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文档简介
1、尿糖酮体胆色素第1页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三一、尿糖检查 尿糖? 健康人排出量 2.8 mmol/24h 糖尿:糖定性实验呈阳性,主要指葡萄糖尿(glucosuria),偶见乳糖尿、戊糖尿、半乳糖尿等。 形成机制:血糖浓度大于8.88 mmol/L,肾小球滤过的葡萄糖量超过肾小管重吸收能力(肾糖阈),就出现糖尿。 第2页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三出现糖尿的3个因素: 血糖浓度(动脉血) 肾血流量(肾皮质血流量) 肾糖阈(8.88mmol/L)肾小球滤过率 肾糖阈肾小管重吸收 肾糖阈第3页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星
2、期三第4页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三尿糖定性的过筛实验: 葡萄糖氧化酶试带法,此法特异性强、灵敏度高、简便、快速、并可用于尿化学分析仪。 班氏尿糖定性试验是测定葡萄糖的非特异试验。凡尿中存在其它糖(如果糖、乳糖、戊糖等)及其它还原物质如肌酐、尿酸、维生素C等也可呈阳性反应,现多已不用。第5页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 薄层层析法是鉴别、确保尿糖种类的特异敏感的实验方法,但操作复杂,仅在必要时应用。第6页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三糖还原实验:葡萄糖含有醛基在热碱性环境中可将Cu2+还原为黄或红色的氧化亚铜沉淀(班
3、氏法)。将试管内班氏试剂加热至沸腾,仍为透明蓝色,继续进行实验。1.尿液葡萄糖测定方法第7页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 加入尿液0.2ml,混匀,煮沸12min,自然冷却,观察结果。第8页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三注意事项: 1、试剂与尿液的比例为10:1 2、煮沸时用不时摇动试管以防爆沸喷出。 3、必须冷却后观察,防止大量尿酸盐的绿色影响。 4、还原性物质的影响。第9页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三葡萄糖氧化酶试带法: 葡萄糖+H2O 葡萄糖氧化酶 葡萄糖醛酸+H2O2 H2O2 +色原剂 过氧化物酶 有色物质
4、常用的色源剂有: 邻联甲苯胺(如德国宝灵曼公司) 碘化钾(美国的Ames公司)第10页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三第11页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三邻甲苯胺法: (O-TB法): 葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热,葡萄糖的醛基与邻甲苯胺缩合形成葡萄糖基胺,后者脱水生成席夫碱,再经结构重排,生成有色化合物,在630nm有吸收峰。第12页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三第13页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三氧化酶试纸法阴性,还原实验法阳性 试纸质量问题 葡萄糖以外的其他还原糖 尿液中含有较高浓度的还
5、原性物质 存在少量葡萄糖伴有高浓度的还原物质氧化酶试纸法阳性,还原实验法阴性 尿液标本被过氧化物或者次氯酸盐污染尿糖测定结果分析:第14页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三2.尿液其他糖的检验方法果糖:果糖与溶于强酸的间苯二酚溶液加热后显红色反应。半乳糖:与硝酸共热,可被氧化为白色的粘酸 结晶。 粘多糖:甲苯胺蓝法、十六烷三甲基溴化铵实验。 戊糖:戊糖与盐酸共沸后生成糠醛,再与二羟基甲苯 作用形成绿色化合物。第15页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三3.尿液糖的纸层析法 在层析法中有固定相和流动相,两相间可做相对流动。当样品中各种糖随流动相通过固定相时,
