尿液分析仪检验课件

1、第六章 尿液分析仪检验第六章 尿分析仪检验质量控制尿有形成分分析仪尿干化学分析仪本 章 内 容尿分析仪检验质量控制尿有形成分分析仪尿干化学分析仪本 章 内第一节 干化学尿液分析仪检验第一节 干化学尿液分析仪检验干化学尿液分析的发展史法国Maumene采用羊毛纤维作为试带，检测尿液中葡萄糖。1850美国人用单试纸条检测尿蛋白和葡萄糖，开创了干化学法。1956干化学尿液分析仪已能在1条试带上同时测定8-14个项目，检测更迅速，结果更准确。目前干化学尿液分析的发展史法国Maumene采用羊毛纤维作为试带5干化学尿液分析的自动化程度5干化学尿液分析的自动化程度干化学尿液分析仪组成干化学尿液分析仪组成将

2、待检的试带传送到检测区，仪器检测后将试带传送到废料盒内或手动取下试带机械系统将待检的试带传送到检测区，仪器检测后将试带传送到废料盒内或手8图7-1-1 光电系统检测原理图示意图光线照射到试带反应物表面产生反射光反射光的强度与反应颜色成反比不同强度的反射光再经光电转换器件转化为电信号进行处理光源单色处理光电转换光学系统8图7-1-1 光电系统检测原理图示意图光线照射到试带反应反图7-1-2 电路系统工作简图将光信号转换成电信号放大，经模/数转换，再用电脑进行数据分析，打印结果电路系统图7-1-2 电路系统工作简图将光信号转换成电信号放大，经模干化学尿液分析仪试带结构图7-1-3 干化学尿液分析仪

3、试带结构图单项试带发展初期基本形式多项试带含同一试带上多种检测项目的试剂模块，可同时检测多个项目。干化学尿液分析仪试带结构图7-1-3 干化学尿液分析仪试膜结构主要作用尼龙膜层保护作用，防止大分子物质污染反应绒制层包括试剂层和碘酸盐层。试剂层含有试剂成分，主要与尿液中的化学物质发生反应，产生颜色变化。碘酸盐层可防止维生素C等物质的干扰吸水层使尿液均匀快速渗入，并抑制尿液渗透到相邻反应区支持层支持作用，由尿液不浸润的塑料片制成尿液干化学法试带多层膜结构组成及主要作用膜结构主要作用尼龙膜层保护作用，防止大分子物质污染反应绒制层干化学尿液分析仪检测原理图7-1-3 干化学尿液分析仪试带结构图 试带中

4、各试剂模块与尿液中相应成分进行独立反应，显示不同的颜色。 颜色的深浅与尿液样本中的各种成分的浓度成正比。干化学尿液分析仪检测原理图7-1-3 干化学尿液分析仪试影响+试带上的各检测试剂块尿液中相应成分产生颜色发生化学反应颜色深浅与光的吸收与反射相关尿液中相应的被检测成分成比例关系+吸收光值越大,反射光值越小,被检成分的浓度越高尿液本身的颜色空白试剂(补偿垫)采用球面积分仪接受双波长反射光的方式测定试带上的颜色变化进行半定量测定。双波长的作用：消除背景光 和杂散光测定波长：被测试剂块 的灵敏特征波长 620nm：蛋白质、葡萄糖、 pH、维生素C、隐血 550nm：胆红素、尿胆原、 亚硝酸盐、酮体

5、参考波长：被测试剂块不敏感的波长，用于消除背景光和其他杂散光的影响,720nm影响+试带上的尿液中产生颜色发生化学反应颜色深浅尿液中相应的将测定的每种试剂区反射光的光亮值与空白块的反射光量值进行比较，通过计算求出反射率仪器根据反射率确定尿液中生化成份的含量12R反射率；Tm试剂块对检测波长的反射强度；Ts试剂块对参考波长的反射强度；反射率计算公式如下：Cm空白块对检测波长的反射强度；Cs空白块对参考波长的反射强度。将测定的每种试剂区反射光的光亮值与空白块的反射光量值进行比较干化学尿液分析仪检测参数及原理干化学尿液分析仪检测参数及原理参数英文缩写反应原理参考区间pHpH酸碱指示剂法随机尿：pH

