸香糖（双糖）与黄酮苷元形成的双糖苷黄芩苷：1分子-D-葡萄糖醛酸与黄酮苷元7-OH成苷（单糖苷）第三十张，PPT共一

11、百七十六页，创作于2022年6月黄酮苷的构成方式（1）O-糖苷（2）C-糖苷除O-糖苷外，天然黄酮类还发现C-糖苷，糖基多数连接在6位或8位上。例如：牡荆苷的葡萄糖基不通过氧原子而是直接连接在8位碳上；再如葛根苷，有治疗心肌缺血的作用，葡萄糖基也是直接连在8位碳上。88第三十一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮苷的构成方式（1）O-糖苷（2）C-糖苷（3）构成黄酮苷的糖类单糖类 单糖主要有：D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-葡萄糖醛酸等。如黄芩苷是单糖苷。D木糖（xyl） D核糖 （rib） L阿拉伯糖（ara） L鼠李糖 （rha） D葡萄糖（g

12、lc） D 半乳糖（gal） D 葡萄糖醛酸 D 半乳糖醛酸 第三十二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮苷的构成方式（1）O-糖苷（2）C-糖苷（3）构成黄酮苷的糖类单糖类双糖类：常见有麦芽糖、乳糖、新橙皮糖、龙胆二糖、芸香糖（又叫芦丁糖）等。麦芽糖（两分子葡萄糖）乳糖（1分子葡萄糖和1分子半乳糖）第三十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月（3）构成黄酮苷的糖类单糖类双糖类：常见有麦芽糖、乳糖、新橙皮糖、龙胆二糖、芸香糖（又叫芦丁糖）等。第三十四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月（3）构成黄酮苷的糖类单糖类双糖类：常见有麦芽糖、乳糖、新橙皮糖、龙胆二糖、

13、芸香糖（又叫芦丁糖）等。新橙皮糖( neohesperidose ) 槐 糖(sophorose) 第三十五张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月3）构成黄酮苷的糖类单糖类双糖类三糖类：主要有龙胆三糖。龙胆三糖（-D-葡萄糖与蔗糖组成）（1分子-D-葡萄糖和1分子-D-果糖0第三十六张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月3）构成黄酮苷的糖类单糖类双糖类三糖类酰化糖类：主要有2-乙酰葡萄糖、4-咖啡酰基葡萄糖等。第三十七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月山柰素黄酮苷中糖的连接位置和苷元的结构有关，例如：花色苷类，多在3-OH上连接1个糖，或形成3,5-二葡萄糖苷。黄酮

14、醇类常形成3-单糖苷、7-单糖苷、3-单糖苷、4-单糖苷或3,7-二糖苷，3,4-二糖苷及7,4-二糖苷等。第三十八张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月二、黄酮类化合物的性质一、一般性质：1.性状：苷元多为晶性固体，苷类多为无定形粉末。2.颜色:黄酮的色原酮部分无色，在2-位上引入苯环后，即形成交叉共轭体系，使共轭链延长，因而呈现出颜色。花色素及苷元的颜色随pH不同而不同，一般显红色(pH8.5)等。第三十九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮类化合物的交叉共轭系统黄酮类化合物因存在共轭体系和助色基团而显色，多为黄色或浅黄色第四十张，PPT共一百七十六页，创作于2022

15、年6月黄酮、黄酮醇及其苷类多呈灰黄色黄色查耳酮多为黄色橙黄色二氢黄酮、二氢黄酮醇几乎无色异黄酮类为微黄色。第四十一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月若黄酮或黄酮醇7位或4位引入OH及OCH3等助色团（即供电子基）后，则促进电子转移、重排，使光被吸收的强度增加，从而使化合物、的颜色加深。但若OH、OCH3引入其它位置，由于不能发生上述重排而影响较小。3.旋光性：苷元中，二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇具旋光性，其余黄酮类无旋光性。黄酮苷均因分子中含有糖分子，均具旋光性，多为左旋。颜色:第四十二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月4、 溶解性： 水中溶解度主要取决于分子中极

16、性基团的多少，且与分子平面构型有关。游离苷元：难溶或不溶于水，易溶于稀碱及乙醇、乙醚、乙酸乙酯等有机溶剂中，其中二氢黄酮及二氢黄酮醇等非平面分子苷元为非平面分子，分子间排列不紧密，分子间引力降低，有利于水分子进入，在水中溶解度稍大；而一些平面分子，如黄酮、黄酮醇等，分子堆积紧密，分子间作用力大，难溶于水。黄酮类苷元分子中羟基数越多，水中的溶解度越大。黄酮、黄酮醇类、查耳酮 难溶于水；二氢黄酮、二氢黄酮醇 水中溶解度稍大。黄酮类化合物的性质第四十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月苷元溶解性之间的比较黄酮、黄酮醇、查耳酮为平面结构，堆砌较紧密，故更难溶于水。平面结构GYH第四十四张，

