实验九 DNA的粗提取与鉴定ZP

1、DNA的粗提取和鉴定 实验九1一、实验原理: 2.DNA的提纯DNA溶解度NaCl浓度 0.14mol/L1.DNA的粗提取DNA在0.14MNaCl溶液中溶解度最低冷却的95%酒精溶解杂质，进一步提纯DNA3.DNA鉴定原理DNA + 二苯胺 蓝色沸水浴2可溶性还原性糖脂肪蛋白质淀粉相关回顾: 沸水浴 斐林试剂砖红色沉淀苏丹（） 橘黄色（红色）双缩脲试剂紫色络合物碘液蓝紫色（蓝色）3鸡血细胞液二、材料及用具全血血浆血细胞95%冷酒精柠檬酸钠溶液（抗凝剂）:红细胞(主要) 、白细胞、血小板4三、制鸡血细胞液血浆白细胞与血小板红细胞柠檬酸钠离心或静置活鸡鲜血5鸡血细胞蒸馏水搅拌滤液2MNaCl搅

2、拌蒸馏水搅拌黏稠物2MNaCl搅拌过滤滤液冷酒精搅拌丝状物过滤提取鸡血细胞核物质溶解细胞内的DNA析出含有DNA黏稠物再溶解黏稠物过滤含有DNA的溶液提取含少量杂质DNA四、提取DNA（本节重点）过滤6五、鉴定DNA1.对照2.沸水浴加热3.现象：蓝色 71、该实验的基本步骤有：(1)提取细胞核：在血细胞悬浮液中加入蒸馏 水充分搅拌5分钟，再进行过滤。加蒸馏水的目的是_搅拌的目的是_()溶解核DNA：NaCl浓度为_(3)析出DNA：加入蒸馏水，其目的是_，用玻璃棒搅拌，此时有絮状物(黄色)出现，直到不再增多，絮状物的主要成分是_。(4)滤取DNA：用多层纱布过滤(3)中的溶液，含有DNA的粘

3、稠物留在_上。课堂练习8(5)黏稠物DNA再溶解：将黏稠物至于_中再溶解(6)提取杂质较少的DNA：这时用冷的_并搅拌出现丝状物，呈_色，用玻璃棒卷起丝状物，主要成分是_(7)DNA的鉴定：这一步要对照，将丝状物用_再溶解，用_试剂在_条件下5分钟，冷却后观察到_色。课堂练习9人类遗传病与优生什么是人类遗传病？乙肝感冒糖尿病肢端肥大症白化病红绿色盲血友病并指（趾）猫叫综合征耳廓多毛症艾滋病白化病红绿色盲血友病并指（趾）猫叫综合征耳廓多毛症人类遗传病通常是指由于遗传物质改变而引起的人类疾病。10人类遗传病类型单基因遗传病常染色体X染色体显性隐性多基因遗传病特点病例染色体病常染色体性染色体苯丙酮尿

4、症白化病、先天性聋哑软骨发育不全、并指、多指抗维生素D佝偻病进行性肌营养不良红绿色盲、血友病一对等位基因控制多对基因控制猫叫综合征 21三体综合征 性腺发育不良（特纳氏综合征）家族聚集现象易受环境影响在群体中发病率高。唇裂、无脑儿、原发性高血压、青少年型糖尿病、哮喘、精神分裂症11 常染色体上的显性遗传。并指（趾）12常染色体显性遗传多指:13多基因遗传病-单侧或双侧发病。先天性唇裂14遗传病对人类的危害：*我国每年的新生儿中，约有1.3%的有先天缺陷，其中70% 80%由遗传因素所致。*15岁以下死亡儿童中，约40%由于遗传病或其他先天性疾病所致。*自然流产儿中，约50%由于染色体异常引起。*21三体综合征每年新增2万，我国患者估计不少于100万人1、危害身体健康2、贻害子孙后代3、家庭社会负担15优生及优生措施：1、优生： 优生学：2、优生措施：禁止近亲结婚进行遗传咨询提倡“适龄生育”产前诊断（最简单有效）（主要手段）（重要措施之一）让每一个家庭生育出健康孩子。应用遗传学原理改善人类遗传素质的科学。16（1）苯丙酮尿症（2）21三体综合征（3）抗维生素D佝偻病（4）软骨发育不全（5）进行性肌营养不良（6）青少年型糖尿病（7）性腺发育不良A 常染