生物分离与纯化技术模拟试卷十一

1、生物分别与纯化技术模拟试卷十一答案考试学科生物分别与纯化技术组、命题教师课题组考场考号考生班级系主任考生姓名装订线一、名词解说（每题3分，共15分）1盐析：是利用不一样物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入必定量的中性盐，使原溶解的物质积淀析题目得分评卷人出的分别技术。2洗脱：利用适合的溶剂，将树脂吸附的物质开释出来，从头转入溶液的过程。一3树脂的重生：就是让使用过的树脂从头获取使用性能的办理过程，树脂的重生反响是互换吸附的逆反响。4疏水层析：是利用表面偶联弱疏水性基团（疏水性配基）的疏水性吸附剂为固定相，依据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差异进行分别纯化的层析技术。5

2、过滤介质：是指能使固一液混淆料液得以分别的某一介面，往常指滤布或膜过滤中所用的膜。二、单项选择题（每题1分，共15分）1微滤膜所截留的颗粒直径为(A)题目得分评卷人A0.0210mB0.0010.02mC2nmD1nm2对于分派柱层析的基本操作错误(D)。二装柱分干法和湿法两种分派柱层析法使用两种溶剂，预先一定先使这两个相互相饱和用硅藻土为载体，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平分派柱层析合用于分别极性比较小、在有机溶剂中溶解度大的成分，或极性很相像的成分。3在酸性条件下用以下哪一种树脂吸附氨基酸有较大的互换容量（C）A羟型阴B氯型阴C氢型阳D钠型阳4以下哪项不是常用的树脂重

3、生剂（D）A110HClBH2S04、CNaCl、D蒸馏水5亲和层析的洗脱过程中，在流动相中加入配基的洗脱方法称作（C）A、阴性洗脱B、强烈洗脱C、竞争洗脱D、非竞争洗脱6活性炭在以下哪一种溶剂中吸附能力最强？（A）A、水B、甲醇C、乙醇D、三氯甲烷7在必定的pH和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作(A)A、KS盐析法B、盐析法C、重复盐析法D、分部盐析法8在超滤过程中，主要的推进力是（C）A、浓度差B、电势差C、压力D、重力9在采纳凝胶层析柱时，为了提升分辨率，宜采纳的层析柱是（A）A、粗且长的B、粗且短的C、细且长的D、细且短的10假如用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为周质，下

4、边哪一种细胞破裂的方法最正确？（C）A.匀浆法B.超声波法C.浸透压休克法D.冻融法11盐析法与有机溶剂积淀法比较，其长处是（B）A分辨率高B变性作用小C杂质易除D积淀易分别12磺酸型阳离子互换树脂可用于分别（E）A、强心苷B、有机酸C、醌类D、苯丙素E、生物碱13用于蛋白质分别过程中的脱盐和改换缓冲液的色谱是（C）A离子互换色谱B亲和色谱C凝胶过滤色谱D反相色谱14洗脱体积是（C）。A、凝胶颗粒之间缝隙的整体积B、溶质进入凝胶内部的体积C、与该溶质保存时间相对应的流动相体积D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积15以下细胞破裂的方法中，哪个方法属于非机械破裂法(A)A.化学法B.高压匀浆C.超

5、声波破裂D.高速珠磨三、判断题（每题1分，共10分）1伯胺基在pH7的溶液中使用。（）题目得分评卷人2阴树脂易受有机物污染，可用有机溶剂浸泡或淋洗。（）3吸附力较弱的组分，有较低的Rf值。（）三4凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定。（）5等密度梯度离心中，梯度液的密度要包括全部被分别物质的密度。（）6疏水柱层析可直接分别盐析后或高盐洗脱下来的蛋白质、酶等生物大分子溶液（）7采纳溶剂提取法提取中草药有效成分时，选择溶剂的原则是“相像相溶原则”。（）8丙酮，介电常数较低，沉析作用大于乙醇，因此在沉析时采纳丙酮较好。（）9中性多糖类药物常用水作溶剂来提取，也可用水浸煮，也能够用冷水浸提。（）10