17、PPT共一百七十六页，创作于2022年6月二氢黄酮、二氢黄酮醇等为非平面结构，分子间隙较大，故水溶性更大。非平面结构（半椅式）GYH苷元溶解性之间的比较第四十五张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月花色素：以离子形式存在，水中溶解度较大。黄酮苷：因引入糖，极性增大，水溶性增强，易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中；难溶于或不溶于苯、氯仿、石油醚等有机溶剂中。其中糖链越长，在水中溶解度越大。而羟基被甲基化增多，黄酮苷类溶解性下降越多，弱极性溶剂中可溶解。此外，糖的连接位置不同，在水中溶解度也不相同。如：3-位苷的极性7位苷的极性OOHOOHOHOHOHOH棉黄素溶解性：黄酮类化合物的性质第

18、四十六张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月 花色素类虽为平面型结构，但它是以盐的形式存在，故具有盐的通性，水溶度较大。离子型结构GYH溶解性第四十七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月5、酸碱性（1）酸性： 黄酮类化合物由于大多数都含有酚羟基，故显示酸性。可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺以及N,N-二甲基甲酰胺中。因羟基位置不同，其酸性强弱也不同，一般次序如下： 7,4-二OH 7-OH或4-OH一般位置酚OH5-OH7，4-二羟基者可溶解于NaHCO3水溶液7-或4-OH者可溶解于Na2CO3水溶液其它位置酚羟基者溶于NaOH水溶液5-OH者只溶于浓度较高的NaOH水溶液中

19、此性质可用于提纯、分离和鉴定工作。黄酮类化合物的性质第四十八张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月5、酸碱性（1）酸性（2）碱性 黄酮类化合物分子中吡喃酮环上的1位氧原子因具有一对孤对电子，可接受质子，表现出微弱的碱性，能与强酸生成钅羊盐，生成的盐很不稳定，加水后即可分解。 GYH黄酮类化合物的性质第四十九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月二、显色反应(一) 还原显色反应:1. 盐酸镁粉（或锌粉）反应：黄酮类化合物最常用的鉴别方法之一。 多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物在盐酸-镁粉作用下，显橙红紫红色，（少数显紫蓝色）B环有-OH或-OCH3取代时，颜色随之加

20、深。查耳酮、橙酮、儿茶素类不显色。异黄酮类一般不显色。注意：花色素及部分查耳酮、橙酮等在单纯浓盐酸酸性条件下颜色也会发生变化，故须先做空白对照。方法：将样品溶于1.0mL甲醇或乙醇中，加入少量镁粉振摇，滴加几滴浓盐酸，12min内（必要时微热）即可出现颜色。注意(1) 醇液中比水液中反应较灵敏、 (2) 保持高浓度的酸 (3) 做对照实验，去样假阳性 黄酮类化合物的性质第五十张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月H+黄酮类化合物的性质(一) 还原显色反应:1. 盐酸镁粉（或锌粉）反应：2. 硼氢化钠反应：二氢黄酮和二氢黄酮醇类的专属反应NaBH4是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原

21、剂。与二氢黄酮类化合物产生红色紫色。其它黄酮类化合物均不显色，据此可以区别。显色反应第五十一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月(二) 金属盐类的络合显色反应: 铝盐、铅盐、铬盐、镁盐、锶盐、锆盐等金属盐类试剂能与具有3-OH, 5-OH或邻二酚OH的任一基团的黄酮类化合物反应，生成有色络合物。显色反应黄酮类化合物的性质2-苯基色原酮3-OH5-OH邻二酚OH第五十二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月金属盐类的络合显色反应: 铝盐、铅盐、铬盐、镁盐、锶盐、锆盐等金属盐类试剂能与具有3-OH, 5-OH或邻二酚OH的任一基团的黄酮类化合物反应，生成有色络合物。（1）铝盐：常

22、用试剂为1%三氯化铝或硝酸铝溶液，与具有上述结构的黄酮类化合物生成的络合物紫外灯下为黄色，max415，并有荧光，可用于定性和定量分析。1% AlCl3或Al(NO3)3络合物多为黄色，并有荧光。显色反应黄酮类化合物的性质第五十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月金属盐类的络合显色反应: 铝盐、铅盐、铬盐、镁盐、锶盐、锆盐等金属盐类试剂能与具有3-OH, 5-OH或邻二酚OH的任一基团的黄酮类化合物反应，生成有色络合物。（2） 铅盐：常用1%醋酸铅及碱式醋酸铅水溶液，可与具有酚羟基的黄酮类化合物生成黄红色沉淀。 中性醋酸铅可沉淀具有邻二酚羟基或兼有3-OH, 4=O或5-OH, 4

