羊水基质金属蛋白酶与胎膜破裂的关系

1、羊水基质金属卵白酶与胎膜破碎的干系临盆时胎膜天然破碎的机理尚不完全明晰，如今以为，胎膜中胶原的落解是其产生的紧张基矗胶原的落解依靠基质金属卵白酶(atrixetallprtEinase,P)的作用1。为探究P与胎膜正常破碎及胎膜早破(preaturerupturefebrane，PR)产生的干系，我们检测了胎膜正常破碎及PR孕妇羊水中总P的活性及其身分，现报道如下。一、资料与要领1.资料泉源：网络本院足月剖宫产临盆的孕妇60例，胎膜正常破碎者30例为比较组，PR者30例为PR组，每组中未临产、暗藏期及活泼期各10例，均无妊娠归并症。2.要领：(1)标本网罗：于剖宫产时抽取羊水3l，立即离心、过

2、滤，-70保存。(2)酶活性的测定：羊水消化生物素标识表记标帜明胶，用酶联免疫吸附(ELISA)法测定剩余明胶的含量，换算出酶的活性以37下每1l羊水12h消化的明胶量表现，单元：ng/l*12h，用加乙二胺四乙酸(终浓度80l/L)的羊水作阴性比较。3羊水中P身分的酶谱阐发：参照ll等2先容的要领举行明胶电泳，电泳完毕将凝胶置于造就皿中，经2.5%Tritn-X100洗涤后，37下孵育18h，用考马斯亮蓝G-250染色1h，末了脱色48h；酶经电泳组分后，将该处的明胶消化，染色后形成不着色的透明带。3.统计学处置惩罚：实行效果作t查验。二、效果1.比较组羊水总P的活性变革：未临产时为(491

3、5)ng/l*12h，暗藏期为(5815)ng/l*12h，活泼期为(10229)ng/l*12h。暗藏期高于未临产期，但差异无明显性，活泼期较暗藏期明显升高，差异有极明显性(P0.01)。2.PR组羊水中总P的活性变革：PR组未临产时羊水中总P活性为(8510)ng/l*12h，暗藏期为(917)ng/l*12h，活泼期为(10423)ng/l*12h。暗藏期高于未临产期，但差异无明显性，活泼期较未临产期明显升高，差异有极明显性(P0.01)。在未临产期和暗藏期，PR组羊水中总P的活性均明显高于比较组，差异有极明显性(P0.01)。3.羊水中P的酶谱变革：羊水中较明白的P带有4条，相对分子质

4、量别离为92000、83000、72000和66000。比较组未临产期羊水中以92000和72000的P条带为主，活泼期那么4条条带都有，此中相对分子质量为92000和83000的P条带所消化的明胶带，较未临产期显着增宽。PR组羊水中P的身分与比较组根本雷同，但在未临产时羊水中各P消化的明胶带较比较组宽。三、讨论1.P的特性：P是一类布局中含有锌和钙等金属离子的卵白水解酶，能水解胶原、弹性卵白、氨基葡聚糖等多种细胞外基质，如今已创造的有十几种，其布局相似，均以酶原的情势从细胞中排泄，活性都能被构造金属卵白酶按捺因子和乙二胺四乙酸按捺。比年来的研究创造，P大概在胎膜破碎、临盆及产后子宫复旧等历程

5、中发挥紧张的生理成效。2.羊水中P的身分：Vadill-rtega等3在正常临盆产妇的羊水中，检测出了3条P条带，相对分子质量别离为183000、92000和83000，别离是P-9的二聚体、酶原和活化情势。但我们创造，羊水中存在4种P身分，相对分子质量别离为92000、83000、72000和66000，未能创造183000的P-9二聚体，推测大概是人种的差异，也有大概是要领的差异。按照相对分子质量推测，92000和66000的P大概别离是P-9的酶原和活化情势，而72000和66000为P-2的酶原和活化情势。因此，羊水中P的重要身分为P-9，包罗其酶原和活化情势，毕竟是否存在P-9二聚体

6、和P-2有待进一步的研究证明。3.羊水中P活性变革与胎膜破碎的干系：胎膜完备性的保持依靠宫腔内压与胎膜强度的平衡。正常临盆活泼期宫内压增长和胎膜强度落落导致胎膜破碎。胶原的合成不敷和落解增长，引起胎膜强度落落。胎膜中胶原的大量落解大概与P活性升高有关。aj等4创造，临盆发动后胎膜构造中P的活性明显升高，并以P-9活性升高更显着；我们的研究效果表白，比较组羊水中总P的活性在产程的活泼期明显升高，从明胶酶谱来看，以P-9的升高更显着。因此活泼期羊水中总P，特殊是P-9活性的增高，引起胎膜中胶原的大量落解，大概是胎膜破碎产生的紧张生理基矗4.羊水中P活性非常与PR的干系：PR患者的胎膜中胶原的含量低

7、于正常同孕周妇女，这与其胎膜中胶原合成淘汰和剖析非常增长有关。我们创造PR组羊水中总P活性非常升高。尚有研究表白，PR患者羊水中基质金属卵白酶按捺因子的含量那么明显低于正常孕妇5。因此，羊水中总P活性非常增高和其按捺因子的低落，从而引起胎膜中胶原的过分落解，大概是PR产生的重要缘故原由之一。PR的产生与熏染及炎症严密相干6，熏染或炎症历程中产生的细胞因子如白细胞介素1、8(IL-1、IL-8)及细菌产生的脂多糖等都能诱导P的合成和活化。因此我们推测羊水中P活性的非常升高，大概是多种因素诱发PR的配合环节之一。参考文献2，llU,YunglerbGL,RsinskiKB,etal.Turprte

8、r-stiulatedr93,000gelatinaseseretedbynralandalignanthuanells:IslatinandharaterizatinftheenzyefrHT1080turells.anerResearh，1990，50:6162-6170.3，Vadill-rtegaF,Gnzalez-AvilaG,FuthEE,etal.92-KDtypeIVllagenase(atrixetallprtEinase-9)ativityinhuananihrininreasesithlabr.AJPathl，1995，146:148-156.4，ajJG,Kankfer.Ativityf72-KDand92-KDatrixetallprteinasesinplaentaltissuesfsithandithutretainedfetalebranes.Plaenta，1997，18:683-687.5，Vadill-rtegaF,HernanderzA,Gnzalez-AvilaG,etal.Inreasedatrixetallprteinaseativityandreduedtissueinhibitrfetallprteinase-1levelsinanitifluidsfrpregnaniespliatedbypr