金银花水提取液对糖代谢影响的体外实验研究

1、金银花水提取液对糖代谢影响的体外实验研究【摘要】目的研究金银花水提液在体外对-淀粉酶、-葡萄糖苷酶活性的影响。方法用超声波处理和直接水煮制备金银花水提液，采用碘-淀粉比色法和PNPG法分别测定金银花水提液对-淀粉酶、-葡萄糖苷酶活性的影响。结果两种金银花水提液对-淀粉酶的活性具有抑制作用，且抑制效果随提取液浓度的增加而增大;对-葡萄糖苷酶的活性也有抑制，超声波处理的金银花水提液的作用才能较强。结论金银花提取液在体外对-淀粉酶和-葡萄糖苷酶的活性均有一定的抑制作用，因此金银花可能具有降血糖功能。【关键词】金银花;水提液;酶活性;血糖Abstrat：bjetiveTstudytheeffetsfu

2、ltrasnitreatentandaterbiledhneysukleextratinnativitiesfaylaseand-glusidaseinvitr.ethdsHneysukleextratserepreparedbyultrasnitreatentanddiretaterbilingrespetively,thentheeffetsfhneysukleextratsnativitiesfaylaseand-glusidaseeredeterinedseparatelybyidine-starhlrietritehniqueandPNPGethd.ResultsTheresults

3、shedthatbthextratsinhititryeffetsnativitiesfaylaseand-glusidaseinanentratindependentanner.hilen-glusidase,ultrasnipressedhneysukleextratshedstrngerinhibitryeffet.nlusinHneysukleextratshaveseinhibitryeffetsinvitrntheativitiesfaylaseand-glusidase,indiatingthehneysukleayhavefuntinfreduingbldgluse.Keyrd

4、s：Hneysukle;Extratin;Enzyeativity;Bldgluse-葡萄糖苷酶是小肠内麦芽糖、蔗糖等寡糖水解的酶1。人体对淀粉、糊精、蔗糖等碳水化合物的吸收利用依赖于小肠刷状缘上-葡萄糖苷酶的活性2。目前该酶的抑制剂有防治糖尿并肥胖症等作用3。-淀粉酶可作用于淀粉内部将糖苷键裂开，使淀粉水解为糊精、复原糖等成分4。因此-葡萄糖苷酶、淀粉酶活性抑制作用的研究，对糖尿并肥胖症的治疗和预防有积极意义。金银花是我国传统的药食两用植物，主要含有绿原酸、类黄酮等生理活性成分。中医认为金银花具有抗菌、抗氧化、增强免疫、保护肝功能等诸多成效,目前对金银花已有较广泛和深化的研究5。但其是否具有

5、降血糖的作用，目前还未见研究报道。本文以传统的水煮和现代化的超声波处理金银花所得水提液作为研究对象，通过在体外考察它们对-淀粉酶、-葡萄糖苷酶活性的影响，确定金银花水提液是否可能具有降血糖作用，对金银花的进一步开发利用具有重要价值。1材料与仪器1.1药材供试材料金银花购于重庆普通超市。1.2试剂-淀粉酶，北京奥博星生物技术公司;-葡萄糖苷酶，Siga公司;PNPG(4-硝基酚-D吡啶葡萄糖苷)，Siga公司;复原型谷胱苷肽，中国医药集团上海化学试剂公司。其余试剂均为分析纯。1.3仪器KQ5200型超声波提取仪，昆山市超声仪器产品;ZFQ-S旋转蒸发器，天津玻璃仪器厂产品;UV-2405紫外可见

6、分光光度计，日本岛津产品。2方法2.1金银花提取液的制备2.1.1超声波处理金银花提取液的制备取一定量的金银花，用去离子水泡24h后，在20kHz的超声仪中处理40in，控制温度为40。过滤，用旋转蒸发仪蒸发浓缩，定容到每毫升提取液相当于0.5g(12)金银花干品。2.1.2金银花水煮提取液的制备取一定量的金银花用水煮提3次，第1次60in,过滤;第2次加水煮提40in，过滤，再加水煮提30in，合并滤液，用旋转蒸发仪蒸发浓缩，定容到每毫升提取液相当于0.5g(12)金银花干品。2.2对-淀粉酶活性作用的研究6以pH6.0、浓度为0.05g/l的可溶性淀粉液5.0l作底物，加1l浓度为0.02

7、%的-淀粉酶溶液，在60的水浴中作用，生成的糊精可与碘化物产生红色，在620n处以标准色样为参比，每隔1in读1次透光率，直到透光率大于100%的时间即为淀粉酶的活力。在反响体系中，参加不同体积的金银花提取液，测定对淀粉酶活力的影响，计算抑制率。抑制率(%)=(样本时间-空白时间)/空白时间100%2.3对-葡萄糖苷酶活性作用的研究7以PNPG作底物，-葡萄糖苷酶可分解PNPG释放出硝基酚，以Na23终止反响，在400n处测定释放出的硝基酚的量。在反响体系中，参加不同体积的金银花提取液，测定对-葡萄糖苷酶活力的影响，计算抑制率。不加金银把戏液，-葡萄糖苷酶在pH6.8，37的条件下分解PNPG

8、，测得的吸光度为1.169和1.164，平均为1.166。抑制率(%)=A样/1.166100%2.4绿原酸含量的测定8用分光光度法测定。所得标准曲线的回归方程是：Y=0.1283+0.0227X，r2=0.99672.5总黄酮含量的测定9用芦丁做标准，分光光度法测定。所得标准曲线的回归方程是：Y=0.0012+0.0358X，r2=0.9999。转贴于论文联盟.ll.3结果3.1金银花提取液对-淀粉酶活力的影响金银花提取液对-淀粉酶的活性具有抑制作用。结果见表1。表1金银花提取液对-淀粉酶活性的影响由实验结果可知，当金银花提取液的浓度为每毫升相当于0.5g干品时，它们对-淀粉酶活性的抑制作用

9、随着浓度的增加而增强;而且水煮得的提取液和超声波处理得的提取液对-淀粉酶活性的抑制差异无显著性。3.2金银花提取液对-葡萄糖苷酶活性的影响在反响体系中参加不同浓度的金银花提取液，它们对-葡萄糖苷酶的活性具有一定的抑制作用。结果见图1。图1不同浓度金银花提取液对-葡萄糖苷酶活力的影响由实验结果可知，超声波处理的金银花提取液在实验浓度的范围内，对-葡萄糖苷酶活力的抑制作用较强，抑制率一般都在60%以上;水煮得的金银花提取液对-葡萄糖苷酶活力的抑制作用较超声波处理的金银花提取液弱，在参加30l时对-葡萄糖苷酶活力的抑制率到达顶峰79.93%，以后随着参加量的增加，其抑制率反而有一定程度的下降。对提取液中绿原酸和总黄酮的含量进展了分析。结果见表2。表2金银花提取液中绿原酸和总黄酮的含量gl-1样品绿原酸总黄酮水煮提取液23.01118.79超声波提取液27.14186.69由表2可知，两种提取液中绿原酸的含量差异没有显著性，而总黄酮的含量却有较大的差异，超声波提取液总黄酮的含量比水煮提取液高36.37%。这两种提取液对-葡萄糖苷酶活力抑制作用的差异是否与黄酮的含量有关，有待进一步研究证明。4讨论饮食中的碳水化合物在-葡萄糖苷酶的作用下，释放出葡萄糖并