23、=O的化合物。碱式醋酸铅对一般酚类化合物均可沉淀。1% Pb(OAc)2水溶液，使含3-OH, 5-OH, 邻二酚OH产生黄红色； 1% Pb(OH)(OAc) 可使所有含酚OH的化合物产生红色，可用于分离；第五十四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月金属盐类的络合显色反应: 铝盐、铅盐、铬盐、镁盐、锶盐、锆盐等金属盐类试剂能与具有3-OH, 5-OH或邻二酚OH的任一基团的黄酮类化合物反应，生成有色络合物。（3）锆盐枸橼酸显色反应：用于区别黄酮类化合物分子中3或5OH的存在。多用2%二氯氧化锆（ZrOCl2）甲醇溶液。黄酮类化合物分子中有游离的3-或5-OH存在时，均可反应生成黄色

24、的锆络合物。第五十五张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月锆盐-枸橼酸显色反应：用于区别黄酮类化合物分子中3或5OH的存在。第五十六张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月锆盐：2%二氯氧化锆甲醇溶液，可区别3-OH和5-OH。第五十七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月金属盐类的络合显色反应: （4）镁盐：Mg(OAc)2甲醇溶液二氢黄酮、二氢黄酮醇类与醋酸镁的甲醇溶液，加热可显天蓝色荧光，若具有C5-OH，色泽更为明显。而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显黄橙黄褐色。二氢黄酮(醇类) 天兰色荧光 黄酮(醇)、异黄酮 黄橙黄褐色（C5-OH色泽更明显）Mg(OAc)2Mg(

25、OAc)2第五十八张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月金属盐类的络合显色反应: 铝盐、铅盐、铬盐、镁盐、锶盐、锆盐等金属盐类试剂能与具有3-OH,5-OH或邻二酚OH的任一基团的黄酮类化合物反应，生成有色络合物。 （5）氨性氯化锶（SrCl2）显色反应： 用于鉴定邻二酚羟基的反应。 在氨性甲醇溶液中，可与分子中具有邻二酚羟基结构的黄酮类化合物生成绿色棕色乃至黑色沉淀。 SrCl2邻二酚OH黄酮 绿色棕色乃至黑色第五十九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月（6）三氯化铁反应：酚类显色剂 多数黄酮类化合物因分子中含有游离酚羟基，与三氯化铁水溶液或醇溶液可产生阳性反应，呈现颜色；

26、三氯化铁水溶液或醇溶液能与几乎所有酚羟基成正反应，生成绿、兰、黑或紫色。含有3-OH, 5-OH, 邻二OH时，可显红、绿等较明显的颜色。当含有氢键缔合的酚羟基时，颜色更明显。第六十张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月（三）硼酸显色反应 在无机酸或有机酸存在条件下，5-羟基黄酮及2-羟基查耳酮可与硼酸反应，呈亮黄色。在有草酸存在下，显亮黄色并带黄绿色荧光。在枸橼酸-硼酸的丙酮溶液中反应，只显黄色而无荧光。显色反应黄酮类化合物的性质(一) 还原显色反应:(二) 金属盐类的络合显色反应:2-羟基查耳酮5-羟基黄酮第六十一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月硼酸显色反应第六十二张

27、，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月（四）碱性试剂显色反应 在日光或紫外光下，通过纸斑反应，观察样品用碱性试剂（氨蒸气和其他碱性试剂）处理后的颜色变化的情况，可用于黄酮类化合物的鉴别。显色反应黄酮类化合物的性质二氢黄酮类查耳酮第六十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月例如：黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色，可与其他黄酮类区别。二氢黄酮类易在碱溶液中开环，可转变为相应的异构体查耳酮类化合物，显橙色至黄色。二氢黄酮OH-查耳酮，显橙 黄色第六十四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月当分子中有邻二酚羟基取代或3,4-二羟基取代时，在碱液中很快氧化，最后生成棕

28、绿色沉淀。邻二酚OH或3，4-OHOH-黄色极易氧化深红色绿棕色O2碱液中不稳定碱性试剂显色反应显色反应黄酮类化合物的性质第六十五张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月 类别 反应条件黄酮类 黄酮醇类 可见光 紫外光 黄色棕色,红或黄棕色 灰黄色亮黄色,黄绿色先氨处理，再可见光 先氨处理，再紫外光 黄色黄绿色,暗紫色蓝色亮黄色先AlCl3处理，再可见光 先AlCl3处理，再紫外光 灰黄色,荧光橙色 黄色黄色,绿色,荧光 先浓H2SO4处理，再可见光先浓H2SO4处理，再紫外光 玉橙色浅黄色 深黄色荧光 (五) 紫外可见光下显色 下表列出了黄酮及黄酮醇类化合物纸上的显色反应。 显色反应第