6、即反复发生吸附、脱附、解析或其他亲和作用,由于各种糖在上述性能上的差异而产生移动速度的差异,而相互分离。第16页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三4.尿糖检查的临床意义糖尿非葡萄糖尿葡萄糖尿胰岛外性糖尿生理性糖尿摄食性糖尿妊娠性糖尿神经精神性糖尿病理性糖尿真性糖尿半乳糖尿果糖尿戊糖尿其他糖尿第17页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三参考值 定性:阴性定量:2.8mmol/24h(0.5g/24h)mmol/L(1-15mg/dl)第18页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 临床意义 尿中出现糖可见于以下情况。 1血糖增高性糖尿 (1)
7、饮食性糖尿:可因短时间摄入大 量糖类而引起。因此为确诊有无糖尿,必 须检查清晨空腹的尿液以排除饮食的影响。第19页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 (2)一过性糖尿:也称应激性糖尿。于颅脑外伤、脑血管意外、情绪激动等情况下,延脑血糖中枢受到刺激,导致肾上腺素、胰高血糖至少大量释放,因而事出现暂时性高血糖和糖尿。第20页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 (3)持续性糖尿:清晨空腹尿中尿糖呈持续阳性,最常见于因胰岛素绝对或相对不足所致的糖尿病,此时其血糖水平已经超过肾阈,24小时尿中排糖近于100克或更多,其每日尿糖总量与病情轻重相平行,因而尿糖测定也是
8、判断糖尿病治疗效果的重要指标之一。第21页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三手掌型葡萄糖(glucose)分析仪第22页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三2.血糖正常性糖尿: 又称肾性糖尿,肾小管对葡萄糖的重吸收功能低下所致。其中先天性者称为家族性肾性糖尿,病人出现糖尿而空腹血糖糖耐量试验均正常。注意与真性糖尿鉴别。其要点是肾性糖尿时空腹血糖及糖耐量试验结果均为正常.第23页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三思考题: 葡萄糖(试纸法) + - - +葡萄糖(邻甲苯胺) + + - -葡萄糖(班氏法) + + + -第24页,共45页,
9、2022年,5月20日,2点56分,星期三 二、尿液酮体检查Urine ketone bodies,KET酮体:脂肪酸分解代谢的中间产物 丙酮(CH3COCH3)(2%) 乙酰乙酸(CH3COCH2COOH)( 20% ) -羟丁酸(CH3CH(OH)CH2COOH)24小时排泄量: 丙酮3mg;乙酰乙酸9mg; -羟丁酸5mg 第25页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 正常人产生的酮体很快被利用,在血中mg/L。尿中酮体(以丙酮计)约为50mg/24h。定性测试为阴性。但在饥饿、各种原因引起的糖代谢发生障碍、脂肪分解增加及糖尿病酸中毒时,因产生酮体速度大于组织利用速度,
10、可出现酮血症,继而发生酮尿(ketonuria,KET)。第26页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三1.尿液酮体检查方法Lange法:Rothera改良法 原理:尿中的酮体(丙酮和乙酰乙酸)与亚硝基铁氰化钠和硫酸铵作用,可产生异硝基、异硝基铵,后者与Fe(CN)53-生成紫色化合物。第27页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三试纸法 尿中丙酮和乙酰乙酸在碱性溶液中与亚硝基铁氰化钠反应生成紫色化合物。 注意事项: 1.丙酮和乙酰乙酸的挥发性要求标本新鲜; 2.该法对乙酰乙酸的灵敏度最高, -羟丁酸不反应。第28页,共45页,2022年,5月20日,2点56分
11、,星期三尿中乙酰乙酸的检测: (Gerhardt法)试验原理:尿液中的乙酰乙酸与氯化高铁作用形成赭红色乙酰乙酸铁化合物。该法对乙酰乙酸测定的敏感度为700mg/L,尿液久置后乙酰乙酸可转变为丙酮,使结果偏低。尿液中的酚类、安替比林、水杨酸盐和重碳酸钠等药物可呈假阳性反应。第29页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三2.尿液酮体检查临床意义健康人尿中酮体含量甚微。尿中酮体增加时,称为酮尿。常见于未控制的糖尿病、运动、寒冷刺激、饥饿、呕吐等。 -羟丁酸的肾阈较高,如尿中出现多量 -羟丁酸,常说明酮血症加重。第30页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 糖尿病酮症
