组织学与胚胎学-第1章绪论

1、HISTOLOGY AND EMBROLOGY组织学与胚胎学滨州医学院组胚教研室第章 组织学绪论一、组织学的内容和意义组织学（histology）是研究机体正常微细结构及其相关功能的科学。 研究水平：组织 细胞 亚细胞 分子组织（tissue）构成：细胞群和细胞外基质 细胞：机体结构和功能的基本单位，成人约有1015 个、200 余种 细胞外基质：由细胞分泌形成类型：上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官；若干功能相关的器官构成系统组织学-显微解剖学促进了生理学（physiology）的进步是病理学(pathology)的基础促进人类对自身的深入了解二、组

2、织学发展简史和当代组织学光学显微镜（light microscope，LM） 的发明16世纪末，Holland英国Hooke 1635-1703 “cell” 意大利Malpighi 1628-1694 脾，肺，肾等组织结构荷兰Leeuwenhoek 1632-1723 精子，红细胞，肌细胞法国Bichat 1771-1882 “tissue”德国 Schleiden Schwann 创立细胞学说 2. 1932 ， Ruska and Knoll (German) 电子显微镜 (electron microscope)： EM超微结构 ultrastructure：即细胞膜、细胞器、染色体等

3、亚细胞结构 Histology (microanatomy) 细胞发现和细胞学说的建立 组织学说迄今（经历了三百多年） 19世纪中期 组织学20世纪初 组化，组培 20世纪40年代 细胞，组织超微结构我国 20世纪初 从人体解剖学分化出组织学 马文昭 1886-1965 细胞水平 张作干 1907-1969 细胞，组织超微结构 三、组织学技术简介光镜技术 (Light Microscopy,LM)电镜技术 (Electron Microscopy ,EM) 组织化学术（Histochemistry ）放射自显影术（Autoradiography ）图像分析术（image analysis /

4、morphometry ）细胞培养术/组织工程（cell culture /tissue engineering）1.光镜技术常用的长度计量单位1mm=1000m1m=1000nm人眼的分辨率：0.2mm光镜分辨率：0.2m 透射电镜分辨率：0.2nm 扫描电镜分辨率: 5nm石蜡切片术（paraffin sectioning）：石蜡切片机苏木精- 伊红染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色法）： 苏木精Hematoxylin：碱性染料 伊红Eosin:酸性染料二甲苯1二甲苯2100%酒精100%酒精95%酒精95%酒精85%酒精75%酒精二甲苯2二甲苯110

5、0%酒精100%酒精95%酒精95%酒精85%酒精75%酒精苏木精染色液盐酸酒精伊红染色液水洗水洗在染色缸中 嗜碱性（basophilia）：染蓝色，细胞核、核糖体，粗面内质网 嗜酸性（acidophilia）：染红色，细胞质、线粒体、滑面内质网、溶酶体 嗜中性（ neutrophilia）：高尔基复合体HE染色，垂体远侧部除石蜡切片外，还有： 冰冻切片涂片铺片 磨片整装封片冰冻切片（Frozen section ） 血涂片骨磨片 结缔组织铺片 鸡胚整装封片除HE染色外，还有镀银染色、荧光染色等特殊染色除LM外，还有特殊显微镜:荧光显微镜Fluorescence microscope相差倒置显

6、微镜inverted phase contrast microscope共聚焦激光扫描显微镜CLSM(confocal laser scanning microscope)2.电子显微镜 Electron Microscopy （1）透射电镜（Transmission Electron Microscopy ，TEM）：观察组织细胞的超微结构分辨率: 0.2nmElectron-density电子密度高Electron-lucent电子密度低细胞结构密度大、吸附重金属多密度小、吸附重金属少电子被散射多少荧光屏上射落的电子少，暗射落的电子多，亮电镜照片上呈黑或深灰色浅灰色透射电镜图，浆细胞观察组