29、六十六张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月（六）Gibbs反应-判断-OH对位有无取代基。有游离的酚羟基，且其对位无取代者呈阳性。酚羟基对位无取代活泼氢的反应。生成蓝或蓝绿色。检查5-OH或8-OH对位未被取代的黄酮。将样品溶于吡啶中，加入Gibbs试剂显蓝或蓝绿色。Gibbs试剂:甲液：0.5%2,6-二氯苯醌-4氯亚胺的乙醇溶液。乙液：硼酸-氯化钾-氢氧化钾缓冲液（pH9.4）显色反应黄酮类化合物的性质第六十七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月三、黄酮类化合物的提取与分离溶解性:极性小的苷元: Et2O, CHCl3, EtOAc等；苷及极性较大的苷元: MeOH,

30、EtOH, Me2CO, EtOAc, H2O等；多糖苷: H2O第六十八张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮类化合物的提取与分离一、提取：1、 溶剂萃取法原理：利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同，选用不同溶剂进行萃取而达到精制纯化目的 。极性较小的游离黄酮苷元：氯仿、乙酸乙酯、甲醇、甲醇：水（1：1）连续萃取；极性较大的黄酮苷元：用家村、甲醇：水（1:1）、乙醇：水（1:1）、等提取。多糖黄酮苷：极性大，直接用沸水提取高甲氧基的黄酮类化合物：极性小，用苯直接提取。 第六十九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月溶剂萃取Et2O水层CHCl3CHCl3Et2O总黄酮苷回

31、收溶剂EtOAc层EtOAc(或n-BuOH)萃取总黄酮回收溶剂层萃取水层石油醚液(叶绿素,蜡, 胡萝卜素等)加入少量水、石油醚萃取黄酮苷(黄酮苷可用7%酚/水洗下)(酚)除去酚类浓缩液水液萃取浓缩液减压浓缩DCBAA沸水洗B沸MeOH洗C 7%酚/水D 15%酚/醇洗活性碳适用于苷类活性碳吸附至上清液检不出黄酮类化合物直接柱色谱浓缩液回收溶剂醇提取液MeOH或EtOH提取原料系统溶剂萃取法第七十张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月2、 碱提酸沉法：适用于含游离酚OH的黄酮类 含有游离酚OH的黄酮类化合物易溶于碱水中，可先用碱性水提取，碱性提取液加酸后（pH56）黄酮即可沉淀析出。常

32、用的碱是石灰水，常用的酸是盐酸。原料 碱水液 总黄酮 (稀碱) (苷元及苷)注意：(1) 碱性不能太高，一般pH 89;(2) H+不宜过强，以免生成 钅羊盐;(3)用石灰乳或石灰水代替其它碱性水溶液，使果胶、粘液质等杂质生成钙盐沉淀，利于黄酮的纯化。此法简单易行，橙皮苷、芦丁、黄芩苷等都用此法提取。一、提取：黄酮类化合物的提取与分离石灰水提取H+第七十一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月例：从槐花米中提取芦丁 槐花米（槐树的花蕾）加约6倍量水,煮沸,在搅拌下缓缓加入石灰乳至pH89,在此pH条件下微沸20-30min,趁热抽滤,残渣同上再加4倍量水煎1次,趁热抽滤。合并滤液在60

33、700C下,用浓盐酸调至pH=5,搅匀,静置24h,抽滤。沉淀物水洗至中性，60oC干燥得芦丁粗品，于沸水中重结晶，7080oC干燥得芦丁纯品。碱提酸沉法：黄酮类化合物的提取第七十二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月原料水提液加入EtOH过滤沉淀(蛋白质等)滤液n-BuOH萃取n-BuOH层(多糖苷)水液H2O,黄酮类化合物的提取与分离3、 水提法：适合于多糖苷的提取一、提取：第七十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月（二）分离 由于黄酮类化合物的性质不同，分离原理有：（1）极性大小不同，利用吸附能力或分配原理进行分离（2）酸性强弱不同，利用梯度pH萃取法分离（3）分子

34、大小不同，利用葡聚糖凝胶色谱分离（4）分子中某些特殊结构，利用与金属盐络合能力的不同分离 常用分离方法有柱色谱、高效薄层色谱、高效液相色谱等。黄酮类化合物的提取与分离第七十四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月1溶剂萃取法 用醇或沸水提取液，进行浓缩除去溶剂得浸膏或浓水液，可采用不同极性的有机溶剂，极性由低至高依次分别进行萃取，根据“相似相溶原则“得到不同极性的提取物。可能使苷和苷元得以分离，不同极性的苷元之间也可能得到分离，甚至得到单体。 GYH黄酮类化合物的分离第七十五张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月2. pH梯度萃取法：适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。利用黄酮

