淡豆豉防治早期动脉粥样硬化大鼠血管损伤的机制研究

1、淡豆豉防治早期动脉粥样硬化大鼠血管损伤的机制研究 白霞牛丽颖刘娇李清崔力剑窦玉红曹秀莲【摘要】目的研究淡豆豉防治早期动脉粥样硬化大鼠血管损伤的机制。方法采用高脂饲料喂养法建立大鼠早期动脉粥样硬化模型，同时灌胃给予淡豆豉提取物，连续10周，末次给药后取血、别离血清全自动生化分析仪检测T，TG，LDL，HDL程度，透射电镜下观察主动脉损伤的形态学变化，流式细胞仪检测主动脉内皮细胞的凋亡率、aspase-3的蛋白表达和增殖指数。结果淡豆豉组20，40g生药/kg大鼠血清T，TG，LDL程度均较模型对照组大鼠降低P0.01，主动脉内皮细胞的形态明显较模型对照组改善，内皮细胞的凋亡率、aspase-3的

2、蛋白表达均显著降低P0.01，而增殖指数显著增高(P0.01)。结论淡豆豉对早期动脉粥样硬化大鼠血管损伤有明显的保护作用，其机制可能通过下调aspase-3的蛋白表达，调节血管内皮细胞凋亡与增殖的平衡来实现。【关键词】淡豆豉早期动脉粥样硬化血管损伤aspase-3蛋白淡豆豉SeenSjaePreparatu(SSP)是由豆科植物大豆GlyineaxL.err.的成熟种子和青蒿、桑叶等中药经发酵加工而成，其中的主要成分大豆异黄酮具有广泛的生物学活性，研究资料显示大豆异黄酮的植物雌激素作用，可以降低人体多种雌激素依赖型疾病的发病率。据此思路,我们早期的研究发现淡豆豉对去卵巢大鼠脂代谢紊乱有明显的调

3、整作用，对心血管系统具有保护作用13。本实验采用高脂饲料喂养法建立大鼠早期动脉粥样硬化模型，造成血管内皮细胞损伤，讨论淡豆豉对血管内皮损伤的保护作用及其作用机制。1.1药物与试剂淡豆豉，均购自石家庄市乐仁堂药店，实验前淡豆豉提取物80%乙醇提取两次，2h/次，减压浓缩至4g生药/l备用。吉非罗齐，保定市古城药厂，批号040625，实验前用溶解，配制浓度为0.016g/l溶液备用；T，TG，LDL，HDL试剂盒，日本协和株式会社提供。1.2动物SD大鼠二级，体重180200g，雄性，由河北省实验动物中心提供，容许证号为SXK冀20221003，动物饲料亦由该中心提供。1.3仪器全自动生化分析仪瑞

4、士；透射式电子显微镜日立H-7500型；Epis-XL型流式细胞仪，美国Bekanulter公司。1.4方法1.5检测方法1.6统计学处理所得数据用SPSS软件包Versin11.5采用方差齐性检验及t检验。2结果表1淡豆豉提取物对早期动脉粥样硬化大鼠血脂及脂蛋白的影响略与模型对照组比较，*P0.05，*P0.01；n=102.2对早期动脉粥样硬化大鼠主动脉病理形态学的影响图1正常对照组10000略图2模型对照组10000略图3淡豆豉高剂量组8000略图4淡豆豉低剂量组8000略图5阳性对照组20000略3讨论本实验采用高脂食饲法造成大鼠早期动脉粥样硬化模型。实验中发现模型对照组大鼠主动脉内皮

5、细胞凋亡率明显较正常对照组大鼠升高，增殖指数明显降低，aspase-3的蛋白表达也明显高于对照组；光镜及电镜观察也都发现其血管内皮细胞有明显的受损。血管内皮细胞(VE)是介于血液与血管壁之间的屏障，其形态构造受损和功能改变，会导致血管屏障功能的损害，使血液中的脂质和单核细胞等更易沉积在内皮下间隙，进一步形成泡沫细胞，而导致高脂血症(AS)。目前被普遍承受的Rss“损伤反响学说认为，内皮细胞功能性的损伤是AS形成早期的始动环节，也说明了AS与血管内皮细胞之间关系亲密。表2淡豆豉提取物对高脂血症大鼠血管内皮细胞AP、PI、aspase-3的影响略与模型对照组比较*P0.05，*P0.01细胞凋亡是

6、机体生长发育，细胞分化和病理状态中细胞自主性死亡的过程。近几年发现细胞异常凋亡在多种心血管疾病的发生与开展中起重要的作用，特别是在高脂血症斑块中发现内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞都经历着凋亡与坏死，而凋亡占主导地位，参与AS的形成过程4，5。细胞凋亡是正常血管壁根本细胞学事件，通常情况下即有发生，在AS斑块中明显加剧，出现大量细胞凋亡与细胞增殖，组成AS斑块的病理基矗大量研究也证实了人类AS斑块中存在细胞凋亡。由于凋亡细胞在体内存在时间极短，低比例的凋亡发生即意味着大量的细胞凋亡已经发生6。aspase-3属于半胱氨酸蛋白酶，相当于线虫中的ed-3，在破坏细胞骨架结果方面有重要作用，这些蛋白酶

7、是引起细胞凋亡的关键酶，一旦被信号途径激活，能将细胞内的蛋白质降解，使细胞不可逆地走向死亡。因此，假设能控制该酶的活性对凋亡的结局可产生重要影响。本实验发现对早期动脉粥样硬化大鼠应用淡豆豉提取物后，内皮细胞aspase-3的蛋白表达下调，凋亡率较模型对照组降低，增殖指数增加。实验结果提示，淡豆豉提取物对早期动脉粥样硬化大鼠血管内皮损伤有明显的防治作用，其机制可能通过下调aspase-3的蛋白表达，调节血管内皮细胞凋亡与增殖的平衡有关，其他机制途径将另文发表。【参考文献】1王鑫国，葛喜珍，白霞，等.淡豆豉对去卵巢大鼠脂代谢的影响J.中药材，2022，269：652.2高淑丽，牛丽颖，曹秀莲，等.淡豆豉提取物抗心肌缺血作用的研究J.河北医药，2022，299：923.3牛丽颖，刘娇，崔力剑，等.淡豆豉对早期动脉粥样硬化大鼠血管内皮损伤的保护作用J.中药药理与临床，2022，235：923.4Kkx,Knaapen.TherlefapptsisinvasulardiseaseJ.JPathl,2000,190(3):267.5HanDK,Haudenshild,HngK,etal.Evidenefrapptsisinhuan