6、有机溶剂（如胍、乙醇、尿素和异丙醇等）能够削弱疏水分子间的相互作用。能够用于任何规模的细胞破裂。（）.装订线四、填空题（每题1分，共15分）1影响晶体生长速度的主要要素有（杂质）、（搅拌）、（过饱和度）和（温度）。题目得分评卷人2阴离子互换树脂依据活性基团分类，可分为（强碱型），（弱碱型）和（中等强度）；其典型的活性基团分别有（季氨基）、（伯、仲、叔氨）、（强弱基团都具备）。四3工业离心设施从形式上可分为（管式），（套筒式），（碟片式），等型式。4依据干燥曲线，物料干燥可分为（恒速干燥阶段）和（降速干燥阶段）两个阶段；五、简答题（每题7分，共35分）1简述生物活性物质分别纯化的主要原理。答：生

7、物大分子分别纯化的主要原理是：1）依据分子形状和大小不一样进行分别，如差速离心与超离心、膜分别、凝题目得分评卷人胶过滤等；2）依据分子电离性质（带电性）差异进行分别，如离子互换法、电泳法、等电聚焦法；3）依据分子极性大小及溶解度不一样进行分别，如溶剂提取法、逆流分派法、分派层析法、盐析法、等电点积淀及有机溶剂分级积淀等；五4）依据物质吸附性质的不一样进行分别，如选择性吸附与吸附层析等；5）依据配体特异性进行分别，如亲和层析法等。2液一液萃取时溶剂的选摘要注意以下几点：1）采纳的溶剂一定拥有较高选择性，各样溶质在所选的溶剂中之分派系数差异愈大愈好。2）、采纳的溶剂，在萃取后，溶质与溶剂要简单分别

8、与回收。3）、两种溶剂的密度相差不大时，易形成乳化，不利于萃取液的分别，采纳溶剂时应注意。4）、要采纳无毒，不易焚烧的价廉易得的溶剂。3试述活性炭的吸附剂的吸附特色1）在水溶液中吸附力最强，在有机溶剂中吸附力较弱。2）对极性基团（-COOH、-NH2、-OH等）多的化合物的吸附力大于极性基团少的化合物，。3）对芬芳族化合物的吸附力大于脂肪族化合物。4）对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物。5）发酵液的pH与活性炭的吸附效率相关，一般碱性物质在中性下吸附，酸性下解吸；酸性物质在中性下吸附，碱性解吸。6）活性炭吸附溶质的量在未达到均衡前一般随温度高升而增添；但在高升温度时应试虑到溶质对热

9、的稳固性。4简述凝胶层析有哪些用途？作为剖析工具；作为脱盐工具生物大分子的浓缩除热原物质生物大分子的分别纯化；分子量的测定5蛋白质的纯度判定的方法有哪些。(1)色谱法用分子筛或离子互换色谱检查样品时，假如样品是纯的，应显不但调的洗脱峰。该样品在色谱性质上是均一的，称为“色谱纯”。电泳法用PAGE检查样品体现单调区带，也是纯度的一个指标，这表示样品在电荷和质量方面的均一性。能够说纯的蛋白质电泳仅有一条区带，但仅有一条区带却不必定是纯的，仅能表示它在电泳上的均一性，称为“电泳纯”。免疫化学法免疫学技术是判定蛋白质纯度的有效方法，它依据抗原与抗体反响的特异性，可用已知抗体检查抗原或已知抗原检查抗体。用此法检测的纯度称为“免疫纯”。六、事例剖析题（共10分）题目得分评卷人影响离子互换树脂互换速度的要素？树脂颗粒的大小：树脂颗粒大小要适中。六搅拌和流速。离子浓度：过稀、过浓都对互换速度不利。离子的水化半径：离子在水溶液中要发生水化，水化离子在水溶液中的大小以水化半径来表示。水化半径小的离子，较易吸附。一价阳离子；Li+Na+k+NH+Rb+C