35、类化合物具有酸性酚羟基的特点，能溶于碱液，在酸性条件下又游离出来，能与其它杂质得以分开，达到纯化精制之目的。原理：利用黄酮苷元中酚OH数目及位置不同, 其酸性强弱不同的性质来分离。方法：总黄酮溶于乙酸乙酯，依次用5%NaHCO3（萃取出7，4二OH黄酮）5%Na2CO3（萃取出7或4OH黄酮）0.2%NaOH（萃取出具有一般酚羟基黄酮）4%NaOH（萃取出5OH黄酮）。黄酮类化合物的分离第七十六张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月3、铅盐法 在黄酮类成分的混合物中，具有邻二酚羟基的成分与无此结构的成分，可用铅盐法分离。 与黄酮类混存的其它物质，如含-COOH的树胶、粘液、果胶、有机酸

36、、蛋白质、氨基酸或含邻二酚OH的鞣质等可与Pb(OAc)2形成除杂质的目的。黄酮类化合物的分离第七十七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月4、柱层析法分离黄酮类化合物的柱层析常用吸附剂是硅胶、聚酰胺、纤维素粉、氧化铝、活性炭等。(1)硅胶柱层析非极性与极性化合物都能用，应用较广，已被用于分离黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类、异黄酮和高度甲基化了的（或乙酰化了的）黄酮和黄酮醇，氯仿甲醇混合溶剂作洗脱剂。各种洗脱剂的洗脱能力：石油醚四氯化碳苯氯仿乙醚乙酸乙酯吡啶丙酮正丙醇乙醇甲醇水黄酮类化合物的分离第七十八张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月硅胶的活度与应用 _ 含H

37、2O量 活度 应用 0% I级 适用于分离：异黄酮、二氢 5% II级 吸附色谱 黄酮(醇)及高度甲基化(或乙 15% III级 酰化)的黄酮及黄酮醇类。 25% IV级 分配色谱 适用于多羟基黄酮醇及其苷类 38% V级 黄酮类化合物的分离第七十九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月吸附色谱洗脱剂：C6H6, CHCl3, CH2Cl2, EtOAc/少量MeOH分配色谱洗脱剂：EtOAc: 丁酮: HCOOH: H2O(5:3:1:17, 上层)丁醇: HOAc: H2O (BAW) (4:1:5 上层)硅胶柱层析黄酮类化合物的分离第八十张，PPT共一百七十六页，创作于2022年

38、6月（2） 聚酰胺色谱：分离羟基黄酮类化合物 聚酰胺色谱适用于分离极性和非极性物质，如：黄酮体、酚类、醌类、有机酸、生物碱、萜类、甾体、苷类、糖类、氨基酸衍生物、核苷类等。尤其对黄酮体、酚类、醌类物质的分离，远比其它方法优越。 对黄酮类化合物来说，聚酰胺柱色谱是目前最有效最简便的分离方法。黄酮类化合物的分离第八十一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月吸附力大小取决于黄酮类化合物中所具有的酚羟基的数目和位置以及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键的能力的大小。聚酰胺色谱第八十二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮类化合物从聚酰胺上被洗脱时有如下一些规律(含水醇洗脱剂)

39、 ：1)苷元相同：三糖苷双糖苷单糖苷苷元(易难)2)黄酮类化合物分子中酚羟基数目越多，形成氢键多，吸附力越强，越难被洗脱。3）当母核上酚OH数目相同时，能形成分子内氢键者易洗脱。如邻二酚羟基（分子内氢键）比对或间二酚羟基易被洗脱。，4)不同类型黄酮: 异黄酮二氢黄酮黄酮黄酮醇(易难)5)分子中芳香化程度高，共轭双键多者则吸附力强，难洗脱。如：二氢黄酮比查耳酮易被洗脱。聚酰胺色谱法各种溶剂在聚酰胺柱上的洗脱能力由弱至强,可大致排列成下列顺序:水甲醇丙酮氢氧化纳水溶液甲酰胺二甲基甲酰胺尿素水溶液 第八十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月(3)氧化铝柱层析 氧化铝通常在分离黄酮类化合物

40、中用的较少，这是因为铝离子与具有4酮基5羟基或4酮3羟基结构以及邻二酚羟基结构的黄酮类化合物形成络合物而被紧紧地吸附在氧化铝柱上，难以洗脱。若没有上述结构或上述结构被甲基化，也可用氧化铝柱进行分离。例如葛根中异黄酮的分离。黄酮类化合物的分离第八十四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月（4)葡聚糖凝胶(sephadex gel)柱层析 固定相葡聚糖凝胶（Sephadex-LH20）是具有许多孔隙的网状结构固体，有分子筛的性质，葡聚糖凝胶用于黄酮苷和苷元的分离，但机理不同表现为双重性：分离黄酮苷元时，主要是靠吸附作用，吸附能力的强弱与黄酮苷元所含有的酚羟基数目多少成正比。苷元的羟基数越多

