紫外可见分光光度法 (4)课件

1、关于紫外可见分光光度法 (4)第一张，PPT共六十二页，创作于2022年6月本章教学要求1、了解光谱分析的概念、分类、特点；化合物电子光谱的产生原理及紫外可见分光光度法的特点。2、掌握透光度、吸光度的定义及朗伯- 比尔定律及其使用条件；了解朗伯- 比尔定律偏离原因。 第二张，PPT共六十二页，创作于2022年6月本章教学要求5、掌握紫外-可见光分光光度法定性鉴别 方法、单组分的定量分析方法；了解 多组分的定量分析方法。4、掌握显色反应、显色剂、显色条件选择、参比溶液的概念及应用。3、熟悉紫外及可见分光光度计的结构。第三张，PPT共六十二页，创作于2022年6月第一节 概 述1、光学分析法 依据

2、物质发射的电磁辐射或物质与电磁辐射相互作用而建立起来的各种分析法的统称。分类：（1）光谱法（2）非光谱法第四张，PPT共六十二页，创作于2022年6月（1）光谱法：利用物质的光谱进行定性、 定量和结构分析的方法。 按能量交换方向分 吸收光谱法 发射光谱法 按作用结果不同分 原子光谱线状光谱 分子光谱带状光谱光谱：当物质与辐射能作用时，物质内部发生能级跃迁，记录由能级跃迁所产生的辐射能强度随波长的变化，所得的图谱。第五张，PPT共六十二页，创作于2022年6月（2）非光谱法： 利用物质受电磁辐射时，改变电磁波的传播方向、速度等物理性质建立起来的分析方法。分类： 折射法 旋光法 射线衍射法第六张，

3、PPT共六十二页，创作于2022年6月2、原子光谱与分子光谱：（1）原子光谱： 由于气态原子或离子外层电子在不同能级间跃迁而产生的光谱。 包括：原子吸收光谱、原子发射光谱、 原子荧光光谱。特征：线状光谱第七张，PPT共六十二页，创作于2022年6月（2）分子光谱： 在辐射作用下，分子间能级的跃迁产生的光谱。 包括：分子吸收光谱、分子荧光光谱、 分子磷光光谱。特征：带状光谱第八张，PPT共六十二页，创作于2022年6月3、吸收光谱与发射光谱（2）发射光谱 例：-射线；x-射线；荧光例：原子吸收光谱，分子吸收光谱（1）吸收光谱 第九张，PPT共六十二页，创作于2022年6月4、分光光度法： 利用被

4、测物质对光的吸收特征和吸收强度对物质进行分析的方法。分类：（1）紫外分光光度法（200400nm)（2）可见分光光度法 (400760nm)（3）红外分光光度法(0.751000m)第十张，PPT共六十二页，创作于2022年6月紫外可见分光光度法的特点：1、灵敏度高：能测10-7g/mL级。2、精密度和准确度高： RE=15%3、选择性好：多组分一般无需分离4、仪器设备简单：不太贵重、操作简 便快速；5、应用范围广。第十一张，PPT共六十二页，创作于2022年6月1、波粒二象性：波动性：粒子性：一、电磁辐射与电磁波谱电磁辐射：在空间不需任何物质作为传 播媒介的高速传播的粒子流。第十二张，PPT

5、共六十二页，创作于2022年6月2、电磁波谱：光谱区域：按照电磁波波长大小顺序把电磁 波划分成几个区域。电磁波谱：由各光谱区域按顺序排成的系列。射线x射线紫外光红外光微波无线电波10-2 nm 10 nm 102 nm 104 nm 0.1 cm 10cm 103 cm 105 cm可 见 光第十三张，PPT共六十二页，创作于2022年6月二、物质对光的选择性吸收：可见光色散1、单色光：单一波长的光。 复合光：由不同波长的光组合而成的光。红橙黄绿青青蓝蓝紫650-750 nm600-650 nm580-600 nm500-580 nm490-500 nm480-490 nm450-480 nm

6、400-450 nm第十四张，PPT共六十二页，创作于2022年6月2、白光：七色光按不同比例混合的复合光。互补光：按一定比例混合为白光的两种光。红青绿蓝黄青蓝橙紫第十五张，PPT共六十二页，创作于2022年6月3、物质的颜色与光的关系：完全吸收：完全透过：吸收黄色光： 溶液颜色取决于被吸收光的互补光的颜色；而颜色的深浅，则取决于溶液中吸光物质浓度的高低。 第十六张，PPT共六十二页，创作于2022年6月吸收光谱与有机化合物结构的关系：红外吸收光谱振动或转动光谱。 每一种分子都有其特征光谱。紫外可见吸收光谱电子光谱 分子中含有芳香环、共轭双键、含杂原子的不饱和键、配位化合物第十七张，PPT共六

