辛麻止咳颗粒中马兜铃酸的含量测定研究

1、辛麻止咳颗粒中马兜铃酸的含量测定研究【摘要】目的控制辛麻止咳颗粒中马兜铃酸的含量。方法采用高效液相色谱法建立了辛麻止咳颗粒中马兜铃酸的含量测定方法。结果该方法灵敏度高。准确可靠，可以作为辛麻止咳颗粒中马兜铃酸的质控方法。结论该品中不含马兜铃酸。【关键词】辛麻止咳颗粒细辛马兜铃酸高效液相色谱法Abstrat：bjetiveTntrlthequantityfaristlhiaidinXinazhikeGranules.ethdsHPLasusedtdeterinethententfaristlhiaidinXinazhikeGranules.ResultsTheethduldbeusedtntrl

2、thequantityfaristlhiaidinXinazhikeGranules.nlusinThereisnaristlhiaidinXinazhikeGranules.Keyrds：XinazhikeGranules;HerbaAsari;Aristlhiaid;HPL辛麻止咳颗粒是由细辛、麻黄等组成的复方颗粒剂。功能祛风散寒，宣肺止咳。用于急性支气管炎，即风寒袭肺、肺失宣畅所引起的咳嗽。方中细辛为马兜铃科植物北细辛AsaruhetertrpidesFr.Shidtvar.andshuriu(axi.)Kitag.，汉城细辛Asarusiebldiiiq.var.seulenseNak

3、ai或华细辛Asarusiebldiiiq.的枯燥全草。马兜铃科中其他数种药材被检测出马兜铃酸，马兜铃酸是硝基菲羧酸，主要含有马兜铃酸IAAI，马兜铃酸IIAAII。现代研究说明，马兜铃酸具有肾毒性作用，表现为急性马兜铃肾并慢性马兜铃肾并肾小管功能障碍马兜铃肾病1。细辛中是否含有马兜铃酸仅有报道持疑心观点，因此我们对本品中的马兜铃酸进展了检测研究。1器材Agilent1100高效液相色谱仪，UV-1206紫外分光光度计日本岛津制作所。辛麻止咳颗粒自制。马兜铃酸A对照品购自中国药品生物制品检定所批号110746-200204，用峰面积归一化法测定并计算，结果含量为96.361%。甲醇为色谱纯，水

4、为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇3.3%醋酸6139为流动相；检测波长为250n。进样量为10l。理论板数按马兜铃酸A峰计算应不低于3000。2.2供试品的制备取本品5g，精细称定，加甲醇120l，索氏提取4h，浓缩提取液，并转移至25l量瓶，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45的微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。2.3对照品的制备取马兜铃酸A对照品，加甲醇稀释制成每毫升约含0.2g的溶液，即得。2.4阴性对照品的制备取不含细辛的其余药材，按工艺制备阴性浸膏，参加适量辅料，制成空白颗粒。取适量，按“供试品的制备项下方法制备，即得。

5、2.5方法学研究2.5.1检测波长的选择取马兜铃酸A对照品，用甲醇稀释制成每毫升约含10.00g的溶液，在220400n的波长处进展扫描，经测定本品在223，250，317，388n处有最大吸收。250n波长下本品给出的色谱信息要比其它波长多，参考文献24中也多项选择用250n，因此选250n作为检测波长。2.5.2线性关系考察取马兜铃酸A对照品，用甲醇稀释制成每毫升含1g的溶液作为对照品溶液，分别精细汲取对照品溶液6，8，10，12，14l加甲醇稀释至25l，摇匀，滤过。分别精细汲取上述对照品溶液10l注入色谱仪，记录色谱图，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程，结果说

6、明，马兜铃酸A在0.141920.44736g/l范围内，呈良好的线性关系r0.9998。2.5.3重复性实验取本品5份各约5g，照供试品制备项下方法制备，依法测定，结果均未检出，说明该方法重复性良好。2.5.4精细度考察取对照品溶液重复进样6次，记录峰面积，计算，结果RSD为2.27%，该方法精细度良好。2.5.5稳定性实验取对照品溶液分别在0，2，4，6，8h进样，测定溶液的稳定性，结果RSD为1.63%，供试品在8h内稳定。2.5.6回收率实验取本品的内容物五份约2.5g，分别精细称定，再分别精细参加马兜铃酸A对照品约0.125g，按供试品制备项下的方法制成供试品溶液，依法测定并计算回收

7、率，结果平均回收率为98.6%，RSD为0.8%。本方法具有良好的回收率。2.5.7空白干扰实验取阴性对照品溶液，依法测定，在马兜铃酸A峰相应位置无干扰。2.5.8含量测定取本品9批，按供试品的制备方法制备，依法测定，结果9批均未检出。2.5.9最小检出量的测定取马兜铃酸A对照品用甲醇稀释制成每毫升含10.00g的溶液，取该溶液用甲醇稀释制成每毫升含0.1000g的溶液1%，再取0.1%的溶液用甲醇稀释制成每毫升含0.0100g的溶液0.1%。分别取上述溶液注入色谱仪，记录色谱图，测得最小检出限度为4.6310-4g信噪比21，7.4110-4g信噪比41。3讨论按对照品浓度计算，样品中实际含马兜铃酸未超过1g/g，可以忽略不计。本品检测9批样品，结果均未检出马兜铃酸A，因此规定本品不得检出马兜铃酸。本方法采用高效液相色谱法，操作简便，结果准确可靠。可以作为本品马兜铃酸的控制方法。【参考文献】1陈娅娟，吴俏银，叶惠兰，等.马兜铃酸毒理研究进展J.广东药学院学报，2022，192：156，160.2张建夫，赵辉.马兜铃酸的