41、，越难以洗脱。 分离黄酮苷时，主要是分子筛的性能，苷的分子量越大（分子筛）, 其上连结糖的数目越多, 越容易洗脱。 洗脱时黄酮苷按分子量由大至小依次流出。分离黄酮苷和苷元时：苷比苷元先洗脱（分子筛性能）。常用的洗脱剂： 碱性水溶液，含盐水溶液醇、含水醇 含水丙酮, 甲醇/氯仿如用葡聚糖凝胶柱色谱分离芸香苷和槲皮素：甲醇溶解后上柱子，甲醇洗脱，芸香苷在190250mL流分中，槲皮素在390460mL流分中。黄酮类化合物的分离第八十五张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月葡聚糖凝胶(sephadex gel)柱层析分离黄酮苷和苷元时：苷比苷元先洗脱（分子筛性能）。第八十六张，PPT共一百七

42、十六页，创作于2022年6月（5）活性炭吸附法（主要用于黄酮苷类的精制） 活性炭来源容易，价格便宜，在水中吸附能力大，在有机溶剂中吸附能力小；对大分子化合物的吸附大于对小分子化合物的吸附能力，主要用于黄酮苷类的精制工作。在植物中用甲醇萃取得到的提取液，经过碳柱，依次加沸水、甲醇、7%酚/水，大部分黄酮被洗下，15%酚/醇，洗脱液减压浓缩至小体积，用乙醚萃取除去残留酚，余下部分家呀浓缩得到较纯黄酮苷类。黄酮类化合物的分离第八十七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月（6）离子交换法提取、分离、纯化一步完成，适用于稀释倍数大的黄酮，可除去黄酮类化合物中的水溶性杂质。先用阴（或阳）离子交换树

43、脂吸附黄酮，然后用水洗涤柱子，吧水溶性杂质除去，再用甲醇把黄酮类化合物依次洗脱下来。黄酮类化合物的分离第八十八张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月四、 黄酮类化合物的检识与结构鉴定（一）色谱在黄酮类化合物鉴定中的应用:1.纸色谱：采用双向纸色谱。双向纸色谱法：在纸层析时通过两次不同方向的流动相展开，以期获得样品的进一步分离的方法。一般是在第一次层析分离后，变换90方向用不同的溶剂系统进行第二次层析。双向纸色谱适合于分离各种天然黄酮类化合物及其苷类的混合物。混合物的鉴定要得到较好的效果常采用双向层析法。第八十九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月层析行为: Rf值: 苷元单糖

44、苷双糖苷 一般: 苷元在0.70以上,而苷则小于0.7。主要根据分配作用进行分离n-BuOH: HOAc:H2O=4:1:5 上层t-BuOH: HOAc: H O=3:1:1水饱和n-BuOHoooooooooo.第一次展开样品第一相展开采用醇性展开剂双向纸色谱分离检识黄酮类化合物第九十张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月主要根据吸附作用进行分离第二相展开采用水性展开剂如：26% HOAc水溶液 3% NaCl 水溶液HOAc:浓HCl:H2O = 30: 3 : 10层析行为: 连接糖链越长, Rf越大(0.5); 苷元Rf较小，有的留在原点。苷元: 平面型分子: 黄酮(醇)、查

45、耳酮的Rf小,几乎留在原点不动(Rf5-OH(黄酮)5-OH(二氢黄酮)邻二酚OH3-OH(二氢黄酮) 对HCl稳定 HCl不稳定,可分解 在NaOAc中不稳定加入诊断试剂后，根据UV光谱的变化可推测酚羟基等取代基的位置和数目第一百一十一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月三氯化铝+盐酸光谱与甲醇光谱比较可确定有无5-OH或3-OH。诊断试剂AlCl3+HCl 图谱与MeOH图谱比较归属甲醇光谱与三氯化铝+盐酸光谱比较AlCl3+HCl 图谱与MeOH图谱相同无3-OH和5OHAlCl3+HCl 图谱与MeOH图谱不同可能有3-OH或5OH峰带I红移35-55nm示只有5OH峰带I红

46、移60nm示只有3OH峰带I红移5060nm示可能3及5OH峰带I红移1720nm除5OH外，有6含氧取代红移有一定的加和性。如:有3-OH,又有A环邻二酚OH，则红移8085nm。第一百一十二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月诊断试剂AlCl3+HCl 图谱与AlCl3图谱比较归属三氯化铝光谱与三氯化铝+盐酸光谱比较AlCl3+HCl 图谱与AlCl3图谱相同无邻二酚羟基结构AlCl3+HCl 图谱与AlCl3图谱不同可能有邻二酚羟基峰带I紫移30-40nm示B环有邻二酚羟基峰带I紫移50-65nm示A、B环可能均有邻二酚羟基三氯化铝+盐酸光谱与甲醇光谱比较可确定有无邻二酚羟基。