7、十二页，创作于2022年6月一、吸收光谱： 在浓度一定的条件下，以波长或波数为横坐标、吸光度或吸光系数为纵坐标所描绘的曲线。吸收峰：谷：肩峰：末端吸收：223411强带： 104； 弱带： 102A第二节 紫外可见分光光度法的基本原理第十八张，PPT共六十二页，创作于2022年6月（一）透光率与吸光度：1、透光率：入射光 I0透射光 ItT 取值为0.0 % 100.0 %全部吸收：T = 0.0 %全部透射：T = 100.0 %二、朗伯-比尔定律：第十九张，PPT共六十二页，创作于2022年6月2、吸光度A：溶液对光的吸收程度。A取值为：0ExampleSolution（1）透光率T=20

8、%，则A=？（2）若吸光度A=0.30，则T=？第二十张，PPT共六十二页，创作于2022年6月（二）光的吸收定律：朗伯比尔定律光吸收定律：A(a+b+c) = Aa + Ab + Ac适用前提：1、入射光为平行单色光且垂直照射；2、均匀非散射体系;3、稀溶液（C 主成分吸收与纯品比较，E，光谱变形则含有杂质。1、纯度检查（杂质检查）第四十四张，PPT共六十二页，创作于2022年6月2、杂质限量检查：例：肾上腺素中微量杂质肾上腺酮含量计算： 2mg/mL -0.05mol/L的HCl溶液， 310nm下测定 规定 A3100.05 即符合要求的杂质限量0.06%第四十五张，PPT共六十二页，创

9、作于2022年6月三、定量分析：（一）微量单组分的定量方法：1、标准曲线法最经典的方法 配制一系列浓度不同的标准溶液，在相同的条件下分别测定吸光度A，绘制AC曲线（工作曲线）。根据样品的A从工作曲线中找出对应的C值。第四十六张，PPT共六十二页，创作于2022年6月Example芦丁含量测定第四十七张，PPT共六十二页，创作于2022年6月0.710mg/25mLSolution根据表中所列数据作AC工作曲线：第四十八张，PPT共六十二页，创作于2022年6月2、标准对照法：比较法、对比法 在相同的条件下配制样品溶液和标准溶液，在选定的波长处分别测定A值。根据：第四十九张，PPT共六十二页，创

10、作于2022年6月ExampleSolution 有一标准Fe3+溶液，浓度为6ug/mL，其A=0.304。而样品溶液在同一条件下的A=0.510。求样品中Fe3+的含量。第五十张，PPT共六十二页，创作于2022年6月3、吸光系数法：从手册或文献查出第五十一张，PPT共六十二页，创作于2022年6月ExampleSolution 维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度。第五十二张，PPT共六十二页，创作于2022年6月（二）微量多组分定量方法：三种情况：1两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在

11、各自max下不重叠分别按单组分定量第五十三张，PPT共六十二页，创作于2022年6月2两组分吸收光谱部分重叠 1测A1b组分不干扰可按单组分定量测Ca 2测A2a组分干扰不能按单组分定量测Ca第五十四张，PPT共六十二页，创作于2022年6月3两组分吸收光谱完全重叠 混合样品测定（1）解线性方程组法（2）等吸收双波长消去法第五十五张，PPT共六十二页，创作于2022年6月1解线性方程组法步骤：第五十六张，PPT共六十二页，创作于2022年6月2等吸收双波长法步骤：消除a的影响测b第五十七张，PPT共六十二页，创作于2022年6月消去b的影响测a 注：须满足两个基本条件选定的两个波长下干扰组分具

12、有等吸收点选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大第五十八张，PPT共六十二页，创作于2022年6月1. 可见光的波长范围是A、7601000nm B、400760nm C、200400nm D、小于400nm 2测定Fe3+含量时，加入KSCN显色剂，生成的配合物是红色的，则此配合物吸收了白光中的A、红光 B、绿光 C、紫光 D、蓝光 E、青光3在分光光度分析中，透过光强度（It）与入射光强度（I0）之比，即It / I0称为A、吸光度 B、透光率 C、吸光系数 D、光密度 E、消光度第五十九张，PPT共六十二页，创作于2022年6月4朗伯-比尔定律，即光的吸收定律，表述了光的吸光度与A、溶液浓度的关系 B、波长的关系 C、溶液液层厚度的关系D、溶液的浓度与液层厚度的关系5在吸收光谱曲线上，如果其他条件都不变，只改变溶液的浓度，则最大吸收波长的位置和峰的高度将A、峰位向长波方向移动，逢高增加 B、峰位向短波方向移动，峰高增加C、峰位不移动，峰高改变D、峰位不移动，峰高增加 第六十张，PPT共六十二页，创作于2022年6