6、4.58.0比重SG多聚电解质离子解聚法1.0151.025蛋白质PROpH指示剂蛋白质误差法阴性葡萄糖GLU葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法阴性胆红素BIL偶氮反应法阴性尿胆原URO醛反应、重氮反应法阴性或弱阳性酮体KET亚硝酸基铁氰化钾法阴性亚硝酸盐NIT亚硝酸盐还原法阴性隐血或红细胞BLD血红蛋白亚铁血红素类过氧化物酶法阴性白细胞LEU酯酶法阴性维生素CVitC吲哚酶法阴性尿液干化学分析仪主要检测参数及原理参数英文缩写反应原理参考区间pHpH酸碱指示剂法随机尿：pH尿液干化学分析仪试带及结果判断尿液干化学分析仪试带及结果判断干化学尿液分析法方法学评价优点标本用量较少适用于大批量标本的筛检速度快

7、，项目多，重复性好，准确性较高干化学尿液分析法方法学评价优点标本用量较少适用于大批量标本的局限性：与含硝酸盐还原酶的某些细菌反应，对于假单胞菌属和革兰氏阳性菌等无反应，易出现尿道感染漏诊。NIT尿蛋白 只对白蛋白敏感，对球蛋白不敏感，对本周蛋白不反应；易造成对IG型肾病、骨髓瘤漏诊；RBC对完整RBC及HGB均有反应；不稳定酶、肌红蛋白、菌尿会引起假阳性；高渗性红细胞易漏检。WBC只测脂酶，对中性粒细胞有反应，对淋巴细胞无反应；容易漏诊肾移植早期排异反应。不能代替病理性尿液标本的显微镜检查，对白细胞、管型和结晶的检测属于间接检测。 形态检查局限性：与含硝酸盐还原酶的某些细菌反应，对于假单胞菌属

8、和革兰Vit C : GLU、ERY假阴性；青霉素：LEU 、PRO假阴性。 药物影响 SG比重膜块只能反映尿中阳离子多少与比重计结果不一；对婴儿等低比重尿则不敏感。BIL UBG 胆红素及尿胆原膜块灵敏度比Harrison手工法低得多。KET 酮体膜块对乙酰乙酸最敏感，丙酮次之对-羟丁酸不反应。GLU只对葡萄糖产生反应,对乳糖、半乳糖、果糖及蔗糖不反应。Vit C : GLU、ERY假阴性； 药物影响 SG比重膜只做尿干化学分析可能造成：我们是仪器做的，你的尿检正常尿检报告单昨天在另家医院手工做说有问题？RBC、WBC易出现假阳性或假阴性有病理意义的尿有形成分漏检前后结果不一致结果不可通用性

9、尿干化学应 为初筛试验！只做尿干化学分析可能造成：我们是仪器做的，你的尿检正常尿昨天参数假阳性假阴性比重尿蛋白尿素10g/L、尿液pH6.5蛋白质喹宁、嘧啶、聚乙烯、吡咯酮、氯已定、磷酸盐、季铵类消毒剂、尿液pH9.0，大量青霉素尿、尿液pH500mg/L）、氟化钠、高比重尿、尿酮体（0.4g/L）胆红素吩噻嗪类或吩嗪类药物维生素C（500mg/L）、亚硝酸盐、光照尿胆原吲哚、吩噻嗪类、维生素K、磺胺药亚硝酸盐、光照、重氮药物、对氨基水杨酸尿液干化学分析仪检测假阳性、假阴性常见的原因参数假阳性假阴性比重尿蛋白尿素10g/L、尿液pH6.5参数假阳性假阴性酮体酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物试带受潮、