47、第一百一十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月此外，邻二酚羟基还可以通过氨性氯化锶（SrCl2）显色反应：加以区别：3-OH或5-OH还可借助锆盐枸橼酸显色反应区别。SrCl2邻二酚OH黄酮 绿色棕色乃至黑色第一百一十四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月例：根据UV推断OH取代位置： 带II 带I MeOH： 253 349 +NaOAc： 269 384 +NaOAc/H3BO3： 257 370 +AlCl3： 274 426 +AlCl3/HCl： 275 385 +ZrOCl2黄色+枸橼酸黄色退去： +SrCl2/氨性甲醇 。邻二酚羟基邻二酚羟基B环邻二酚OH7

48、-OH5-OH加醋酸钠：带红移5-20nm，示有7-OH加醋酸钠/硼酸：带红移1230nm：说明 B环有邻二酚OH。带红移510nm ：说明A环有邻二酚OH(6, 7-或7,8-不包括5, 6-)。第一百一十五张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月(一)A环质子1. 5,7-二羟基黄酮类化合物H-6和H-8分别以双重峰(J=2.5Hz)出现在6.95.7ppm之间。化合物H6H8黄酮黄酮醇6.2-6.0ppm(q,J=2.5Hz)6.5-6.3ppm (d,J=2.5Hz)1H-NMR在黄酮结构分析中的应用:氢核磁共振己成为黄酮类化合物结构分析的一种重要方法。所用溶剂有氘代氯仿(CDC

49、l3)、氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)、氘代吡啶(C5D5N)第一百一十六张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月7-羟基黄酮类化合物：有三个芳香质子H-5、H-6和H-8。化合物H5H6H8黄酮黄酮醇8.2-7.3ppm(d, J=9Hz)7.1-6.7 ppm(q,J=9,2.5Hz)7.0-6.7ppm (d,J=2.5Hz)第一百一十七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月4-氧取代黄酮类化合物B环有四个质子H-2、 H-6及H-5、 H-3 两组,出现在6.507.90处.(二)B环质子化合物H2,-5 (ppm)H-3,6 (ppm)黄酮类黄酮醇类7.9-7.7 (

50、d,J=8.5Hz)8.17.9(d,J=8.5Hz) 7.1-6.5 (d,J=8.5Hz) 7.1-6.5 (d,J=8.5Hz)第一百一十八张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月3、4-二氧化黄酮类化合物H-5,H-2,H-6通常在7.2-7.9 ppm之间。化合物H5H2H6黄酮7.1-6.7ppm(d, J=8.5Hz)7.2 ppm(d,J=9,2.5Hz)7.9ppm (q,J=8.5,2.5Hz)第一百一十九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月 3,4,5三氧取代黄酮类化合物：质子345三OH3或5-OH被取代H2 7.56.5ppm, sd, J=2HZH6

51、d, J=2Hz第一百二十张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮类：H3常以一个尖锐的单峰出现在约6.3 ppm 处。(三)C环质子第一百二十一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月第一百二十二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月异黄酮类H-2为一尖锐单峰，出现在7.87.6ppm，比一般芳香质子较低的磁场区。第一百二十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月化合物H3H26.3ppm, s, (尖锐单峰)7.8-7.6ppm, s, (尖锐单峰)第一百二十四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月二氢黄酮及二氢黄酮醇第一百二十五张，PPT共一百七十

52、六页，创作于2022年6月化合物H-2(ppm)H-3(ppm)二氢黄酮5.5-5.0 (q,J=11, 5Hz)近 2.8 q二氢黄酮醇5.0-4.8 (d, J=11Hz)4.3-4.1 (d, J=11Hz)二氢黄酮和二氢黄酮醇中H-2和H-3的化学位移第一百二十六张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月GYH第一百二十七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月单糖苷类：形成苷时，糖上H1化学位移值与其它位置上的H相比，一般处在较低的磁场区。如：3O苷，H1的值处于5.8 ppm;其它位置苷，H1的值均小于5.2 ppm， 故很容易相区别。(四)糖基上质子第一百二十八张，PP

53、T共一百七十六页，创作于2022年6月第一百二十九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月苷键构型的判断天然黄酮类化合物葡萄糖苷中，H1和H2为二直立键偶合系统，均为a键，Ja,a7Hz，H1显示为二重峰。而天然黄酮类化合物L鼠李糖苷上，H1与H2系二平伏键(e,e)偶合系统，故Je,e2Hz，分别为d峰。第一百三十张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮类化合物GYH第一百三十一张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月1、酚羟基质子：10ppm左右;但5-OH为12ppm左右。2、C6及C8CH3质子： 芳香甲基质子化学位移值为2.3 ppm 左右。 6位略高于8位 0

