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1、-WORD -WORD 格式-可编辑-专业资料-完整版学习资料分享-2012 级制药专业工姓名: 刘甜甜学 号 : 2012304090 班级: 制药12-2班指导老师:王日期:2014.6.11一、实验目的1、抑制或杀死微生物的一些物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的原理。2、掌握物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的试验方法。3、了解细菌的形态特征、染色特点。4、了解细菌在普通培养基、选择培养基、血平板上的菌落特征。5、掌握细菌分离划线培养的方法。6、掌握细菌的初步生化反应。7、掌握细菌密集划线法,掌握细菌K-B 药敏纸片法。二、实验内容 stain染色,镜检,观察记录细菌形态和特色特征菌与G菌
2、比G菌细胞内核糖核酸镁盐含量高,G+菌比G等电点低。实验步骤:制片:1 大小,自然干燥;固定:取含菌膜的玻片与酒精灯火焰上来回三次,使菌膜牢固附于玻片表面;染色:初染:取结晶紫一到两滴覆盖于菌膜表面,轻微摇动,维持 3040洗,切勿直接冲洗涂片区域;媒染:取卢氏碘液12 滴覆盖菌膜表面,轻微摇动,维持3040用上法细流水冲洗;95%23 , 用上法细流水冲洗;复染:取 1:10 稀释石炭酸复红覆盖涂片区域,轻微摇动,用上法细流水冲洗;吸水纸初步吸干玻片水分,然后自然干燥;镜检:于涂片区域加半滴香波油,油镜倍目镜)下。stain(1000)2:染色试验三、分离培养实验步骤示教:观察普通平板、麦康
3、凯平板、血平板、四区分离划线平板,手机摄像。分离划线培养:预实验:以灭菌接种环与普通平板背面做四区分离划线;1 以灭菌接种环取细菌少许,在普通平板上划线,划线区域约占整个平板的1/101/5,划线间不能有交叉现象;2 以灭菌接种环自第一区23 个交叉,然后依次分离划线,约占整个区域的1/31/4;3 依上法进行4 区分离划线;4 倒置平皿置3温箱培养24,观察记录实验结果,手机摄像。11:培养前2:培养后四、细菌初步生化反应:实验原理:具有的细菌,能催化过氧化氢生成水和新生态氧,继而形成分子氧出现气泡。实验步骤色素试验:取滤纸条,两次对折,以折角小心取菌落少许,小心展开,观察记录,手机拍照;氧
4、化酶试验:取上述含菌滤纸条,滴加氧化酶试剂一滴,观察记录,手机拍照;触酶试验:以灭菌接种环取细菌少许,置一洁净玻片表面,另设NS 对照,各加一滴新制的3%H2O2, 观察记录,手机拍照;图 3:色素试验、氧化酶试验(前)图 3:色素试验、氧化酶试验(前)图 4:色素试验、氧化酶试验(后)图 5:触酶试验(前)图 6:触酶试验(后)五、细菌药敏试验:MIC 呈负相关( 越小。实验步骤:2. 1 以灭菌接种环取细菌少许,与普通平板做密集划线;2.2 37观察记录实验结果,手机拍照。实验结果:77:药敏培养前8:药敏培养后时盖好并放好,以防止菌种被污染。操作应当在火焰旁做。冷却操作:加热灭菌接种环后
5、,应室温下冷却,否则会因高温杀死细菌多对实验都有所影响。以防把细菌冲洗下去。分离培养琼脂很软,划线时注意手腕用力,只在其表面划线。药敏实验:纸片旁边出现抑菌环。贴纸片时应注意力度不要把琼脂划破。七实验小结氏阳G,被酒精脱色复染成红色的为革兰氏阴性菌)色实验结果呈现为红色的棒状杆菌,细菌单个存在,染色效果非常好,实验很成功。2 个平板,由于操作不熟练,细菌分布不够均匀,有部分区域细菌并未呈单个分布,培养后的此细菌的抑制作用越强。触酶实验有气泡则为阳性,无气泡则为阴性。氧化酶实验阳性变色,阴性不变色。实验感悟在微生物实验过程中,我们还学习到了显微镜的用法,虽然在高中时我们便已学过显微镜的 3040,否则染色效果可能不明显。微生物学老师很认真负责,这也让我们受益匪浅,王老师教会我们很多微生物学知识,同时也教会我们实验室安全知识,并且努力让我们有机会去医学院实验室学习体验这个实验。我喜欢微生物学,也希望能有更多的机会接触其他的微生物,美丽又变化莫测的微生物界就这样走进了我的心里!-完整版学习资料分享-WORD -WORD 格式-可编辑-专业资料-完整版学习资料分享-WORD 格式-可编辑-专业资料-
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