10、陈旧尿液亚硝酸盐陈旧尿液、亚硝酸盐或偶氮剂污染、含硝酸盐丰富的食物尿胆原、尿液pH6.0、维生素C、尿量过多、食物含硝酸盐过低、尿液在膀胱中贮存100mg/L）白细胞甲醛、毛滴虫、氧化剂、高浓度胆红素、呋喃妥因蛋白质、维生素C、葡萄糖、头孢氨苄尿液干化学分析仪检测假阳性、假阴性常见的原因参数假阳性假阴性酮体酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物试带受潮、陈旧第二节 尿液有形成分分析仪检验第二节 尿液有形成分分析仪检验尿液有形成分分析发展史1983年美国一家公司推出以电视摄像模式获取尿中有形成分图像并进行分析的尿液有形成分检查工作站1995年日本将流式细胞术和电阻抗技术结合起来，研制了新一代全自动尿液有形成

11、分分析仪尿液有形成分分析发展史1983年美国一家公司推出以电视摄像模尿液有形成分分析发展史2000年尿液有形成分数字影像拍摄系统则开启了数字图像尿液有形成分分析的先例现 今全自动尿液有形成分分析仪已普遍用于临床，且大多数可连接或合并干化学分析仪尿液有形成分分析发展史2000年尿液有形成分数字影像拍摄系统尿液有形成分分析仪分类尿液有形成分分析仪分类（一）流式细胞技术尿液有形成分分析仪流式细胞技术尿液有形成分分析仪结合半导体激光技术、鞘流技术和核酸荧光染色技术以及电阻抗原理为一体（一）流式细胞技术尿液有形成分分析仪流式细胞技术尿液有形成分流式细胞技术尿液有形成分分析流程流式细胞技术尿液有形成分分析

12、流程光学检测光学检测信号检测信号检测信号处理信号处理2022/9/292022/9/27核酸荧光染色染料菲啶 核酸成分染色羧花氰 与细胞膜 核膜和线粒体的脂层成分结合核酸荧光染色染料菲啶 核酸成分染色流式细胞技术尿液有形成分分析仪的检测参数分类参数分析参数红细胞（RBC)、白细胞（WBC）、上皮细胞（EC）、管型（CAST）、细菌（BACT）标记参数病理性管型（P-CAST）、小圆上皮细胞（SRC）、类酵母细胞（YLC）、结晶（CRYSTAL）、精子其他参数红细胞信息和红细胞分析参数、白细胞分析参数、电导率、散点图、直方图等流式细胞技术尿液有形成分分析仪的检测参数分类参数分析参数红细散点图S1

13、散点图S2散点图散点图S1散点图S2散点图散点图S3散点图B1散点图FLWFSCW散点图S3散点图B1散点图FLWFSCWRBC-FscWBC-Fsc直方图RBC-FscWBC-Fsc直方图红细胞信息RBC-P70Fsc100ch，且RBC-Fsc-DW50ch，提示为非肾小球性血尿70chRBC-P70Fsc100ch，且RBC-Fsc-DW50ch，为混合性红细胞红细胞信息主要提示红细胞的均一性，对鉴别血尿来源有一定过筛作用70%RBC-P70Fsc 70ch，且RBC-Fsc-DW 50ch，提示为 肾小球性血尿红细胞RBC-P70Fsc70chRBC-红细胞信息主要 （二）流动式数字影

14、像拍摄技术分析仪 （二）流动式数字影像拍摄技术分析仪分析仪工作原理分析仪工作原理高速频闪光源和显微摄像的光学系统每标本摄取500个视野的图片 电脑处理将每一个画面中的单独的微粒的图像分割开自动颗粒识别分析技术（APRTM）对单个有形成分图像归类高速频闪光源和显微摄像的光学系统每标本摄取500个视野的图片自动颗粒识别分析技术（APRTM）根据颗粒的大小、对比度、形状、质地四个条件对其进行分析，得到一系列描述该粒子特征的相应数值。自动颗粒识别分析技术（APRTM）根据颗粒的大小、对比度、形27项可进一步分类参数结晶体、病理管型、上皮细胞、酵母及毛滴虫、脂肪滴、异性红细胞等12项自动分类参数红细胞、