54、.2 ppm。3、乙酰氧基上的质子：糖上乙酰氧基上甲基质子信号位于；1.652.10 ppm苷元上乙酰氧基上甲基质子信号位于；2.302.50 ppm(五)其他质子GYH第一百三十二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月甲氧基质子：一般出现在 3.54.1 ppm 处。酚羟基质子：处在低场约10 ppm左右。重水(D2O)交换，这些信号峰即消失。GYH第一百三十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月13C-NMR在黄酮类化合物结构鉴定中的应用：(一) 黄酮类化合物的13C谱定位：第一百三十四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月黄酮类化合物的碳峰分布在40200之间，

55、分为四个区域： c 指定4085 1)二氢黄酮,异二氢黄酮,二氢黄酮 醇的C-2或C-3 2)OCH3的C90110 1)C-3(黄酮) 2)黄酮,异黄酮,二氢黄酮(醇)中的某 些C-6和C-8 3)上述化合物中B环被三取代后的 另外两个未被取代碳第一百三十五张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月110140 B环双取代或单取代后其它碳, A环未取代的碳135200 1)烯碳(=C-O) 135168 C-2黄酮,C3-OH黄酮醇,苯环上O取代的碳 2)羰基碳(C=O) 168200第一百三十六张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月(二) 取代基的影响：1.当A、B环引入取代基

56、时： X Zi(本身C) Zo Zm Zp OH 26.6 -12.8 1.6 -7.1OCH3 31.4 -14.4 1.0 -7.8 当4单取代时:第一百三十七张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月2.A环引入取代基时，位移影响将只局限于A环，但C5引入OH 使C4的+4.5, C2的+0.87，而C3-1.99。第一百三十八张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月3. 5, 7-二OH黄酮类中的C-6及C-8信号的特征：1)C-6, C-8信号在90100范围内出现；2)C-6的信号总比C-8信号位于较低的磁场，在黄酮及黄酮醇中差别4.8 (较大),二氢黄酮差别较小约0.9

57、。3)当C-6及C-8被甲基、-OH取代时，有取代的C将向低场位移6.09.6，而另一个未被取代的C则无多大改变。第一百三十九张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月(三) 黄酮苷类化合物：1. 糖的苷化位移: 酚性苷中,糖的C-1: +4 +6 7-, 2, 3, 4-OH苷化时, 糖的C-1：100102.5。 5-O-glu苷 C-1=104.3 7-O-rha苷 99.0双糖苷或低聚糖苷C-1在98109。当糖上的羟基苷化时将使该OH所在碳原子产生一个相当大的低场位移(+4+10)。如：例 外第一百四十张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月苷第一百四十一张，PPT共一百七

58、十六页，创作于2022年6月 2. 苷元的苷化位移：通常：苷元糖苷化后本身C向高场位移，其邻、对位碳原子向低场位移，对位C的位移幅度最大而又比较稳定。苷元Ipso-C（本身C）的对位及邻位碳原子的苷化位移比本身的苷化位移具有更确切的指导意义第一百四十二张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月一般地： A. C-3-OH糖苷化后，对C-2引起的苷化位移比一般邻位效应要大得多； B. C-7-OH及/或C-3-OH与鼠李糖成苷时，C-7或C-3信号的苷化位移比一般糖苷要大一些，据此也可与一般糖苷相区别。 C. 5-OH糖苷化后, C-2, C-4信号明显地向高场位移，而C-3信号则移向低场

59、。第一百四十三张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月质谱在黄酮类结构测定中的应用: 一般，MS测定采用电子轰击法（electron impact ionization，简称EI），故称El- MS.测定EI-MS时，需要先将样品加热气化，使之进入离子化室，而后才能电离。故容易发生热分解的化合物或难于气化的化合物，如醇、糖苷和部分羧酸等，往往测不到分子离子峰，看到的只是其碎片峰。而一些大分子物质，如糖的聚合物和肽类等，也因难于气化而无法测定。故近来多将一些对热不稳定的样品，如糖类和醇类等，进行乙酰化或三甲基硅烷化（TMS化），制成对热稳定性好的挥发性衍生物后再进行测定。另外，还开发了使样

60、品不必加热气化而直接电离的新方法，如化学电离（chemical ionization，简称CI）、场致电离（field ionization简称FI）、场解析电离（field desorption ionization，简称FD）、快速原子轰击电离（fast atom bombardment，简称FAB）和电喷雾电离（electrospray ionization，简称ESI）等，为对热不稳定的化合物的研究提供了方便。第一百四十四张，PPT共一百七十六页，创作于2022年6月质谱在黄酮类结构测定中的应用:苷元用EI-MS（电子轰击离子源-质谱联用）可得到分子离子峰(强, 往往为基峰)；苷用FD