饲料中粗蛋白质的测定

1、畜禽生产与疾病防治畜禽养分与饲料加工技术一、试验目的饲料中粗蛋白质的测定了解饲料中粗蛋白质的测定方法的适用范围、仪器设备的使用方法把握饲料中粗蛋白质的测定的原理和方法学会饲料中粗蛋白质的测定的试验操作及结果的分析二、适用范围本法适用于协作饲料和单一饲料。三、原理本法承受凯氏半微量定氮法，其原理是试样在催化剂作用下，用浓硫酸破坏饲料中的有机物质，使含氮物转化成硫酸铵。参与强碱进展蒸馏，使氨逸出，同时用硼酸溶液吸取并与之结合成为四硼酸铵， 然后以甲基红溴甲酚绿混合作指示剂，用盐酸标准溶液滴定，测出氮的含量，依据不同的饲料再乘以确定的系数通常用系数 6.25算本法不能区分蛋白氮和非蛋白氮，在测定结果

2、中除蛋白质外，还有氨基酸、酰胺、铵盐和局部硝酸盐、亚硝酸盐等，故以粗蛋白质表 示之。四、仪器设备试验室用样品粉碎机或研钵。分样筛 0.45 mm(40分析天平 0.000 1 g。凯氏烧瓶 100mL。凯氏蒸馏装置 半微量水蒸气蒸馏式容量瓶 100mL。移液管 10mL。锥形瓶 150 mL250 mL。滴定管 25mL。其他 试剂瓶、洗瓶、消煮炉或电炉。五、化学试剂硫酸(GB 625) 98%，无氮。混合催化剂O4g硫酸铜，5个结晶水(GB665)，6g硫酸钾(HG3-920)或硫酸钠(HG3-908)，均为分析纯，磨碎混匀。氢氧化钠(GB 628) 40%氢氧化钠溶液。硼酸(GB 628)

3、 2%硼酸溶液。混合指示剂甲基红(HG3-958)0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿(HG3-1220)0.53 个月。盐酸标准溶液硼砂或无水碳酸钠标定0.1 mol/L(HCl)标准溶液：8.3 mL(GB 622)，分析纯，1000 mL0.02 mol/L 盐酸( HCl)标准溶液：1.67 mL(GB 622)，分析1000 mL硫酸铵(GB1396)分析纯，枯燥。六、测定步骤消化0.21 g580 mg0.000 2 g，无损失地放入凯氏烧瓶中，参与 6.4 g 混合催化剂，与试样混合均匀， 再加 12 mL 硫酸和两粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于消煮炉或电炉上加热，开头小火，待样品焦化，泡沫消逝

4、后，再加强火力360410，直2h。蒸馏20 mL100 mL洗净，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，作为试样分解液。将半微量蒸20mL、22剂的锥形瓶内。用移液管准确移取 10 mL 试样分解液，注入蒸馏装置 的反响室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好入口玻璃塞，再加 10 mL40%氢氧化钠溶液，留神提起玻璃塞使之流入反响室，将玻璃塞塞好，并在入口处加水密封，防止漏气。加热蒸馏 4 min，降下锥形瓶，使冷凝管末端离开吸取液面，再蒸馏 1min，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均流入锥形瓶内，然后停顿蒸馏。滴定蒸馏后的吸取液马上用 0.1 mol/L 或 0.02 mol/L 盐酸标准液滴定，溶液由

5、蓝绿色变为灰红色为终点。空白测定在测定饲料样品中含氮量的同时，应做一空白比照测定，即各种0.1 moI/L0.2 mL0.02mol/L0.3 mL。七、结果计算计算公式饲料中粗蛋白质的质量分数(%)VV c 0.0140 6.2530(V/V) 100/m)12式中：m样品的质量，g；VmL；1V试样分解液蒸馏用体积mL；2V试样滴定时所需酸标准溶液的体积mL；3V(mL)；0C盐酸标准溶液的浓度(mol/L)； 0.0140每ml HClN6.25氮换算成蛋白质的平均系数。重复性每个试样取两个平行样进展测定，以其算术平均值为结果。 251%。当粗蛋白质含量在 10%25%时，允许相对偏差为 2%。当粗蛋白质含量在 10%以下时，允许相对偏差为 3%。33蒸馏步骤的检验准确称取 0.2g 硫酸铵，