12、酸中毒:由于糖利用减少,分解脂肪产生酮体增加而引起酮症。未控制或治疗不当的糖尿病出现酸中毒或昏迷时,尿酮体检查极有价值。应与低血糖、心脑疾病乳酸中毒或高血糖高渗透性糖尿病昏迷相区别。酮症酸中毒时尿酮体阳性,而后者尿酮体一般不增高。第31页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 非糖尿病性酮症者:如感染性疾病肺炎、伤寒、败血症、结核等发热期,严重腹泻、呕吐、饥饿、禁食过久、全身麻酸后等均可出现酮尿,此种情况相当常见。妊娠妇女常因妊娠反应,呕吐、进食少,以致体脂降低解代谢增多,发生酮体症而致酮尿。第32页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 中毒:如氯仿、乙醚麻醉
13、后、磷中毒等。 服用双胍类降糖药:如降糖灵等由于药物有抑制细胞呼吸的作用,可出现血糖下降,但酮尿阳性的现象。第33页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三尿液胆色素检查 尿中胆色素包括胆红素(bilirubin)、尿胆原(urobilinogen)及尿胆素(urobilin),俗称尿三胆。由于送检的多为新鲜尿,尿胆原尚未氧化成尿胆素,故多查前两者,俗称尿二胆。第34页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三第35页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三(一)胆红素检查(BIL): 胆红素是红细胞破坏后的代谢产生。可分为未经肝处理的未结合的胆红素、经
14、肝与葡萄糖醛酸结合形成的结合胆红素、与白蛋白结合的-胆红素 。未结合胆红素不溶于水,在血中与蛋白质结合不能通过肾小球滤膜。结合胆红素分子量小,溶解度高,可通过肾小球滤膜,由尿中排出。 第36页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 由于正常人血中结合胆红素含量很低,滤过量极少,因此尿中检不出胆红素,如血中结合胆红素增加可通过肾小球膜使尿中结合胆红素量增加,尿胆红素试验量阳性反应。第37页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三检测方法: Harrison法:胆红素与氯化钡反应,形成胆红素钡盐沉淀而浓缩,滴加酸性三氯化铁试剂使胆红素氧化成胆绿素而呈绿色。 试纸法(重
15、氮法):在强酸性介质中,胆红素与试纸上的二氯苯胺重氮盐起偶联作用,生成红色偶氮化合物。第38页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三干化学法测定的注意事项 1、标本要新鲜。避免胆红素胆绿素,尿胆原尿胆素。 2、高浓度维生素C和亚硝酸盐,抑制偶氮反应,出现假阴性。参考值 胆红素定性:阴性 第39页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三(二)、尿胆原及尿胆素检查 尿胆原经空气氧化及光线照射后转变成黄色的尿胆素(粪胆素)。第40页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三检测方法: Ehrlich醛反应定性法:尿胆原在酸性溶液中与对二甲氨基苯甲醛反应,生成
16、红色化合物。 偶氮反应:尿胆原与重氮化合物的偶联,产生红色化合物。注意事项:1.标本必须新鲜;2. 内源性吲哚、卟胆原等可产生假阳性反应。第41页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三参考值 尿胆原 定性:阴性或弱阳性 (1:20稀释后阴性)mol/Lmol/Lmol/L尿胆素定性:阴性第42页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 临床意义 :利用尿胆红素、尿胆原和血胆红素等检查可协助鉴别黄疸病因: (1)溶血性黄疸:大量红细胞破坏,未结合胆红素增加,肝细胞代偿性产生更多的结合胆红素。排入肠道后转变为粪胆原亦增多,肠道吸收粪胆原及由尿中排出尿胆原亦相应增加,尿胆原试验呈明显阳性。溶血性黄疸可见于各种溶血性疾病、大面积烧伤等。 (2)肝细胞性黄疸:第43页,共45页,2022年,5月20日,2点56分,星期三 经肠道吸收的粪胆原也因肝细胞受损不能将其转变为胆红素,而以尿胆原形式由尿中排
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