7、织细胞表面结构具有真实的立体感，无需制备切片分辨率: 5nm（）扫描电镜（scanning Electron Microscopy ，SEM ）：扫描电镜图，血细胞组织化学术定义：应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术，与组织学技术结合而产生，在组织切片显示某种物质的存在和分布状态种类：一般组织化学术糖类（PAS反应）脂类核酸（Feulgen反应）酶类免疫组织化学术原位杂交术一般组织化学术：组织中的某种结构成分与所加试剂发生化学反应、并呈现某种颜色，在显微镜下可观察到糖类：过碘酸希夫（Periodic Acid Schiff reaction ，PAS）反应，显示多糖和糖蛋白

8、，呈紫红色 糖 多醛 过碘酸 品红硫酸复合物 （希夫试剂，无色）紫红色反应产物PAS反应，小肠上皮杯状细胞的黏原颗粒免疫组织化学（immunohistochemistry）根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中的肽和蛋白质。用标记的抗体与组织中的抗原结合，标记物可于显微镜下观察。标记物有荧光素（荧光显微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶体金（多用于电镜观察）免疫组织化学原理模式图免疫组织化学（荧光素标记）毛细血管内皮细胞呈vWF阳性 免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记）胰岛B细胞呈胰岛素阳性免疫组织化学电镜示上皮细胞膜MAM6蛋白 （A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记）原位

9、杂交(In situ hybridization)检测基因（DNA片段）的有无、基因的表达活性（mRNA）原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量常用标记物有放射性核素和地高辛原位杂交 脐静脉内皮细胞呈心房钠尿肽阳性组织工程 (Tissue engineering)试管婴儿（Test tube baby)克隆技术四、组织学的学习方法平面结构与立体结构结构与功能静态与动态局部与整体发生发展和进化各学科间的相互渗透观察能力与空间思维能力 细胞 细胞是人体形态结构、生理功能和生长发育的基本单位。

10、细胞大小不同，形态多样。 虽然细胞的体积、形态不同，但它们的基本结构都是一样的，除了成熟红细胞以外，都由细胞膜、细胞质和细胞核三大部分构成。 细胞膜 （cell membrane） 510nm厚 液态镶嵌模型LM下能看到吗？细胞膜电镜图 生理功能： 维持细胞形态、保护作用 物质交换 有酶、受体和抗原 细胞质 （cytoplasm ） 细胞器：线粒体、核糖体、内 质网、高尔基复合体等。包含物：糖原、脂滴、色素。基质：无定形物质。线粒体 ( mitochondria)LM: HE染色，嗜酸性 铁苏木精染色，染蓝色EM： 椭圆形小体功能：提供能量线粒体模式图线粒体电镜图小肠上皮细胞 - 线粒体 铁苏

11、木素染色核糖体（ ribosome）LM：HE染色，蓝色，嗜碱性EM：球形颗粒功能：蛋白质合成的场所神经元光镜图（示核糖体）核糖体内质网（endoplasmic reticulum)单位膜形成的大小不等的管状物粗面内质网（RER）：HE，嗜碱性 参与蛋白质合成和运输滑面内质网（SER）：HE，嗜酸性 功能复杂合成自身需要的蛋白质: 游离、多聚核糖体多合成分泌出去的蛋白质： RER多粗面内质网（RER）模式图板层囊状表面附着有核糖体粗面内质网（RER）电镜图滑面内质网 （ SER）电镜图表面光滑没有核糖体附着高尔基复合体 Golgi complex LM： HE：中性EM：扁平囊状，大泡，小泡功能：蛋白质加糖、加膜的场所， 参与细胞分泌活动。高尔基复合体模式图高尔基复合体电镜图溶酶体（ lysosome）LM： HE，嗜酸性EM：外包单位膜的圆形小体，内含水解酶功能：细胞内的消化器官溶酶体电镜图糖原电镜图肝脏光镜图 （示糖原） 细胞核 nucleus 核由核膜、核液、核仁和染色质组成。 细胞核电镜图核仁：光镜：圆形或不规则形小体化学成分：核糖核酸（RNA）+蛋