15、白细胞、白细胞团、鳞状上皮细胞、非鳞状上皮细胞、透明管型、病理管型等APRTM识别的有形成分27项可进一步分类参数结晶体、病理管型、上皮细胞、酵母及毛滴（三）静止式数字影像拍摄技术分析仪（三）静止式数字影像拍摄技术分析仪参 数红细胞白细胞上皮细胞管型结晶粘液丝等电导率参 数红细胞白细胞上皮细胞管型结晶粘液丝等电导率 （三）方法评价显微镜检查是尿液有形成分检查的金标准。 （三）方法评价显微镜检查是尿液有形成分检查的金标准。2022/9/292022/9/27第三节 尿液分析仪检验的质量控制第三节 尿液分析仪检验的质量控制质量控制分析中质量控制分析后质量控制分析前质量控制质量控制分析中质量控制分析

16、后质量控制分析前质量控制患者告知非正确采集方法对检验结果的影响尿液样本必须新鲜 指从医生工作站申请至将尿液送到检验科的质量控制，包括标本的采集运送和保存等环节（一）分析前质量控制患者告知 指从医生工作站申请至将尿液送到检验科的质量控制，包52尿液标本放置过久对尿液干化学分析仪检验结果的影响项目结果原因pH升高细菌繁殖产氨葡萄糖降低细菌繁殖分解利用糖酮体假阴性酮体挥发胆红素、尿胆原假阴性胆红素阳光照射变为胆绿素；尿胆原氧化成尿胆素亚硝酸盐假阳性体外细菌繁殖蛋白质假阳性或假阴性尿液pH改变时尿液过碱或过酸隐血假阴性，尿试带阳性而镜检阴性过氧化物酶活性减弱红细胞破坏细胞假阴性，尿试带阳性而镜检阴性白

17、细胞酯酶失活粒细胞破坏，特异性酯酶释放入尿液52尿液标本放置过久对尿液干化学分析仪检验结果的影响项目结果（二）分析中质量控制（二）分析中质量控制1. 性能评价 评价指标：符合率精密度线性携带污染率相关性生物参考区间验证1. 性能评价 评价指标：符合率精密度线性携带相关性生物2. 结果验证和显微镜复检泌尿系统疾病患者、糖尿病患者、应用免疫抑制剂患者及妊娠妇女等医生提出显微镜检查要求尿液有形成分分析仪结果异常或仪器报警等情况显微镜复检原则2. 结果验证和显微镜复检泌尿系统疾病患者、糖尿病患者、应用尿液有形成分分析仪结果异常或仪器报警尿干化学与有形成分分析仪结果不相符合或者RBC、WBC的结果相差量

18、级2级以上时尿有形成分分析仪各项结果有报警信息时应分析结果之间的关联性，注意临床诊断和检查结果的符合性尿液有形成分分析仪结果异常或仪器报警尿干化学与有形成分分析仪显微镜复核注意事项以镜检结果为诊断依据或观察疗效时不宜使用干化学过筛要结合临床表现判断结果，绝对不可只看干化学结果，忽略镜检结果当尿液外观异常时，应注意显微镜检查干化学试带的质量、稳定性及质量控制与过筛的准确性密切相关每个检测系统都应建立自己的筛选标准，筛选规则使用之前，必须经过验证显微镜复核注意事项以镜检结果为诊断依据或观察疗效时不宜使用干参数干化学显微镜镜检法原因白细胞+尿液在膀胱中贮存时间过长，致白细胞破坏、粒细胞酯酶释放+尿液以淋巴细胞或单核细胞为主，见于肾移植患者红细胞+尿液红细胞被破坏，释放Hb，尿液中含易热性触媒，肌红蛋白尿（将尿液煮沸冷却后再检测可以排除酶的影响）+少见，见于维生素C100mg/L或试带失效时干化学尿液分析仪法和显微镜镜检不符合情况与原因参数干化学显微镜原因白细胞+尿液在膀胱中贮存时间过长，致白3. 室内质控每工作日至少检测1次，任意一个试剂块的检测结果与 “靶值”偏差不超过1个等级每天用质控物尿液进行质量控制监测超过或结果在“正常”与“异常”之间波动均视为失控3. 室内质控每工作日至少检测1次，任意一个试剂块的检测结果干化学尿液分析仪室内质控干化学尿